Un approccio diagnostico risolto con componente per uno studio sugli allergeni di polline delle erbe nei meridionali cinesi con rinite allergica e / o asma
Summary
Questo lavoro descrive un protocollo che utilizza un approccio risolti dai componenti per studiare la sensibilizzazione agli allergeni pollenici in una coorte di pazienti provenienti dalla Cina meridionale con rinite allergica e / o asma.
Abstract
La sensibilizzazione al polline dell'erba impone un rischio globale per le malattie allergiche delle vie aeree. Sebbene la prevenzione si basi sull'indagine locale degli allergeni pollini, i dati su questo argomento sono limitati nella Cina meridionale. Tutti i dati disponibili sono stati ottenuti tramite questionari di autocertificazione, test di prick cutanei e test IgE totali o specifici utilizzando estratti grezzi. Per molti motivi questi metodi sono inaffidabili. La reattività del siero serpente all'erba di Bermuda, l'erba di Timothy e gli allergeni di Humulus scandens in una coorte di pazienti provenienti da Greater Guangzhou (la città più grande della Cina meridionale e le sue periferie) con rinite allergica e / o asma sono state esaminate usando un analizzatore di immunoassay completamente automatizzato come componente – strumento diagnostico (CRD) risolto.
Per la prima volta, è stata dimostrata una prevalenza notevolmente elevata della positività sIgE in erba bermuda nei meridionali cinesi con rinite allergica e / o asma. In questi pazienti, una sottile prevalenza di sensibilizzazioneAnche per l'erba di Timothy e gli scandini di Humulus , che possono derivare dalla reattività incrociata, in quanto i due ultimi non sono comuni nella regione. Questo è stato anche supportato dall'individuazione di componenti allergeni.
Gli analizzatori di immunoassay completamente automatizzati possono offrire consistenza soddisfacente tra regioni, laboratori e istituzioni e nel tempo. L'automatismo dello strumento può consentire una rilevazione standardizzata che non sarebbe stata immediatamente rivelata prima dell'avvento del CRD.
Questo è uno studio che utilizza un approccio CRD per indagare la sensibilizzazione agli allergeni pollenici dell'erba in Cina meridionale. Aggiunge le evidenze attuali in letteratura. Studi futuri sono necessari per convalidare questi risultati. Tuttavia, sebbene CRD sia uno strumento utile, i risultati ottenuti con l'analizzatore immunologico completamente automatizzato non dovrebbero sostituire altre indagini di laboratorio, valutazioni cliniche e competenze mediche.
Introduction
Il polline erba rappresenta quasi il 50% delle allergie legate all'immunoglobulina E (IgE) e, a causa della sua natura aerea, impone un rischio globale di malattie allergiche delle vie aeree, in particolare l'asma e la rinite allergica 1 , 2 , 3 , 4 . La prevenzione delle allergie polline di erbe in una regione si basa su informazioni sulla distribuzione locale degli allergeni pollenici. Purtroppo lo spettro degli allergeni sensibilizzanti varia da luogo a luogo, un'osservazione generalmente nota come specificità regionale.
In Cina, un vasto territorio dell'Asia orientale, la specificità regionale della sensibilizzazione del polline erboso è ulteriormente complicata da dati limitati attualmente disponibili dalla parte meridionale del paese negli ultimi decenni 5 . Tale pacchione nei dati ha portato ad una difficoltà nel mostrare la sensibilità generale del polline dell'erbaIn questo grande paese 6 . Inoltre, i dati molto limitati sui meridionali cinesi sono stati ottenuti in gran parte da questionari di autocertificazione, test di prick cutanei (piuttosto che da test di siero di laboratorio), misure totali IgE (anziché IgE specifiche allergene) e rilevamento di allergeni a Piuttosto che alle molecole di componenti allergene).
L'auto-segnalazione di sintomi allergici può essere inaffidabile quando si tratta di allergeni specifici. I test di pelli cutanei, pur ampiamente accessibili, implicano l'uso di estratti di allergeni grezzi non standardizzati, che possono contenere altri componenti sensibilizzanti che confondono l'interpretazione dei risultati. L'affidabilità del test cutaneo della pelle dipende anche dalla manipolazione abile da parte di allergisti o infermieri specializzati, l'uso recente di istamina e la conformità del paziente (a volte molto difficile per i bambini piccoli). L'IgE totale è utile per la screening di un'allergia, ma non determina sensibilmenteE offendere allergeni in un paziente. Inoltre, quasi tutti gli allergeni contengono una serie di molecole di componenti allergeni. La sensibilizzazione dei componenti principali ( es. Der p 1 e Der p 2 da acari della polvere domestica) può suggerire un'allergia "genuina" (allergia ad un allergene specifico, piuttosto che falsa positività dovuta a reazioni trasversali con altri allergeni), ma sensibilizzazione A determinati ( cioè il Der p 10 cross-reattivo, un tropomosiosina) non può essere 7 .
