Rato de isolamento de células Adrenal Cromafim

Summary

Adrenal medular cromafins sistemas de cultura de células são extremamente úteis para o estudo da secreção de excitação de acoplamento em uma configuração em vitro. Este protocolo ilustra o método utilizado para dissecar as supra-renais e, em seguida, isolar a região medular, removendo o córtex adrenal. A digestão da medula em células cromafins único é então demonstrada.

Abstract

Adrenal medular cromafins sistemas de cultura de células são extremamente úteis para o estudo da secreção de excitação de acoplamento em uma configuração em vitro. Este protocolo ilustra o método utilizado para dissecar as supra-renais e, em seguida, isolar a região medular, removendo o córtex adrenal. A digestão da medula em células cromafins único é então demonstrada.

Protocol

Abreviaturas: ACCs – Células Adrenal Cromafim, E. Soln – solução enzimática, E. DMEM – Modified Dulbecco Enriquecido Eagle Medium Preparação Adicionar papaína a quantidade desejada de E. Soln (40 unidades papaína / 1ml E. Soln.). Ativar papaína com carbogênio por cerca de 15 minutos em gelo. Buffer de Locke oxigenar sobre gelo também. Disseca?…