Ensaios Neurocircuit para Apreensões em mutantes de Epilepsia Drosophila</em
Summary
Usando de alta freqüência, estimulação elétrica, a atividade de apreensão-como pode ser induzida em<em> Drosophila</em>. Esta atividade é facilmente gravado a partir do sistema de fibra gigante.
Abstract
Drosophila melanogaster é uma ferramenta útil para estudar como a apreensão de atividade. Uma variedade de mutantes em que as convulsões podem ser induzidas, quer através de choque físico ou estimulação elétrica está disponível para o estudo de vários aspectos da atividade epiléptica e comportamento. Todas as moscas, inclusive do tipo selvagem, serão submetidos a atividades do tipo convulsivas se estimulado a uma tensão alta o suficiente. Apreensão como a atividade é uma resposta do tudo ou nada e cada genótipo tem um limiar de convulsão específico. O limiar convulsivo de um genótipo específico da mosca pode ser alterada, quer por tratamento com uma droga ou pela supressão genética ou acessório. O limiar é facilmente medido por eletrofisiologia. Apreensão-como a atividade pode ser induzida através da estimulação de alta freqüência elétrica entregues diretamente para o cérebro e registrados através dos músculos dorsal longitudinal (DLMS) no tórax. O DLMS são inervados por parte do sistema de fibra gigante. Começando com a estimulação de baixa tensão, alta freqüência e, posteriormente, aumentando a tensão em pequenos incrementos, o limiar de convulsão para uma única mosca pode ser medido.
Protocol
Discussion
Este vídeo demonstra os passos básicos para determinar o limiar convulsivo de uma mosca Drosophila individual. Em vez de usar o osciloscópio digital, um digitalizador informatizado pode também ser usado. Esta técnica é útil para determinar os efeitos de uma droga ou alteração genética no limiar apreensão de uma mosca.
Acknowledgements
Este trabalho foi apoiado por uma pesquisa NIH concessão, uma doação da Fundação de Epilepsia e um subsídio da Fundação McKnight Experimentos com moscas Drosophila MT frutas foram realizados em conformidade com as diretrizes e regulamentos estabelecidos pela Comissão Use UC Berkeley Animal.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Digital oscilloscope | Hitachi | VC-6523 | ||
| Stimulator | Cornerstone | S-900 | ||
| Preamplifier | World Precision Instruments | Electro 705 | ||
| Micromanipulators | Narishige | various |
References
- Kuebler, D., Tanouye, M. A. Modifications of seizure susceptibility in Drosophila. J Neurophysiol. 83, 998-1009 (2000).
- Kuebler, D., Zhang, H., Ren, X., Tanouye, M. A. Genetic suppression of seizure susceptibility in Drosophila. J Neurophysiol. 86, 1211-1225 (2001).
- Song, J., Tanouye, M. A. Seizure suppression by shakB2, a gap junction mutation in Drosophila. J Neurophysiol. 95, 627-635 (2006).
