Placa Sólida basado en la restricción dietética Caenorhabditis elegans</em
Summary
Aquí se presenta un protocolo para la realización de placa sólida basada en la restricción dietética en<em> C. elegans</em> Con bacterias muertas.
Abstract
Reducción de la ingesta de alimentos sin desnutrición o inanición se sabe que aumenta la vida útil y retrasar la aparición de diversas enfermedades relacionadas con la edad en una amplia gama de especies, incluyendo mamíferos. También provoca una disminución en el peso corporal y la fertilidad, así como niveles más bajos de glucosa en plasma, la insulina y el IGF-1 en estos animales. Este tratamiento se refiere a menudo como la restricción dietética (DR) o la restricción calórica (CR). El nematodo Caenorhabditis elegans se ha convertido en un importante organismo modelo para estudiar la biología del envejecimiento. Manipulaciones ambientales y genéticos se han utilizado para el modelo DR y han demostrado prolongar la vida de C. elegans. Sin embargo, muchos de los estudios reportados en la República Dominicana C. elegans se realizaron mediante la propagación de los animales en un medio líquido, mientras que la mayoría de los estudios de genética en el campo del envejecimiento se realiza en el estándar de agar sólido en placas de Petri. Aquí se presenta un protocolo estándar de DR con NGM agar sólido basado en la placa con bacterias muertas.
Protocol
Discussion
La restricción dietética (DR) se sabe que aumenta la vida útil y retrasar la aparición de diversas enfermedades relacionadas con la edad en una amplia gama de especies, incluyendo mamíferos 7.5. Manipulaciones ambientales y genéticos se han utilizado para el modelo DR en C. elegans, incluidos los gusanos de cultivo en un medio líquido semi-definido 8,9, la dilución de la fuente de alimento de bacterias en un medio líquido 10 a 12, y el uso de mutantes de comportamiento …
Divulgaciones
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Este trabajo fue apoyado por un premio de piloto del Centro de choque Nathan (P30 AG13283) y una subvención R01 (R01 AG028516) del Instituto Nacional sobre el Envejecimiento (NIA) para A.-LH
Materials
| Name of the reagent | Company | Catalogue number | Comments |
| Carbenicillin | Duchefa Biochemie | C0109.25 | Dissolved in water. |
| Kanamycin | Roche | 10106801001 | Dissolved in water. |
| Bacto-peptone | Becton, Dickinson and company | DF0118072 | |
| Bacto-tryptone | Becton, Dickinson and company | DF0123075 | |
| Bacto-yeast extract | Becton, Dickinson and company | DF0127071 | |
| Agar | Becton, Dickinson and company | DF00145170 | |
| Sterile culture tube | USA Scientific | 1485-0810 | |
| Spectrophotometer | Amersham Biosciences | Gene Quant pro | Amersham is now part of GE Healthcare. |
| Dissecting Microscope | Zeiss | Stemi 2000 | |
| Centrifuge | Beckman Coulter | Accuspin FR |
Referencias
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