Prima di introdurre la diagnostica risolta con componenti (CRD), questi fallimenti deludenti impedivano studi di allergene in Cina. CRD rileva con precisione i componenti di un allergene utilizzando molecole allergene ricombinanti o purificate, rendendo quindi la misurazione facilmente quantificabile e caratterizzabile 8 . Negli ultimi decenni, gli studi di allergia hanno spesso impiegato estratti grezzi di allergeni che inevitabilmente contengono una serie di componenti irrilevanti. Molti di questi coI componenti sono inerti, ma occasionalmente, alcuni potrebbero portare a confondere reazioni positive. L'uso di molecole allergene ricombinanti o purificate in CRD può aggirare questo e quindi fornire una migliore precisione di test. Quando vengono elaborati in microarray, un approccio CRD rapida o identifica la sensibilizzazione a centinaia di molecole di allergeni nei singoli soggetti. Attualmente manca uno studio CRD ben progettato sulla sensibilizzazione del polline erboso nel sud della Cina. Idealmente, un tale studio dovrebbe includere una popolazione locale di notevole copertura geografica, tenendo conto dei pollini d'erba comunemente riportati in Cina e affrontare gli aspetti tecnici sopra menzionati. Per raggiungere un livello pratico di rilevanza clinica e per facilitare l'assunzione di campioni di siero, le prime indagini sulla sensibilizzazione dei pollini d'erba come allergeni inalanti possono anche essere concentrati su pazienti con disturbi respiratori allergici, piuttosto che sulla popolazione generale.
Questo lavoro descrive un metodoUtilizzato per testare la reattività del sIgE sierico all'erba di Bermuda, l'erba Timothy e gli scandini Humulus nei pazienti di Greater Guangzhou (la più grande città della Cina meridionale e le sue periferie) con rinite allergica e / o asma utilizzando l'approccio CRD 5 . Questi risultati sulla sensibilizzazione a questi pollini subtropicali e temperati dell'erba nel sud della Cina aggiungono elementi importanti a quelli attualmente in letteratura.
Protocol
Representative Results
Discussion
Gli analizzatori di immunoassay completamente automatizzati possono offrire consistenza soddisfacente tra regioni, laboratori e istituzioni e nel tempo. Tale procedura automatica è stata trovata a sostenere sostanzialmente la ricerca sul banco e gli studi clinici, consentire la rilevazione standardizzata di molti componenti allergeni e / o allergeni e identificare la probabilità cross-reattività allergica che non sarebbe stata immediatamente rivelata prima dell'avvento dei CRD. Inoltre, l'intera procedura di …
Divulgaciones
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Ringraziamo Yueming Su per la sua assistenza nella preparazione della figura. Questo studio è stato finanziato dalla Fondazione Guangdong di Scienza e Tecnologia (N. progetto: 2014A020212352), dall'Ufficio di formazione di Guangzhou (1201630044, 1201630393) e dalla National Science Foundation di Cina (NSFC 81572063; NSFC 81601394).
Materials
| ImmunoCAP 1000 Instrument | Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 12-3800-01 | |
| Phadia Information Data Manager Software Package | Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 12-3801-11 | |
| Software Package, ImmunoCAP 1000 | Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 12-3801-12 | |
| g2 (Bermuda grass) |
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 14-4131-01 | |
| g6 (Timothy grass) |
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 14-4100-01 | |
| w22 (Japanese Hop) |
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 14-4452-01 | |
| g216 (nCyn d 1) |
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 14-4972-01 | |
| g205 (rPhl p 1) |
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 14-5234-01 | |
| g208 (nPhl p 4) |
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 14-5288-01 | |
| g215 (rPhl p 5b) |
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 14-5338-01 | |
| g209 (rPhl p 6) |
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 14-5289-01 | |
| g210 (rPhl p 7) |
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 14-5290-01 | |
| g211 (rPhl p 11) |
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 14-5291-01 | |
| g212 (rPhl p 12) |
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 14-5292-01 | |
| o214 Cross-reacting carbohydrate determinants (CCDs) |
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 14-5339-01 | |
| Specific IgE Conjugate 400 | Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 10-9310-08 | |
| Specific IgE Calibrator Strip | Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 10-9459-08 | |
| Specific IgE Curve Control Strip | Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 10-9312-08 | |
| Specific IgE Anti-IgE ImmunoCAP | Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 14-4417-01 | |
| ImmunoCAP Specific IgE Negative Control | Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 10-9445-01 | |
| ImmunoCAP Specific IgE Control L | Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 10-9528-01 | |
| ImmunoCAP Specific IgE Control M | Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 10-9529-01 | |
| ImmunoCAP Specific IgE Control H | Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 10-9530-01 | |
| Development Solution | Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 10-9439-08 | |
| Stop Solution | Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 34-2271-58 | |
| Washing Solution | Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 10-9202-08 | |
| FluoroC | Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 10-9264-01 | |
| Maintenance Solution Kit | Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 10-9476-01 |
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