성인 Drosophila Melanogaster의 로코의 고해상도 비디오 추적
Summary
에서 복잡한 운전하는 동작의 연구<em> Drosophila melanogaster</em> 주어진 파리의 움직임의 변화를 계량하는 능력에 의존적일 수 밖에 없습니다. 이 문서는 고해상도 추적 시스템을 사용하여이 작업을 수행하는 방법을 보여줍니다.
Abstract
파리는이 분야에서 연구자에게 제공 유전 도구의 과다로 인해 복잡한 동작을 연구에 중요한 모델을 제공합니다. 에서 전위의 행동을 공부<em> Drosophila melanogaster</em> 중 또는 해당 작업에 대한 응답으로 움직임의 변화를 계량 할 수있는 능력에 의존합니다. 이런 이유로 들어, 우리가이 논문에서 설명하는 것과 고해상도 영상 추적 시스템은 실시간으로 운동을 측정하는 유용한 도구입니다. 우리 프로토콜은 사각형 챔버에 삼십이분의 일 촬영 기간 다음에 파리의 추진력을 깰 초기 공기 펄스의 사용을 포함한다. 추적 프로그램은 다음 10 밀리초 단위의 챔버 내에서 각 비행의 순간 속도를 계산하는 데 사용됩니다. 분석 소프트웨어는 다음이 데이터를 컴파일하고, anesthetization 또는 고정하지 않고 파리를 처리,이 프로토콜은 행동 작업을 위해 파리의 적절한 먹이 및 관리에 대해 설명합니다 같은 평균 속도, 최대 속도, 모션에서 보낸 시간, 가속도 등 매개 변수의 다양한 출력 , 통제된 환경을 설정하고,에서 분석을 실행하면 끝까지 시작합니다.
Protocol
Discussion
우리의 설치 프로그램에서 적당히 강한 공기 펄스 transiently 플라이 운동을 중지합니다. 공기 펄스가 끝날 때, 파리는 그림 2에 표시된이 고정 상태와 일반적으로 locomote에서 발표됩니다. 이 공기 펄스 효과적으로 인구의 운동을 동기화하기 때문에, 우리는 또한 모멘텀적인 자극의 다음과 같은 운동의 발병을 공부할 수 있도록 재판을 시작하기 위해 그것을 사용합니다. 개시 다음과 같은 전위의 매?…
Acknowledgements
이 작품은 LC 그리피스에게 수여 보건 부여 R01 GM54408 국립 연구소에 의해 지원되었다. 우리는 광장 챔버 설계 및 실내 건축 및 분석 문제에 대해 도움이 대화를 댄 발렌테 및 팀 Lebestky에 대한 브랜다 이스 대학 기계 공장에서 우리의 분석, 프랭크 멜로를 설정하는 모든 도움 프레드 울프 감사하고 싶습니다.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Square Chamber | Tool | Machine Shop | N/A | Design from Wolf et al. 20021 |
| Digital Camera | Camera | Sharp | ViewcamZ VL-23 | |
| Flowmeter | Tool | Cole Parmer | SY-32003-12 | |
| Light Box | Tool | DNASTAR, Inc. | Seq-Easy | |
| Charcoal Filter | Tool | Fisher Scientific | 09-744-37 | |
| DIAS 3.2 | Software | Soll technologies | N/A | www.solltechnologies.com |
References
- Wolf, F. W., Rodan, A. R., Tsai, L. T. High-Resolution Analysis of Ethanol-Induced Locomotor Stimulation in Drosophila. J Neurosci. 22 (24), 11035-11044 (2002).
- Soll, D. R. The use of computers in understanding how animal cells crawl. International review of cytology. 163, 43-104 (1995).
- Martin, J. R., Ollo, R. A new Drosophila Ca2+/calmodulin-dependent protein kinase (Caki) is localized in the central nervous system and implicated in walking speed. The EMBO journal. 15 (8), 1865-1876 (1996).
- Levine, J. D., Funes, P., Dowse, H. B. Resetting the Circadian Clock by Social Experience in Drosophila melanogaster. Science. 298, 2010-2012 (2002).
