Esta película muestra cómo adquirir la hemodinámica sistémica y hepática en los ratones. Todo el monitoreo incluye la adquisición de los parámetros vitales, presión arterial sistémica, la presión venosa central, tasa de flujo de la arteria hepática común, y la presión de la vena porta, así como la velocidad de flujo portal en ratones.
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Artículo de método
Monitoreo de Parámetros sistémicos y hemodinámicos hepática en ratones
En este artículo
Resumen
Resumen
El uso de modelos de ratones en la investigación experimental es de enorme importancia para el estudio de la fisiología hepática y alteraciones fisiopatológicas. Sin embargo, debido al pequeño tamaño del ratón, detalles técnicos del procedimiento de monitorización intraoperatoria adecuado para el ratón se describen raramente. Anteriormente hemos informado de un procedimiento de control para obtener parámetros hemodinámicos para las ratas. Ahora, se adaptó el procedimiento para adquirir los parámetros hemodinámicos sistémicos y hepáticas en ratones, una especie diez veces menor que las ratas. Esta película demuestra la instrumentación de los animales, así como el proceso de adquisición de datos necesaria para evaluar la hemodinámica sistémica y hepática en ratones. Parámetros vitales, incluyendo la temperatura corporal, la frecuencia respiratoria y la frecuencia cardíaca se registraron durante todo el procedimiento. Parámetros hemodinámicos sistémicos consisten en la presión de la arteria carótida (CAP) y la presión venosa central (PVC). Parámetros de perfusión hepática incluyen portal de vpresión ein (PVP), la tasa de flujo portal, así como la velocidad de flujo de la arteria hepática común (tabla 1). Instrumentación y adquisición de datos para registrar los valores normales se completó en 1,5 h. Parámetros hemodinámicos sistémicos y hepáticas se mantuvieron dentro de los rangos normales durante este procedimiento.
Este procedimiento es difícil pero factible. Ya hemos aplicado este procedimiento para evaluar la hemodinámica hepática en ratones normales, así como durante la hepatectomía parcial del 70% y en el lóbulo de hígado de sujeción experimentos. PVP media después de la resección (n = 20), fue 11,41 ± 2,94 cmH 2 O que fue significativamente mayor (P <0.05) que antes de la resección (6,87 ± 2,39 cmH 2 O). Los resultados de lóbulo hepático sujeción experimento indicaron que este procedimiento de control es sensible y adecuado para detectar pequeños cambios en la presión portal y la tasa de flujo portal. En conclusión, este procedimiento es fiable en las manos de un micro-cirujano experimentado, pero debe limitarse a experiments donde los ratones están absolutamente necesarios.
Introducción
El objetivo general de este vídeo era demostrar un procedimiento de control en tiempo real para la obtención de los parámetros hemodinámicos sistémicos y hepáticas. La razón fundamental para el desarrollo de este procedimiento es su gran valor para las intervenciones experimentales en ratones que requieren la obtención de los parámetros hemodinámicos sistémicos y hepáticas. El procedimiento se puede aplicar a los animales no tratados previamente y durante o después de una intervención quirúrgica experimental hepato-biliar dado, tal como la hepatectomía parcial, la ligadura de la vena porta y trasplante de hígado.
Adquisición de los datos ....
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Protocolo
Vivienda y todos los procedimientos fueron llevados a cabo de acuerdo con el Animal Welfare Legislación alemana.
1. calibración de sensores (Siga las instrucciones del fabricante para calibración de sensores)
1.1) calibración catéter Millar. Pre-empapar la punta del catéter en agua estéril o solución salina durante 30 min antes de equilibrar (puesta a cero) y la calibración.
- Conecte el sensor millar al canal millar1 del amplificador de puente e insertar la punta del sensor millar en la columna de agua.
- Establezca el valor de la columna de agua a 0 cmH 2 O. En la ventana de software....
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Resultados
Parámetros vitales de los ratones, como la frecuencia respiratoria y la frecuencia cardíaca son, evidentemente, mucho más alto que en la rata. La media de la presión arterial sistémica y la presión de la vena yugular son similares a los valores de rata e incluso similares a los datos humanos.
Datos hemodinámicos hepáticos son obviamente diferentes. Se obtuvieron valores normales de 8 ratones. El flujo de sangre en ratones normales Portal osciló entre 1.6 a 2.3 ml / min. El flujo en la arteri.......
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Discusión
Monitoreo de la hemodinámica hepática es una importante herramienta de investigación en hepatología y cirugía hepatobiliar. Adquisición de los datos hemodinámicos hepáticos ayuda a caracterizar el efecto de los procedimientos hepatobiliares en el sistema circulatorio. También es necesaria la adquisición de datos hemodinámicos hepáticos para estudiar el efecto de fármacos que afectan la presión portal y el flujo portal, por ejemplo, según sea necesario en los estudios que evalúan fármacos vasoactivos.
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Divulgaciones
Los autores declaran que no tienen intereses financieros en competencia.
Agradecimientos
Esta investigación fue apoyada por el Ministerio Federal Alemán de Educación e Investigación (BMBF) financiado "Red hígado virtual". Me gustaría dar las gracias a Frank Schubert y René Gumpert desde el centro de prensa del Hospital Universitario de Jena por su ayuda en la producción del vídeo y la creación de la animación e Isabel Jank para grabar el audio.
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Materiales
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| PowerLab 16/30 | ADInstruments | PL3516 | |
| Amplificador de puente cuádruple | ADInstruments | FE224 | Amplificador de puente |
| Animal Bio Amp | ADInstrumentos | FE136 | |
| Electrodos de aguja para FE136 (3 unidades) | ADInstrumentos | MLA1213 | |
| módulo de caudalímetro perivascular | Transonic | TS420 | |
| Flowprobe MA0.5PSB/MA1PSB | Transonic | MA0.5PSB/MA1PSB | |
| SPR-1000 Catéter de presión de ratón Millar | instruments | 841-0001 | |
| catéter lleno de líquido | Terumo | SR+DU2619PX | 26G, 0,64 veces; |
| Micro tijeras de | F & middot; S· L | Nº 14058-09 | |
| micro serrefine | F· S· L | No.18055-05 | |
| Aplicador de micro abrazaderas | F· S· L | Nº 18057-14 | |
| Micropinzas rectas | F· S· L | Nº 00632-11 | |
| Micropinzas curvas | F· S· L | Nº 00649-11 | |
| portaagujas | F· S· L | Nº 12061-01 | |
| 6-0 | ethicon | ||
| de seda 6-0 | ethicon | ||
| prolene 7-0 | ethicon | ||
| prolene 10-0 | ethicon | ||
| Dispositivo de corte de cola | Kent Scientific | ||
| www.kentscientific.com LabChart7 | ADInstrumentos | software de análisis de datos |
Referencias
- Albuszies, G., et al. Effect of increased cardiac output on hepatic and intestinal microcirculatory blood flow, oxygenation, and metabolism in hyperdynamic murine septic shock. Crit Care Med. 33 (10), 2332-2338 (2005).
- Bernhard, W., et al.
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Reimpresiones y permisos
