Summary

L'isolement des premiers cellules souches hématopoïétiques de murin sac vitellin et AGA

Published: June 27, 2008
doi:

Summary

Cette vidéo montre comment les micro-dissection du sac vitellin et l'aorte-gonades-mésonéphros région à partir d'embryons et l'utilisation de cytométrie en flux à trier les cellules souches hématopoïétiques.

Abstract

Dans l'embryon de souris, l'hématopoïèse début se produit simultanément dans plusieurs organes, dont le sac vitellin et l'aorte-gonades-mésonéphros région. Ces régions sont cruciaux dans l'établissement du système du sang dans les embryons et conduit au mouvement éventuel de cellules souches dans le foie fœtal et ensuite le développement des cellules souches adultes dans le bonemarrow. Au début les cellules souches hématopoïétiques peuvent être isolées à partir de ces organes par microdissection de l'embryon suivie d'un tri par cytométrie en flux pour obtenir une population plus pur. On ignore encore comment ces populations de cellules souches de contribuer à la piscine de cellules souches foetales et adultes. En outre, notre laboratoire étudie comment les cellules souches début fonctionnellement différentes de foetales et adultes de cellules souches hématopoïétiques. En outre, notre laboratoire de sortes différentes populations de cellules souches hématopoïétiques et de tester leur rôle fonctionnel dans le contexte d'une variété de modèles génétiques. Dans cette vidéo, nous démontrons la procédure de dissection micro-nous couramment utiliser et montrent également les résultats d'une plotfter typiques FACS isoler ces populations rares, il est possible d'effectuer une variété de tests fonctionnels, notamment: tests colonie et greffes de moelle osseuse.

Protocol

Dissection et isolement des premières cellules souches hématopoïétiques de souris sac vitellin et l'aorte-gonades-mésonéphros région Avant de commencer, il est important d'avoir tous les réactifs et les outils nécessaires à la procédure: Ciseaux Pince, taille 4, et de qualité chirurgicale plié pointe des pinces, taille 5 / 45 (en option) Aiguilles de calibre 30 avec une seringue 35mm et 100mm boîtes de Pétri PBS avec 10% et 20% sér…
check_url/es/789?article_type=t

Play Video

Citar este artículo
Morgan, K., Kharas, M., Dzierzak, E., Gilliland, D. G. Isolation of Early Hematopoietic Stem Cells from Murine Yolk Sac and AGM. J. Vis. Exp. (16), e789, doi:10.3791/789 (2008).

View Video