심혈관 질환에 대한 대형 동물 모델에서 심장의 해부 기술 및 조직 학적 샘플링
Summary
복잡한 해부학으로 인해 심장 샘플에 대한 일관되게 재현 가능한 해부 및 수확 프로토콜을 구현하기가 어려울 수 있습니다. 이 원고는 일부 표준 심장 해부 프로토콜의 핵심 요소를 제시하여 전체 검사 접근 방식과 조직 병리학 검사에 일반적으로 사용되는 샘플링 부위를 강조합니다.
Abstract
표준 총 검사 및 샘플링은 대형 동물에서 수행 된 심혈관 질환에 대한 실험적 연구의 재현성과 성공의 핵심 요소입니다. 심장의 복잡한 해부학, 종간 차이, 보상 및 병리학 적 반응의 유형을 고려할 때 일관된 프로토콜을 구현하기가 어렵습니다. 다중 해부 프로토콜의 활용은 일반적으로 프로 섹터의 경험에 맞게 조정되며 개인 선호도는 계속해서 실험 및 관찰자 간 변동성의 원천이됩니다. 여기에서 목표는 심혈관 질환의 모델로 일반적으로 사용되는 일부 종(개, 돼지, 반추동물 및 고양이 포함)에서 심장의 주요 해부학적 특징과 랜드마크, 해부 프로토콜 및 조직학적 샘플링 표준을 제시하는 것입니다.
여기에는 두 가지 표준 총 시험 프로토콜이 제시됩니다. 첫째, 심장과 큰 혈관을 통한 생리적 혈류 방향을 따르는 유입-유출 방법(개, 반추동물, 돼지에서 자주 사용됨), 둘째, 4챔버 해부 기술(고양이에서 예시됨)입니다. 두 기술 모두 특정 실험 상황에서 모든 종에 적용 할 수 있습니다. 샘플링 프로토콜에는 모든 관심 영역 (동방 결절, 심실, 심실 중격, 심방, 밸브 및 대동맥)이 포함되며 적절하게 수행되면 실험 연구의 재현성과 신뢰성을 모두 향상시킵니다.
Introduction
심장벽 두께 평가를 방해할 수 있는 복잡한 해부학과 초기 엄격함으로 인해 심장의 전체 검사는 까다롭고 여러 기술 관련 또는 해석 오류가 발생하기 쉽습니다. 이것은 종간 형태 학적 변이와 많은 임상 적 주요 심장 병리 (관상 동맥 심장 질환, 섬유증, 동맥염 및 아밀로이드증의 초기 사례 포함)가 본질적으로 조직 병리학 적 병리학 인 심한 변화와 관련이 없다는 사실에 의해 증폭됩니다. 표준화된 해부 및 조직학적 샘플 수집 프로토콜은 관찰자 간의 일관성을 가져오는 동시에 심혈관 질환에 대한 실험적 연구의 비교 가능성 및 재현성을 가져올 수 있습니다.
샘플은 두 마리의 개 (Canis lupus familiaris) (3 세, 수컷 프렌치 불독 및 8 세, 암컷 혼합 품종), 고양이 (Felis catus) (6 세, 수컷 유럽 쇼트 헤어), 국내 돼지 (Sus scrofa domesticus) (1 세, 수컷 큰 흰색) 및 소 (Bos taurus) (2 개월 된 암컷 홀스타인). 선택된 각 종은 다른 질병에 대한 심혈관 모델로 특히 사용됩니다. 예를 들어, 개는 부정맥 모델링에 선호되는 모델입니다. 고양이는 HCM의 유병률이 가장 높은 종이기 때문에 비대성 심근 병증 (HCM)에 선호됩니다. 돼지는 급성 심근 경색의 모델로 사용됩니다. 그리고 반추 동물은 초원11에서 쉽게 발견 할 수있는 독소에 노출되어 중독의 모델로 사용됩니다.
이 원고에서는 실험적 심혈관 질환에서 심장의 총 및 조직 학적 검사를 개선하기 위해 고안된 심장의 하나의 부검 프로토콜과 두 개의 해부 프로토콜이 제시됩니다. 설명 된 프로토콜은 수의학 교과서 1,2,4,5,6,7,8,9,10,11,12, 저널 문헌 3,13,14, 공식 문서 15 및 웨비나 16의 정보를 기반으로 개발되었습니다. ,17. 이 연구에 사용 된 샘플은 일상적인 부검 진단을 위해 USAMV Cluj-Napoca의 병리학 부서에 제출 된 시체에서 수확되었습니다.
Protocol
Representative Results
Discussion
현재 프로토콜을 수행할 때 일관된 결과를 위해 몇 가지 중요한 단계를 신중하게 고려해야 합니다. 어린 동물에서 심장 측정은 성인의 심장 측정 (심실 벽 두께 포함)과 다르며 일반적으로 심장은 체중11,12의 더 큰 비율을 나타냅니다. 심실 비대의 정도는 일반적인 체중 공식, 좌심실과 중격 사이의 비율을 자유 우심실 무게로 나눈 값, 정상적인 조건에?…
Divulgaciones
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
없음.
Materials
| 0.9% saline solution | B. BRAUN MELSUNGEN AG | W04479004 | For washing all the blood, and blood clots from the heart. |
| 10% neutral buffered formalin (NBF) | Q Path | 11699404 | Materials for collecting histopathology samples. |
| Bone cutting forceps | HELEN SRL | LS109HV | Sturdy instrument for cutting bone. |
| Cutting board | Ambition | 86304 | For an easier manipulation, and cutting the organs. |
| Decalcifying solution | Thermo Scientific TBD-2 | 6764004 | 1:1 mixture of 8% formic acid and hydrochloric acid. |
| Digital camera | Canon Inc. | PowerShot SX540 HS | For photographic, and videographic documentation. |
| Forceps | MKD-Medicale | 15-430 | Dissection instruments. |
| Histological cassettes | Q Path | 720-2215 | Materials for collecting histopathology samples. Dimensions: 3 × 2.5 × 0.4 cm |
| Knife | TEHNO FOOD COM SERV SRL | D2006/15 | Sharp blade for cutting soft tissue. |
| Latex gloves | MKD-Medicale | SANTEX-S | Protection equipment. |
| Mask | MKD-Medicale | 21221 | Protection equipment. |
| Petri dishes | MKD-Medicale | 0598-1V | Materials for collecting ancillary testing samples. |
| Plastic recipients | Corning Gosselin | TP200-02 | Materials for collecting histopathology samples. |
| Scale | ESPERANZA | MEEKS008 | For weighing the organs. |
| Scale | White Deals | 72 | For weighing the subjects. |
| Scalpel | MKD-Medicale | 10322E | Sharp blade for cutting soft tissue. |
| Scissors | MKD-Medicale | 13-260 | Dissection instruments. |
| Scrub | MKD-Medicale | 410100-52 | Protection equipment. |
| Syringes | MKD-Medicale | 10573EU | Materials for collecting ancillary testing samples. |
Referencias
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