Summary

Optimización del procesamiento de Tiebangchui con vino de cebada de las tierras altas basado en el diseño Box-Behnken combinado con el método de entropía

Published: May 19, 2023
doi:

Summary

El presente protocolo describe un método eficiente para la optimización de la tecnología de procesamiento de Tiebangchui procesado con vino de cebada de tierras altas basado en una superficie de respuesta de diseño Box-Behnken combinada con el método de entropía.

Abstract

El procesamiento de etnomedicinas tóxicas es de gran importancia para su aplicación clínica segura. Por lo tanto, se deben abordar las limitaciones del procesamiento tradicional, y el método de procesamiento de etnomedicinas debe estandarizarse utilizando métodos de investigación modernos. En este estudio, se optimizó la tecnología de procesamiento de una medicina tibetana de uso común Tiebangchui (TBC), la raíz seca de Aconitum pendulum Busch, procesada con vino de cebada de las tierras altas. El contenido de alcaloide diéster-diterpenoide (DDA) (aconitina, 3-deoxiaconitina, 3-acetilaconitina) y alcaloide monoéster-diterpenoide (MDA) (benzoilaconina) se utilizaron como indicadores de evaluación, y el coeficiente de peso de cada índice de evaluación se determinó por el método de entropía.

La prueba de un solo factor y el diseño de Box-Behnken se utilizaron para investigar la influencia de la relación entre el vino de cebada de las tierras altas y el TBC, el grosor de la rebanada de TBC y el tiempo de procesamiento. La puntuación integral se realizó de acuerdo con el peso objetivo de cada índice determinado por el método de entropía. Las condiciones óptimas de procesamiento de TBC con vino de cebada de tierras altas fueron las siguientes: la cantidad de vino de cebada de tierras altas es cinco veces mayor que la de TBC, un tiempo de remojo de 24 h y un espesor de TBC de 1,5 cm. Los resultados mostraron que la desviación estándar relativa entre la prueba de verificación y el valor previsto fue inferior al 2,55% y la tecnología de procesamiento optimizada de TBC procesado con vino de cebada de tierras altas es simple, factible y estable, por lo que puede proporcionar una referencia para la producción industrial.

Introduction

Tiebangchui (TBC), la raíz seca de Aconitum pendulum Busch, es una medicina tibetana bien conocida y fue registrada inicialmente en el clásico libro de medicina tibetana “Cuatro Tantra Médicos”1,2. De acuerdo con las “Normas de medicamentos del Ministerio de Salud de la República Popular China (Medicina Tibetana)”, TBC es eficaz para expulsar el frío, aliviar el dolor, disipar el viento y calmar el shock, y se usa comúnmente para tratar la artritis reumatoide en clínicas 3,4,5.

TBC contiene principalmente alcaloides, incluyendo alcaloides diésteres-diterpenoides (DDA) altamente tóxicos, y los alcaloides monoéster-diterpenoides (MDA) moderadamente tóxicos6,7,8. Estos componentes químicos son ingredientes activos con efectos medicinales pero son tóxicos. Uno de los ingredientes activos y tóxicos más famosos, la aconitina, causa envenenamiento cuando supera 1 mg9. Por lo tanto, el uso inadecuado o excesivo de TBC puede resultar en envenenamiento e incluso muerte, y la atenuación de toxicidad y la reserva de eficacia de TBC es crucial para su aplicación clínica segura10,11.

El procesamiento es un método eficaz para desintoxicar TBC. Según los antiguos libros de medicina tibetana, el procesamiento con vino de cebada de las tierras altas es una forma eficiente de atenuar la toxicidad y preservar la eficacia de TBC. TBC se remoja en vino de cebada de las tierras altas, se almacena durante una noche, se seca y se agrega a los medicamentos12. Sin embargo, la tecnología de procesamiento específica y los posibles factores de influencia rara vez se informan, y el proceso de procesamiento tradicional a menudo se basa en la experiencia y carece de métodos estandarizados. Por lo tanto, se necesitan métodos científicos y tecnológicos modernos para optimizar y estandarizar el proceso de procesamiento.

