אבי העורקים Assay טבעת
Summary
אנגיוגנזה, מצמיח כלי דם בכלי הדם קיימים, קשור גם בתהליכים טבעיים פתולוגי. כאן אנו מדגימים assay טבעת אבי העורקים המאפשר potentiators angiogenic ומעכבי להתווסף ישירות טבעות אבי העורקים בתרבות. להנבטה ו תולדה neovessel ניתן לקבוע באמצעות בדיקת מצלצל אבי העורקים על פני תקופה של 6-12 ימים.
Abstract
אנגיוגנזה, מצמיח כלי דם בכלי הדם preexisting קשורה בשני תהליכים טבעיים פתולוגי. מבחני אנגיוגנזה שונים לערב את המחקר בתאי האנדותל של הפרט בתנאים תרבות (1). Assay טבעת אבי העורקים הוא מודל אנגיוגנזה המבוסס על תרבות איברים. ב assay זה, כלי angiogenic לצמוח מתוך קטע של אבי העורקים (שונה מ – (2)). בקצרה, אבי העורקים החזי העכבר הוא נכרת, שכבת שומן adventitia מוסרים, וטבעות כ 1 מ"מ באורך מוכנים. טבעות אישיות המוטבעים אז בכיפה מוצק קטן של תמצית מרתף מטריקס (BME), יצוק בתוך בארות בודדים של צלחת 48-באר. גורמים angiogenic ו מעכבי אנגיוגנזה ניתן להוסיף ישירות את הטבעות, מעורבת שיתוף התרבות של טבעות אבי העורקים ואת סוגי תאים אחרים יכול להיות מועסק לחקר תופעות angiogenic אוטוקריני. להנבטה היא נצפתה על ידי בדיקה תחת stereomicroscope על פני תקופה של 6-12 ימים. בשל השונות הגדולה הנגרמת על ידי אי סדרים במגזרים אבי העורקים, ניסויים 6-plicates מומלץ בחום. תוצאה Neovessel מנוטר במהלך הניסוי צילמו באמצעות מיקרוסקופ שלב, ואת supernatants נאספים למדידת גורמים angiogenic ואנטי angiogenic רלוונטי, מוות של תאים סמנים הניטריט.
Protocol
Discussion
Assay טבעת אבי העורקים הוא כלי מועיל בדרך להעריך angiogenic כמו גם נגד גורמים angiogenic. כלי שגדלים מתוך תאים טבעות אבי העורקים לגייס שרירים חלקים pericytes לקשר עם צינור תא האנדותל, כלומר שהם דומים מבחינה אנטומית neovessels in vivo. יתר על כן, אבי העורקים עכבר assay הטבעת מחזיקה את היתרון ?…
References
- Goodwin, A. M. In vitro assays of angiogenesis for assessment of angiogenic and anti-angiogenic agents. Microvascular Research. 74, 172-183 (2007).
- Masson, V., Devy, L., Grignet-Debrus, C., Bernt, S., Bajou, K., Blacher, S., Roland, G., Chang, Y., Fong, T., Carmeliet, P., Foidart, J. M., Noel, A. Mouse aortic ring assay: a new approach of the molecular genetics of angiogenesis. Biol. Proced. Online. 4, 24-31 (2002).
