Do-It-Yourself dispositivo per il recupero di campioni crioconservati cadere accidentalmente nelle cisterne criogeniche
Summary
Presentiamo qui un basso costo, durevole cryotolerant dispositivo per il recupero del campione da serbatoi Dewar riempiti con azoto liquido. La facilità di costruzione e la progettazione modulare del dispositivo rende il processo di recupero campione da serbatoi criogenici sicuro e facile.
Abstract
L'azoto liquido è incolore, inodore, estremamente freddo (-196 ° C) di liquido mantenuto sotto pressione. È comunemente usato come fluido criogenico per conservazione a lungo termine di materiali biologici come sangue, cellule e tessuti 1,2. La natura criogenico di azoto liquido, mentre l'ideale per la conservazione del campione, può causare congelamento rapido dei tessuti vivi a contatto – noto come 'criogenico burn' 2, che possono portare a gravi congelamenti in persone strettamente coinvolte nella conservazione e il recupero dei campioni di Dewars. Inoltre, come azoto liquido evapora riduce la concentrazione di ossigeno nell'aria e possono causare asfissia, specialmente in spazi ristretti 2.
Nei laboratori, i campioni biologici sono spesso conservati in cryovials cryoboxes o impilati in rack in acciaio inox all'interno dei serbatoi Dewar 1. Questi scaffali sono provvisti di un albero lungo per evitare scatole di scivolare fuori dai rack e sul fondo dellaDewars durante la routine di gestione. Troppo spesso, tuttavia, scatole o fiale con i campioni preziosi scivolare fuori e si depositano sul fondo del serbatoio di azoto liquido riempito. In tali casi, i campioni possono essere tediously recuperato dopo il trasferimento della azoto liquido in un contenitore di riserva o eliminazione. Le scatole e flaconi possono essere relativamente sicuro recuperato dal svuotato Dewar. Tuttavia, la natura criogenico di azoto liquido e il suo tasso di espansione rende pericolosa affondata il recupero del campione. È comunemente raccomandato da Uffici sicurezza che il recupero del campione non essere effettuata da una sola persona. Un'altra alternativa è quella di utilizzare grabber fresche reperibili in commercio o pinze per estrarre i flaconi 3. Tuttavia, la visibilità limitata all'interno degli oscuri Dewars pieni di liquido costituisce un grande limite nel loro utilizzo.
In questo articolo, si descrive la costruzione di un dispositivo di recupero Cryotolerant fai da te, che rende il recupero del campione da Dewar contenente liquidi criogenici sia sicuro unond facili.
Protocol
Discussion
Uno dei metodi più comuni di recupero cryoboxes e cryovials dal fondo del serbatoio Dewar è decantare azoto liquido in un contenitore di riserva ed estrarre i campioni rimanenti nel pallone o galleggiare in azoto liquido decantato. Questo è, tuttavia, una pratica sicura, che può provocare ustioni criogeniche o di asfissia a causa di una prolungata esposizione ai vapori di azoto liquido 2. Altro modo comune per il recupero dei caduti cryovials comporta l'uso di pinze esageratamente 3. Tuttav…
Divulgaciones
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
DIY criogenico dispositivo di recupero era stato testato in corso dei progetti "prenilazione proteica Modeling batteriche nelle cellule eucariotiche usando la bioinformatica e approcci molecolari", promosso dal Premio Mary Louise Andrews per il programma di ricerca sul cancro, Virginia Academy of Science ", significato fisiologico di RNA editing in Plasma Le cellule dendritiche "promosso dal Jeffress F. Thomas e Kate Miller Jeffress Memorial Trust e contratto 16.740.11.0364 Stato (Ministero della Scienza e Istruzione, Russia). Vorremmo ringraziare Beth Eom per l'assistenza con l'esperimento integrità RNA.
Materials
| Name of the reagent | Company | Catalogue number | Comments |
| Hillman Group Plated Slotted Flat 1-3/8 x 4 feet; 14 Gauge | Local Hardware shop | N/A | 1 unit required |
| Crown Bolt Stainless Steel #6 – 32 x 3/8 in. Oval Head Phillips Drive Machine Screw | Local Hardware shop | Model # 42281 | 4 units required |
| Crown Bolt 3/8 in. x 1-1/2 in. Zinc-Plated Steel Fender Washers | Local Hardware shop | Model # 20122 | 4 units required |
| Crown Bolt Zinc Plated #8-32 Machine Screw Nut | Local Hardware shop | Model # 18512 | 4 units required |
| Simpson Strong-Tie BC40Z 4 In.x4 in. Half Base | Local Hardware shop | Model # BC40Z | 2 units required |
| Simpson Strong-Tie 6 in. x 6 in. T Strap | Local Hardware shop | Model # 66T | 1 unit required |
| Oneida 6″ Mesh Strainer | Local Grocery shop | Model # 7859W | 1 unit required |
| The Hillman Group Galvanized Hex Nuts 3/8-16 | Local Hardware shop | Model #:810509 | 6 units required |
| The Hillman Group Galvanized Hex Bolts 3/8- 16 | Local Hardware shop | 4 units required | |
| Foam for insulation | Local Hardware shop | 1 unit required | |
| Screw Driver | Local Hardware shop | 1 unit required | |
| Pliers | Local Hardware shop | 1 unit required |
Referencias
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