变性尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳用于分离单链DNA或RNA的500个核苷酸的限制。在热变性样品和非结构化的单链结合的尿素凝胶基质内迁移,根据其分子量。
尿素页面或变性尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳采用6-8 M尿素,变性中学的DNA或RNA的结构,是他们根据分子量聚丙烯酰胺凝胶矩阵分离。 2至500个碱基之间的片段,如单核苷酸长度的差异,可以分开使用此方法1。样品的迁移是依赖于所选择的丙烯酰胺浓度。一个比例更高的聚丙烯酰胺解决了低分子量的碎片。尿素和温度为45-55 ° C进行组合,在凝胶运行允许非结构化的DNA或RNA分子的分离。
在一般情况下,这种方法是必需的单链DNA或RNA片段,合成或标记的寡核苷酸酶裂解反应的产品,如分析或净化。
在这个视频文章中,我们展示了如何准备和运行变性尿素聚丙烯酰胺凝胶。包括技术秘诀,除了原有的协议1,2。
The authors have nothing to disclose.
这项工作是由新加坡的学术研究理事会(ARC)[授予数量90/07]支持。我们感谢支持球菌。