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Espressione e purificazione di TRPC3 la scanalatura del catione del lipido sensibili umani per determinazione strutturale di singola particella cRIO-microscopia elettronica
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Expression and Purification of the Human Lipid-sensitive Cation Channel TRPC3 for Structural Determination by Single-particle Cryo-electron Microscopy
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Espressione e purificazione di TRPC3 la scanalatura del catione del lipido sensibili umani per determinazione strutturale di singola particella cRIO-microscopia elettronica

DOI:
10.3791/58754-v

•

08:27 min

•

January 07, 2019

•

, , , , ,
1Van Andel Institute, 2Vollum Institute, 3Janelia Research Campus

Capítulos

  • 00:04Título
  • 00:34Infection of HEK293 Mammalian Cells with P2 Baculovirus for Large-scale Protein Expression
  • 02:42Purification of hTRPC3 Protein from the Frozen Cell Pellet
  • 05:26Results: Structural Determination of hTRPC3
  • 07:36Conclusion

Summary

Traducción Automática

Traducción Automática

Questo protocollo descrive le tecniche utilizzate per determinare le strutture di canale ionico di cRIO-microscopia elettronica, compreso un sistema di baculovirus usato per esprimere in modo efficiente geni in cellule di mammiferi con minimo sforzo e tossicità, estrazione della proteina, purificazione, e controllo di qualità, preparazione del campione griglia e screening, nonché raccolta dati ed elaborazione.

Tags

Keywords: TRPC3Ion ChannelProtein ExpressionProtein PurificationSingle-particle Cryo-electron MicroscopyHEK293 CellsVirus InfectionSodium ButyrateDetergent SolubilizationSize-exclusion ChromatographyUltracentrifugation

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