توفر هذه المقالة الفيديو مظاهرة تفصيلاً الإجراءات اللازمة لإزالة البنكرياس بنجاح من ماوس بتشريح للتحليل النسيجي والتنميط الأيضية.
لقد تم التحقيق عامل النسخ المحددة البنكرياس، 1a cre-ريكومبيناسي؛ ساركومه لوكس-توقف-لوكس-كريستين الفئران، جليكاين لحمض الأسبارتيك في كودون 12 (Ptf1acre/+؛ لسلكراسG12D/+) الفأر سلالة كنموذج للبشرية سرطان البنكرياس. لدينا الدراسات الحالية يهدف إلى تحديد المؤشرات الحيوية الأيضية رواية لتطور سرطان البنكرياس. وقد أجرينا التنميط الأيضية للبول، والبراز، والدم، ومقتطفات أنسجة البنكرياس، فضلا عن تحليلات النسيجي لمرحلة تطور سرطان البنكرياس. البنكرياس الماوس ليس جهازا صلبة محددة تحديداً جيدا مثل البشر، ولكن بدلاً من ذلك هو أنسجة ناعمة تصطبغ موزعة التي لم تحدد بسهولة من الأفراد غير مألوف مع الماوس التشريح الداخلي أو عن طريق الأفراد التي لديها القليل أو لا القيام بتجربة تشريح جهاز الماوس. والغرض من هذه الوثيقة تقديم مفصل المجوعات مظاهرة البصرية دليل المبتدئين في إزالة البنكرياس الماوس بالتشريح. ينبغي أن تكون هذه المادة ذات قيمة خاصة للطلاب والباحثين جديدة للبحوث التي يتطلب الحصاد البنكرياس الماوس بتشريح للتنميط الأيضية أو تحليلات النسيجي.
وبرز الماوس حيوان نموذجا هاما لسرطان البنكرياس البشرية1،2. في Ptf1acre/+؛ LSL-كراسG12D/+ طراز الماوس، كريستين السرطاني كابوزي (ك-Ras) الفئران يتم تنشيط حصرا في البنكرياس، أسفر عن البدء بأورام في البنكرياس، المعروف باسم نيوبلاسياس للسيتولوجيا البنكرياس (بانينس)، أن التقدم للبنكرياس adenocarcinomas الأقنية، يشار إليها باسم بدأكس3. ويتيح هذا النظام النموذجي الماوس واحدة من أفضل النماذج الحيوانية المتاحة لسرطان البنكرياس البشرية4،5، مع ميزة إضافية التي تظهر بانينس خلال الأشهر الخمسة الأولى من الحياة، وكثيراً ما تقدم إلى بدك داخل واحد السنة4،5، في حين أن سرطان البنكرياس يحدث غالباً في البشر 60-70 سنة عمر.
استخراج البنكرياس بالتشريح من Ptf1acre/+؛ LSL-كراسG12D/+ الفئران في مختلف الإعمار يسمح لدراسة نسيجية طولية تفصيلية للتنمية سرطان في البنكرياس، بدءاً من أولى مراحل بانين من خلال التقدم إلى بدك3،4 , 5-حصاد البنكرياس في سن تتراوح ما بين خمسة إلى خمسة عشر شهرا يمكن أن تستخدم أيضا لإعداد الأنسجة مقتطفات لتوصيف التغيرات العالمية في البنكرياس4 الأيض التي تحدث أثناء الانتقال من صحية إلى الأنسجة المريضة 6،7.
هذه المقالة يعرض دليل مرئي كاملة للخطوات المطلوبة للقيام استخراج بنكرياس ماوس ويوفر مبادئ توجيهية للتخزين البنكرياس لمزيد من التحليل. هذا الدليل سوف تكون ذات قيمة متساوية للأفراد إجراء بحوث بشأن أمراض البنكرياس الأخرى، بما في ذلك مرض السكري من النوع الأول، وينبغي أن يكون مفيداً بشكل خاص للطلاب والباحثين جديدة للأبحاث المتعلقة بحصاد من البنكرياس الماوس باستخدام تشريح للتنميط الأيضية أو تحليلات النسيجي.
أهمية فيما يتعلق بالأساليب القائمة
على الرغم من وجود أشرطة فيديو أخرى غير رسمية لتشريح الفأر، توفر هذه المقالة الفيديو الجودة الفنية الأولى، واستعراض النظراء، مظاهرة البصرية لجميع الخطوات التفصيلية المطلوبة للاستخراج وحصاد البنكرياس الماوس بتشريح10 . مع البنكري?…
The authors have nothing to disclose.
MAK تعترف بتقديم الدعم لهذا العمل من “المعاهد الوطنية للصحة”/منح المعهد الوطني للسرطان رقم-1R15CA152985-01A1. كما دعمت هذا المشروع “ميامي جامعة الدراسات الجامعية البحوث جائزة البرنامج”، الفرص الجامعية الدكتوراه جامعة ميامي لبرنامج المنح الدراسية وبرنامج الباحثين الصيف جامعة ميامي.
Glass Jar | Corning | 3140-150 | The glass jar used in the video has been discontinued. This is its replacement. |
Lid of Glass Jar | Corning | 9985-150 | The glass jar lid used in the video has been discontinued. This is its replacement. |
15 mL Falcon Tubes | Fisher Scientific | 339650 | |
Surgical Scissors | Fisher Scientific | 9201 | |
Squeeze bottle | Fisher Scientific | 03-409-10DD | |
100% Ethanol | Fisher Scientific | 22-032-103 | |
Formalin | Fisher Scientific | 245-684 | |
Foam Boards | Therapak | 562908 | |
Forceps | Fisher Scientific | 200205SHN | |
1 mL 21G Syringes | BD Biosciences | 309624 | |
50 mL Falcon Tubes | Fisher Scientific | 339652 | |
2.0 mL Microcentrifuge Tubes | Fisher Scientific | 02-681-258 | |
Surgical Pads | Fisher Scientific | S67011 | |
T-Pins Length: 2" | Advance Store Products | X32T-05 | |
Sterilizing Wipes | Professional Disposables International Inc. | Q85084 | |
Sharps Container | Fisher Scientific | 14-827-122 | |
Analytical Balance | Marshall Scientific | ME-AE200 | |
4L Dewar | Taylor-Wharton | 4LD | |
Shallow Wide Mouth Dewar | Fisher Scientific | F3087-V | |
Floating Microtube Rack | VWR | 60986-100 | |
Cryogenic Vial 1.2 mL, Sterile | Fisher Scientific | 10-500-25 | |
Isothesia (Isoflurane) | Henry Schein Animal Health | 050033 | |
Liquid Nitrogen | Wright Brothers | NIT-60-XX | |
Mouse Kras Strain | The Jackson Laboratory | OO8179 | |
Mouse Cre Strain | MMRRC | OOO435-UNC |