Summary

電子たばこの蒸気とたばこの煙が小説に与える影響の比較<em>インビボ</em>露光システム

Published: May 24, 2017
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Summary

このプロトコルは、げっ歯類を電子タバコ蒸気(E蒸気)およびタバコ煙にさらす方法を記載している。暴露チャンバは、E蒸気またはタバコの煙を齧歯類に送達する自動ポンピングシステムで麻酔チャンバを改変することによって構築される。このシステムは、多くの実験的エンドポイントに対応するように簡単に変更することができます。

Abstract

電子タバコ(E- タバコ )は広く使用されており、人気が高まっている。 900万人以上の成人が定期的に使用していると推定されています。電子たばこ蒸気(E-蒸気)暴露の潜在的な健康への悪影響は、あまり定義されていません。 E- 蒸気曝露のいくつかの動物モデルが開発されているが、齧歯類を臨床的に関連する量のニコチンに曝露し、同じ曝露系内でタバコの煙と直接比較するモデルはほとんどない。ここでは、 E- ベーパチャンバおよびタバコ煙チャンバを構築および操作する方法を提示する。チャンバーは、一定の量のEを送達するコンピューター制御のポンピングシステムで麻酔チャンバーを装備することによって構築される暴露前と曝露後の血清コチニン濃度を定量化することにより間接的にニコチン曝露を測定する。この曝露システムは、様々なタイプのE-タバコとたばこタバコに対応するように改変することができ、 インビボでの E- 蒸気およびタバコの煙の効果を比較するために使用される。

Introduction

電子タバコ(E-タバコ)は、2004年に米国市場に参入して以来、10億ドル規模の産業に拡大しており、およそ900万人の大人が定期的に使用していると推定されています1 。 2014年と2015年には、高校生が従来のタバコよりもE-タバコを使用していました2 。電子タバコの使用者が増えているため、健康への悪影響を評価するための研究努力が始まっています。

E-シガレットは、典型的には水、ポリエチレングリコールまたは植物グリセリン、ニコチン、および香料の混合物を含有する粘性溶液を加熱することによって蒸気(「E-蒸気」と呼ばれる)を生成する3,4 。 E蒸気は、反応性酸素種(ROS)、ニコチン、種々のアルデヒド、および多環式芳香族炭化水素を含むいくつかの有害な化合物を含有することが示されている5 6。これらの化合物の多くは、吸入前のE液体の気化プロセス中に形成されます7 。特に、これらの有害な化合物のいくつかはたばこの煙にも含まれており、E-たばこの使用が同様の健康への悪影響を及ぼす可能性が懸念されています7

E-タバコの健康への影響についてはコンセンサスがほとんどありません。これに対処するために、E-蒸気暴露のいくつかの動物モデルが開発されている( 表1 )。これらのモデルは、全身E-蒸気暴露および機械的換気などの様々な方法を採用する。現行モデルは洞察力のあるデータを提供しているが、同じ曝露システム内でタバコの煙と直接比較する者はほとんどない( 表1 )。さらに、いくつかのヒトの研究では、E-タバコ使用者およびタバコ喫煙者が30-200ng / mLの間の血清コチニンレベルを有することが示されているが、多くのE-蒸気およびタバコ喫煙曝露モデルが低下するこの範囲は8,9,10,11,12である。

本明細書では、ヒトの研究と同様の血清コチニンレベルを生じる、インビボでのタバコの煙およびE-蒸気曝露の影響を比較する方法を提示する。

Protocol

以下のプロトコールは、ミシガン大学機関動物管理および使用委員会(IACUC)の指導および承認の下で実施されている。 1.電子たばこ – 蒸気チャンバアセンブリ注:完全なチャンバーは、使用中にヒュームフードに置かなければなりません。ここの室は、温度制御されたろ過された実験室環境に収容されていた。調査官は、室内空気質の一貫性を確保?…

