マウスにおける全身および肝血行動態パラメータの監視
Summary
このフィルムは、マウスにおける全身および肝臓の血行動態を取得する方法を示します。全体の監視は重要なパラメータは、全身血圧、中心静脈圧、総肝動脈流量、および門脈の圧力、ならびにマウスにおけるポータル流量の取得を含む。
Abstract
実験的研究のマウスモデルを使用することは肝生理学および病態生理学的障害の研究のために莫大な重要なものである。しかし、マウスの小さなサイズのために、マウスに適した術中監視手順の技術的な詳細はほとんど記載されなかった。以前私達はラットの血行動態パラメータを取得するために監視手順を報告している。今、私たちは、ラットより10倍小さい種を、マウスにおける全身および肝臓の血行動態パラメータを取得するための手順を適合される。この映画は、動物の計装だけでなく、マウスでの全身および肝臓の血行動態を評価するために必要なデータ取得処理を示しています。体温、呼吸数および心拍数などのバイタルパラメータは、手順全体を通して記録した。全身の血行動態パラメータは、頸動脈圧（CAP）および中心静脈圧（CVP）で構成されています。肝灌流パラメータは、ポータルのVを含むアイン圧力（PVP）、ポータル流量ならびに肝動脈（表1）の流量。正常値を記録する計測機器とデータ取得は、1.5時間以内に完了した。全身および肝臓の血行動態パラメータは、この手順の間、正常範囲内であった。
この手順では、困難なく実現可能である。我々はすでにだけでなく、70％部分肝切除中および肝葉クランプ実験で、正常なマウスでは肝血行動態を評価するために、この手順を適用している。切除回（n = 20）、切除（6.87±2.39 CMH 2 O）前よりも有意に高かったCMH 2 O（P <0.05）11.41±2.94であった後にPVPを意味する。肝葉クランプ実験の結果は、この監視手順は、機密と門脈圧とポータル流量の小さな変化を検出するのに適していることが示された。結論として、この手順は、経験豊富なマイクロ外科医の手の中に信頼性があるが、EXPに制限する必要がありますマウスは絶対的に必要とされているeriments。
Introduction
このビデオの全体的な目標は、全身および肝臓の血行動態パラメータを取得するためのリアルタイム監視手順を実証することであった。この手順を開発するための理論的根拠は、全身および肝臓の血行動態パラメータを取得する必要とするマウスでの実験的介入のための大きな価値である。手順は、ナイーブ動物に、そのような部分肝切除などの与えられた肝胆実験的外科的介入、門脈結紮と肝移植の間または後に適用することができる。
げっ歯類における肝血行動態データの取得は、提案された侵襲的な処置を必要とします。肝灌流は非侵襲的に得ることができない。しかし、全身血圧を取得するための選択肢がある。このような尾カフ技法8として監視技術は、ラットとマウスの両方で血圧を取得するために利用されている。尾カフ技術はconsciで適用することができるOUの動物。血圧を測定する場合、動物は特定の不快な位置に配置して固定する必要がある。テールカフデバイスのマニュアルでは、製造業者は、マウスが神経質になって、尾部に循環を減少させる可能性があると強調してもよいと述べている。そのような状況下では、尾部で取得された末梢血圧は、中心血圧よりもはるかに低くてもよい。
完全な監視手順は、データ取得のための一連のセンサを使用して統合されたマルチチャネルモニタを用いて行った。血圧は、顕微鏡下で注意深く顕微解剖し、露光後のそれぞれの血管にカテーテルを挿入した。流量は、各容器の周囲に遷音速流プローブを配置することによって測定した。
すでにSINGLに匹敵する生理学的な血行動態データを総合的に直列に生じたラットでは、同様の術中監視手順を報告した他のグループ7から通知の電子データ。そこで私たちは、マウス、ラットよりも小さい10倍種にそれを適応させるための良い基盤を表現するには、次の手順を検討した。ラットの手順との重要な違いは、血圧データの代わりに、流体ベースのカテーテルシステムを取得するためのMillarカテーテルの使用である。フローデータは、遷音速流プローブを、対応するラットの血管よりもわずかはるかに小さいものと取得した。
による動物の小さなサイズのために、マウスの計測は、技術的に難しいが、実行可能である。インスツルメンテーションが完了すると、事前定義された設定ファイルを使用することができるので、データ取得および一次寿命データ解析は、簡単である。設定ファイルは、一連の実験の初めに一度定義されると、すべてのその後の実験のために保存して使用することができる有する。
今まで私たちは、急性実験で肝血行動態の影響を評価するには、この手順を適用した。私たちは、CAを測定し前と直後に70％部分肝切除（PH）後、および/デクランプ実験をクランプ中のPとPVP。私たちは、肝臓質量の完全90％に相当質量中央の短い（5分）、クランプと左側葉に続く肝臓の20％を代表する右葉の肝十二指腸靭帯をクランプ。デクランは中央値と左側葉を解放に続いて右葉からクランプを解除する作業を始めています。最大クランプ時間は10分未満であった。
Protocol
Representative Results
Discussion
肝血行動態のモニタリングは、肝臓学及び肝胆道外科における重要な研究ツールである。肝血行動態データの取得は、循環系に肝胆手続きの効果を特徴づけるために役立ちます。血管作用薬を評価する研究では、必要に応じて肝血行動態データの取得はまた、 例えば、門脈圧とポータルの流れに影響を与える薬剤の効果を研究するために必要とされる。
小さなサ?…
Divulgaciones
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
この研究は、「仮想肝ネットワーク」の資金教育研究ドイツ連邦Ministery（BMBF）によってサポートされていました。私はビデオを生成すると音声を記録するためのアニメーションとイザベル素早く方向を変えるの作成に彼らの助けのためのイエナ大学病院のメディアセンターからフランクシューベルトとルネグンペルトに感謝したいと思います。
Materials
| Name of Material/ Equipment | Company | Catalog Number | Comments/Description |
| PowerLab 16/30 | ADInstruments | PL3516 | |
| Quad Bridge Amp | ADInstruments | FE224 | Bridge amplifier |
| Animal Bio Amp | ADInstruments | FE136 | |
| Needle Electrodes for FE136 (3 pk) | ADInstruments | MLA1213 | |
| Perivascular Flowmeter Module | Transonic | TS420 | |
| Flowprobe MA0.5PSB/MA1PSB | Transonic | MA0.5PSB/MA1PSB | |
| SPR-1000 Mouse Pressure Catheter | Millar instruments | 841-0001 | |
| fluid filled catheter | Terumo | SR+DU2619PX | 26G, 0.64×19mm |
| micro scissors | F·S·L | No. 14058-09 | |
| micro serrefine | F·S·L | No.18055-05 | |
| Micro clamps applicator | F·S·L | No. 18057-14 | |
| Straight micro forceps | F·S·L | No. 00632-11 | |
| Curved micro forceps | F·S·L | No. 00649-11 | |
| needle-holder | F·S·L | No. 12061-01 | |
| 6-0 silk | ethicon | ||
| 6-0 prolene | ethicon | ||
| 7-0 prolene | ethicon | ||
| 10-0 prolene | ethicon | ||
| Tail cut-off device | Kent Scientific | www.kentscientific.com | |
| LabChart7 | ADInstruments | data analysis software |
Referencias
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