La disección del sistema nervioso central de larvas de Drosophila melanogaster
Summary
En este artículo se muestra cómo disecar el sistema nervioso central del tercer estadio las larvas de Drosophila.
Abstract
El sistema nervioso central (SNC) de las larvas de Drosophila es compleja y poco comprendida. Una manera de investigar el sistema nervioso central es el uso de inmunohistoquímica para examinar la expresión de la novela de varias proteínas y marcadores. Tinción de las larvas de todo es práctico, porque la cutícula dura evita que los anticuerpos de penetrar en el interior de la cavidad corporal. Con el fin de manchar estos tejidos es necesario disecar el animal antes de la fijación y tinción. En este artículo se muestra cómo diseccionar las larvas de Drosophila, sin dañar el sistema nervioso central. Empiece por romper la larva en el medio con un par de pinzas finas, y luego gire a la cutícula "de adentro hacia fuera" para exponer el sistema nervioso central. Si la disección se realiza con cuidado el sistema nervioso central permanecerá unido a la cutícula. Por lo general, mantener el sistema nervioso central unido a la cutícula a lo largo de los pasos de fijación y la tinción, y sólo eliminar por completo el sistema nervioso central de la cutícula, justo antes de montar las muestras sobre portaobjetos de vidrio. También muestran algunas imágenes representativas de un sistema nervioso central larvas manchadas con Eva, un factor de transcripción expresado en un subconjunto de neuronas del sistema nervioso central. El artículo concluye con una discusión de algunos de los usos prácticos de esta técnica y las posibles dificultades que puedan surgir.
Protocol
Discussion
Este video muestra la forma de analizar el sistema nervioso central del tercer estadio las larvas de Drosophila. Después de la disección, el sistema nervioso central pueden ser teñidos utilizando un protocolo estándar de inmunohistoquímica. En la actualidad, queda mucho por descubrir acerca de cómo el sistema nervioso adulto se genera, así como la forma en que almacena y transmite información. Los estudios de los países en desarrollo larval de Drosophila SNC debe mejorar el conocimiento de cableado del sistema nervioso y la funció…
Divulgaciones
The authors have nothing to disclose.
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| forceps | fine tipped | |||
| 9-well watch glass | ||||
| plastic petri dish |
Referencias
- Lin, D. M., Goodman, C. S. Ectopic and increased expression of fasciclin II alters motoneuron growth cone guidance. Neuron. 13, 507-523 (1994).
- Park, Y., Fujioka, M., Kobayashi, M., Jaynes, J., Datta, S. even skipped is required to produce a trans-acting signal for larval neuroblast proliferation that can be mimicked by ecdysone. Development 128. , 1899-1909 (2001).
