私たちは、8週間、胚性脳幹神経幹細胞は、病変部位に移植後T4脊髄離断ラットの心臓血管のパラメータを記録するために無線遠隔測定システムを使用するためのプロトコルを提示する。テレメトリーを正確に意識的に自由に移動し、脊髄損傷ラットにおける心血管機能を評価するための高度な技術です。
ハイ胸部または頸髄損傷(SCI)は、心臓血管機能障害につながることができます。心臓血管のパラメータを監視するために、または緑色蛍光タンパク質を発現する胚性脳幹由来神経幹細胞の移植なしT4脊髄離断を受けたラットの大腿動脈に無線送信機に接続されたカテーテルを移植した。そのようなカニューレ挿入またはテールカフなどの他の方法に比べて、遠隔測定が連続的に自由に移動する動物における血圧および心拍数を監視することが有利である。また、長期複数のデータの取得が可能である。脊髄損傷ラットでは、結腸直腸拡張に応じて、非拘束状態と自律神経反射異常の下で基礎心血管データが正常に記録された。送信機は脊髄離断前に移植される場合に加えて、SCIの前と後の心血管パラメータは同じラットに比較することができる。記載されtelemetの1つの制限ryの手順は、大腿動脈内注入は、同側の後肢への血液供給に影響を与えることができることである。
心血管機能障害は、高レベルでの脊髄損傷(SCI)後に発生します。それは、無秩序な血圧および心拍数安静時、起立性低血圧、運動誘発性低血圧、および損傷レベル1,2下の感覚刺激に反応して高血圧や圧反射媒介徐脈のエピソードを特徴自律神経反射異常で明らかにされている。これらの症状は、脊髄損傷患者の日常生活を妨害する。したがって、SCIと実験的な治療法と動物での心血管系の変化の調査のための効果的なツールを確立することが重要である。
動物において心臓血管機能を調べるために、いくつかの技術は、血圧および心拍数をモニターするために使用されている。非侵襲尾カフ末梢血圧3を測定するために使用することができるのに対し、中央の心血管パラメータは、カニューレ挿入およびテレメトリー記録することができる。他の方法、テレと比較するとmetryは、それが自由に動く動物および心血管機能4の長期モニタリングに連続記録を可能にする主な利点を有している。 SCIの動物モデルにおいて、実験的刺激後の末梢血圧の変化が検出されるのに十分な大きさでなくてもよい。したがって、適切な心臓監視技術は、SCIを持つ動物のために選択する必要があります。
本研究では、無線遠隔測定システムは、完全な脊髄離断後の成体ラットにおける血管機能をモニターするために導入した。ラットは、損傷部位に同系ラットの胚14日目(E14)脳幹由来神経幹細胞(BS-NSCの)の移植片を受けた。けがのない移植ナイーブラットは、損傷していないラットを対照とした。遠隔測定の手順は、送信機滅菌注入( 図1)、基底心血管パラメータの記録、結腸直腸拡張によって誘発される応答、および送信機の洗浄とを含むストレージ。
伝統的に、流体充填されたカニューレを動脈に挿入し、各動物11における端末スナップショットとして心臓血管のパラメータを記録するために圧力変換器に接続されている。連続して長い時間のための心血管系のパフォーマンスを監視するには、無線遠隔測定システムは、多くの研究室で使用される。このより洗練されたツールは、自由に動物を移動させること、意識的に血圧を記録…
The authors have nothing to disclose.
The work was supported by grants from NIH/NINDS (NS054883), Craig H. Neilsen Foundation (280072), and the Veterans Administration and Canadian Spinal Research Organization. We thank the Rat Resource and Research Center, University of Missouri, Columbia, Missouri, for providing GFP rats.
Table of Specific Materials/Equipment: | |||
Reagents | Company | Catalogue | Comment |
Fibrinogen (rat) | Sigma | F6755-25MG | 2 hr at 37oC to dissovle |
Thrombin (rat) | Sigma | T5772-100UN | Dissovle in 10 mM CaCl2 |
1% Terg-A-Zyme | Sigma | Z273287 | Enzymatic solution for telemeter cleaning |
Fluorogold | Fluorochrome | Dissovle in distilled water and avoid light | |
Telemeter (PA-C40) | Data Sciences International | ||
Telementric recording and analysis system | Data Sciences International | Signal stimulator, Data Exchange Matrix, receivers, Ambient pressure reference monitor | |
Balloon-tipped catheter | Edward Lifesciences | 111F7-P | For colorectal distension |