マウスにおける異子宮頸心臓移植
Summary
The cuff technique shortens and facilitates the model of heterotopic cervical heart transplantation in mice by avoiding technically challenging suture anastomoses of small vessels. The technical details shown in this video paper should allow researches to establish this model in their laboratories.
Abstract
The heterotopic cervical heart transplantation in mice is a valuable tool in transplant and cardiovascular research. The cuff technique greatly simplifies this model by avoiding challenging suture anastomoses of small vessels thereby reducing warm ischemia time. In comparison to abdominal graft implantation the cervical model is less invasive and the implanted graft is easily accessible for further follow-up examinations. Anastomoses are performed by pulling the ascending aorta of the graft over the cuff with the recipient’s common carotid artery and by pulling the main pulmonary artery over the cuff with the external jugular vein. Selection of appropriate cuff size and complete mobilization of the vessels are important for successful revascularization. Ischemia-reperfusion (I/R) injury can be minimized by perfusing the graft with a cardioplegic solution and by hypothermia. In this article, we provide technical details for a simplified and improved cuff technique, which should allow surgeons with basic microsurgical skills to perform the procedure with a high success rate.
Introduction
心臓移植モデルは、頻繁にI / R傷害、同種移植片拒絶反応、移植後血管障害および免疫調節剤の効果を調査するために使用されます。マウスモデルは、既知の免疫学的および遺伝的背景、多くの近交系およびトランスジェニック株および比較的低い実験コストの可用性のような多くの利点を兼ね備えています。
1973年には、マウスでの腹部心臓移植の技術は、最初のコリーら 1で説明しました。このモデルでは移植片は、レシピエントの腹部大動脈へと下大静脈への主肺動脈の上行大動脈の端側吻合によって血管再生されます。 1991年には、マウスでの子宮頸心臓移植のための縫合技術は、Chenら2によって説明されました。このモデルでは、逆行性冠動脈灌流は、GRの上行大動脈に受信者の頸動脈の吻合によって確立されました後方。静脈血の右心房、右心室に冠状静脈洞を介したドレインとは、レシピエント外頚静脈（ 図1）への肺動脈を通って排出されます。腹部グラフト移植と比較して、子宮頸モデルは、低侵襲性であり、移植片の表面的な場所は、追加のフォローアップ検査（ 例えば、触診、心エコー検査、生体蛍光顕微鏡）3,4のために非常に容易にアクセスが可能になります。
技術改良5,6にもかかわらず、このモデルのより広範な使用は、吻合漏れや血栓症の発生率が高いと小血管の縫合吻合を実行するための技術的な難しさに限定されていました。 1991年に、松浦ら 。血管壁が大幅に子宮頸心臓移植7のモデルを容易に合成シリンダー、上で裏返されたカフ技術を導入しました。技術はFUましたrtherは腎8、膵臓9、手足10、肝11,12、肺13,14および血管移植15を含む様々な実験移植モデルに採用。縫合技術と比較して、吻合のための所要時間と、従って、暖かい虚血時間が短く、カフ法16を用いて、より少ない血管合併症が大幅にあります。また、高い成功率を使用して操作を実行するためにマイクロサージェリーに少しのトレーニングで外科医を可能にします。カフ技術の欠点は、脳灌流を変更することができる総頸動脈の前提条件ライゲーションです。
このビデオの論文では、マウスの子宮頸心臓移植のための改良されたと単純化されたカフ手法を提示します。
Protocol
Representative Results
Discussion
我々は、様々な実験的な設定で、90％以上の成功率で200以上の心臓移植を完了しました。ここに記載された技術では、完全な手順は、経験豊富な外科医によって60分以内に行うことができます。臓器獲得の前に子宮頸部の容器を調製することにより、総グラフト虚血時間は20分に制限することができます。移植のための時間（ウォーム虚血時間）縫合技術16に比べカフ技術を使用して大…
Divulgaciones
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
M.-A. Deutsch is supported by Dr. Rusche Forschungsprojekt (2014) Deutsche Stiftung für Herzforschung and Deutsche Gesellschaft für Thorax- Herz- und Gefäßchirurgie. M. Krane is supported by Deutsche Stiftung für Herzforschung (F/37/11), Deutsches Zentrum für Herz Kreislauf Forschung (DZHK B 13-050A; DZHK B 14-013SE) and Deutsche Forschungsgemeinschaft (KR3770/7-1; KR3770/9-1)
Materials
| Forceps JFC-7.2 | S&T | P-00036 | Curved tip 0.20 mm |
| Vessel dilatator D-5a | S&T | S-00124 | |
| Adventita scissor | S&T | S-00102 | |
| Vascular clamp B-1V | S&T | S-00396 | |
| Yasargil Clip | Peter Lazic | 65,097 | 3.5 mm lenght |
| Bipolar forceps | Micromed | 148-100-011 | tip 0.25 mm |
| Polyimide tubes | River Tech Medical | 19-24 gauge | |
| 8.0 silk ligatures | Catgut | ||
| Custodiol HTK solution | Essential Pharmaceuticals |
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