El método de diseño de Box-Behnken se utiliza para investigar las interacciones entre diferentes factores y su influencia en la puntuación integral a través del ajuste polinómico cuadrático. Este diseño permite la observación intuitiva de las condiciones óptimas y ha sido ampliamente utilizado en el campo de la farmacia13. Por ejemplo, el método de diseño Box-Behnken, basado en el método de entropía, optimizó con éxito la tecnología de procesamiento de salteado con vinagre de Curcuma Longa Radix14. En este estudio, el diseño experimental de superficie de respuesta de Box-Behnken combinado con el método de entropía se utilizó para optimizar la tecnología de procesamiento de TBC procesado con vino de cebada de tierras altas. Se espera que la tecnología de procesamiento optimizada garantice el control de calidad y el uso clínico seguro.

Protocol

En este estudio, la tecnología de procesamiento de TBC procesado con vino de cebada de tierras altas se optimizó con un diseño de Box-Behnken combinado con el método de entropía. El contenido de DDA y MDA se utilizó como indicadores de evaluación, y el coeficiente de peso de cada índice de evaluación se determinó por el método de entropía. 1. Preparación experimental Preparar vino de cebada de las tierras altas15.Tome 500….

Representative Results

En este estudio, la precisión, estabilidad, repetibilidad y recuperación de muestras de TBC indicaron que el método es factible. Los cuatro componentes del índice en TBC tenían una buena relación lineal dentro de un rango de concentración específico. Los cromatogramas típicos se muestran en la Figura 1. Los resultados de las pruebas de precisión (Tabla 8) mostraron que la desviación estándar relativa (DSR) de las áreas pico fue de 2,56%, 1,49% y 2,03% para benzo…

Discussion

Como medicina tibetana de uso común con efectos tóxicos, el efecto atenuante de toxicidad del procesamiento es extremadamente importante para la aplicación clínica de TBC25. En este estudio, se optimizó la tecnología de procesamiento de TBC procesado con vino de cebada de tierras altas. Al revisar los principales principios activos y relacionar los efectos farmacológicos del TBC, encontramos que los alcaloides TBC tienen efectos antiinflamatorios y analgésicos y pueden usarse para tratar l…

Divulgaciones

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Este trabajo fue apoyado financieramente por la Fundación Nacional de Ciencias Naturales de China (No. 82130113), la Fundación de Ciencias Postdoctorales de China (No. 2021MD703800), la Fundación de Ciencias para Jóvenes del Departamento de Ciencia y Tecnología de la Provincia de Sichuan (No. 2022NSFSC1449) y el Programa de Promoción de la Investigación “Xinglin Scholars” de la Universidad de Medicina Tradicional China de Chengdu (No. BSH2021009).

Materials

Aconitine Chengdu Push Biotechnology Co.,Ltd PS000905
3-Acetylaconitine Chengdu Push Biotechnology Co.,Ltd PS010552
3-Deoxyaconitine Chengdu Push Biotechnology Co.,Ltd PS011258
Benzoylaconine Chengdu Push Biotechnology Co.,Ltd PS010300
Circulating water vacuum pump Gongyi City Yuhua Instrument Co., Ltd SHZ-DIII
Design-Expert  State-East Corporation 8.0.6
Electric constant temperature drying oven Shanghai Yuejin Medical Equipment Co., Ltd 101-3-BS
Electronic analytical balance Shanghai Liangping Instruments Co., Ltd. FA1004
High performance liquid chromatography Shimadzu Enterprise Management (China) Co., Ltd shimadzu 2030
Highland barley rice Kangding City, Ganzi Tibetan Autonomous Prefecture, Sichuan Province 20221015
Millipore filter Tianjin Jinteng Experimental Equipment Co., Ltd φ13 0.22 Nylon66
Rotary evaporator Shanghai Yarong Biochemical Instrument Factory RE-2000A
Starter of liquor-making Angel Yeast CO., Ltd BJ22-104
Ultra pure water systemic Merck Millipore Ltd. Milli-Q
Ultrasonic cleansing machine Ningbo Xinyi Ultrasonic Equipment Co., Ltd SB-8200 DTS

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Citar este artículo
Yu, L., Li, S., Tan, X., Wang, C., Lai, X., Liu, Y., Zhang, Y. Optimization of Processing of Tiebangchui with Highland Barley Wine Based on the Box-Behnken Design Combined with the Entropy Method. J. Vis. Exp. (195), e65154, doi:10.3791/65154 (2023).

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