I microarray sono strumenti importanti per profilare l’espressione genica e si basano sul legame complementare tra sonde attaccate a trucioli di vetro e acidi nucleici derivati da campioni. Utilizzando questi array, gli scienziati possono valutare contemporaneamente l’espressione di migliaia di geni. Inoltre, i profili di espressione di diverse cellule o tipi di tessuto possono essere confrontati, consentendo ai ricercatori di dedurre come l’espressione di diversi geni cambia durante i processi biologici, e quindi ottenere informazioni su come i geni possono funzionare in percorsi o reti.
Qui, JoVE spiega i principi alla base dei microarray. Questo è seguito da un protocollo generale per l’esecuzione di un esperimento di microarray e una breve introduzione all’analisi dei dati dei microarray. Concediamo una discussione su come gli scienziati stanno attualmente utilizzando i microarray, ad esempio per confrontare l’espressione genica tra diversi tipi di cellule derivate da tessuti cancerosi e non cancerosi, per studiare importanti problemi biologici.
Procedimiento
I microarray di DNA sono strumenti ampiamente utilizzati per misurare contemporaneamente l’espressione di molti geni diversi. Sono costituiti da migliaia di sonde, ognuna delle quali rappresenta un gene diverso, immobilizzate su “chip” o vetrini e si basano su ibridazioni complementari per valutare l’espressione genica in diverse condizioni biologiche. Questo video coprirà i principi di base della tecnologia dei microarray, un protocollo per la profilazione dell’espressione genica utilizzando microarray e alcu…