Representative Results

一酸化炭素および酸素モニタリング電子蒸気暴露中に酸素濃度は20%以下に低下せず、CO濃度は暴露期間中は検出されないままであった。紙巻たばこの煙曝露中のガスモニターは、酸素濃度が20%を超えていることを示した。一酸化炭素濃度は1,000ppmを超えなかった( 図4 )。 <p class="jove_content" fo:keep-together.with…

Discussion

ここでは、制御された方法でげっ歯類をE蒸気とタバコの煙にさらすチャンバーを構築する方法について説明します( 図6 )。 E-シガレットチャンバの構築は、市販の露光システム14,15,16と比較して、比較的簡単で安価である。チャンバーを構築するために必要な部品とツールは、オンラインの商用供給元から容易に入手できます。同様に、シガレット煙チャンバを構成すること?…

Divulgaciones

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

この研究は、大動脈研究助成金(ミシガン大学)によってEliason博士に可能になった。また著者は、シガレット照明器具の設計と組立てを支援するため、ミシガン大学プラントオペレーションサイングラフィック部門のNick Scott氏に感謝したいと思います。

Materials

blu PLUS Rechargeable Kit blu eCigs N/A
1R6F Reference Cigarettes Center for Tob Ref  Prod UK N/A
Lexan Anesthesia Chamber 20 L Jorgensen Laboratories JOR265
Arduino UNO Arduino 2877
Diode Rectifier – 1A 50V Spark Fun COM-08589
Resistor 10K Ohm 1/6th Watt PTH – 20 pack Spark Fun COM-11508
Electrolytic Decoupling Capacitors – 100uF/25V Spark Fun COM-00096
Solderless Plug-in BreadBoard  BusBoard Prototype Systems BB400
Alligator-Clip Wires BusBoard Prototype Systems CA-M-20
ZipWire BusBoard Prototype Systems ZW-MM-10
Standard Fan 80 ST2 Cooler Master R4-S8R-20AK-GP
ARIC 4" adjustable vent Bestlouver N/A
ToxiPro  Carbon Monoxide Monitor Honeywell Analytics 54-00-10316
ToxiPro Oxygen Monitor Honeywell Analytics 54-45-90-VD
ToxiPro IQ Express Docking Station Honeywell/Sperian Biosystems  54-46-9100
Command Wall Hook Small Wire 6-Pack 3M N/A
Micro Water/Air Pump Xiamen Conjoin Electronics CJWP40-A12A1
1/4" Silicon Tubing NewAge 2801470-100
T Connector Bel-Art Scienceware F196060000
Plastic Whole Blood tube with spray-coated K2EDTA Becton, Dickinson and Company 367841
Cotinine ELISA kit Calbiotech CO096D

Referencias

  1. Schoenborn, C. A., Gindi, R. M. Electronic Cigarette Use Among Adults: United States, 2014 Key findings. NCHS. , (2014).
  2. Singh, T. Tobacco Use Among Middle and High School Students – United States, 2011-2015. MMWR. 65 (14), 361-367 (2016).
  3. Flora, J. W. Characterization of potential impurities and degradation products in electronic cigarette formulations and aerosols. Regul. Toxicol. Pharmacol: RTP. 74, 1-11 (2016).
  4. Tierney, P. A., Karpinski, C. D., Brown, J. E., Luo, W., Pankow, J. F. Flavour chemicals in electronic cigarette fluids. Tob. Control. , (2015).
  5. Sleiman, M. Emissions from Electronic Cigarettes: Key Parameters Affecting the Release of Harmful Chemicals. Environ. Sci. Technol. 50 (17), 9644-9651 (2016).
  6. Hwang, J. H. Electronic cigarette inhalation alters innate immunity and airway cytokines while increasing the virulence of colonizing bacteria. Int J Mol Med (Berlin, Germany). 94 (6), 667-679 (2016).
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Citar este artículo
Hage, A. N., Krause, W., Mathues, A., Krasner, L., Kasten, S., Eliason, J. L., Ghosh, A. Comparing the Effects of Electronic Cigarette Vapor and Cigarette Smoke in a Novel In Vivo Exposure System. J. Vis. Exp. (123), e55672, doi:10.3791/55672 (2017).

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