Un modelo ortotópico de cáncer de vejiga murino
Summary
Los tumores de vejiga se establecen en las hembras de una forma mínimamente invasiva a través de cateterismo, la cauterización local, y posterior adhesión de las células cancerosas a los sitios de quema.
Abstract
En este sencillo procedimiento, los tumores de vejiga se establecen en las mujeres ratones C57 a través del uso de la cateterización, la cauterización local, y la adhesión celular posterior. Después de su vejiga está transuretral sondaje y drenaje, los animales son una vez más por sondaje para permitir la inserción de un alambre de platino en la vejiga sin dañar la uretra o la vejiga. Los catéteres están hechos de teflón para servir como aislante para los cables, que conducen la corriente eléctrica en la vejiga para crear una lesión por quemadura. Una unidad de electrocauterio son utilizados para entregar 2,5 W para el extremo expuesto del cable, quemando capas extracelular y proporcionar sitios de unión de las células de carcinoma que se entregan en la suspensión de la vejiga a través de un cateterismo posterior. Las células permanecen en la vejiga durante 90 minutos, tras lo cual los catéteres se retiran y la vejiga se deja escurrir de manera natural. El desarrollo de tumor se controla a través de ultrasonido. Se presta especial atención a la técnica de cateterismo en el video que lo acompaña.
Protocol
Discussion
Este método mínimamente invasivo para el establecimiento de los tumores de vejiga ortotópica en ratones hembras también se puede aplicar a otros tipos de células de MB49, a pesar de los diferentes resultados se deben anticipar. Al menos agresiva células tumorales se utilizan, aumentando ligeramente la potencia (con incrementos de 0,5 W para establecer el nuevo óptimo) rendirá un área más susceptible a la conexión de las células tumorales, y los tiempos de incubación de la vejiga para que las células inculc…
Divulgaciones
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Este trabajo fue financiado por el premio Nacional de Ciencias CARRERA Foundation (CBET-0846395) y el Departamento de Medicina Comparada, Universidad de Tulane.
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| C57Bl/6J mice | Jackson Laboratories | 000664 | 3-5-wk-old | |
| Polycarbonate cages and ventilated rack | Lab Products | Super Mouse 750 | 327mm x 190mm x 143mm |
|
| Hardwood Bedding | Harlan Teklad | Laboratory –grade SaniChips | ||
| Rodent diet | Harlan Teklad | Rodent Diet 2019 | ||
| IV Catheter | MWI | 009231 | 24 G x ¾ in. | |
| Electrocautery unit | Bovie Medical Corporation | Aaron 900 | ||
| Ultrasound unit | Sonosite | 180 Plus (Vet) | ||
| MB49 cell line | Anthony Atala, Wake Forest University Baptist Medical Center | N.A. | ||
| DMEM | Invitrogen | 21063-029 | ||
| Fetal Bovine Serum | Gemini Bio-Products | 100106 500A57B | ||
| Penicillin-Streptomycin | Invitrogen | 15140-163 |
Referencias
- Institute of Laboratory Animal Resources. . Guide for the Care and Use of Laboratory Animals. , (1996).
- Gunther, J. H., Jurczok, A., Wulf, T., Brandau, S., Deinert, I., Jocham, D. Optimizing syngeneic orthotopic murine bladder cancer (MB49). Cancer Res. 59, 2834-2837 (1999).
- Zhang, X., Atala, A., Godbey, W. T. Expression-targeted gene therapy for the treatment of transitional cell carcinoma. Cancer Gene Ther. 15, 543-552 (2008).
