6.5 DPCのマウス胚の解剖

Summary

postimplantation段階の胚の分離は1つが遺伝子のパターンを研究し、胚発生時にプロセスを作る細胞系譜の決定を分析することができますが、初期胚の適切な解剖は挑戦することができます。このプロトコルは、初期の原始-ストリーク段階の胚を単離する方法を説明します（〜6.5日後に交尾[DPC]）。

Abstract

哺乳類の胚発生の初期段階での遺伝子発現パターンの解析は、遺伝子の機能、細胞間相互作用とシグナル伝達機構そのガイド胚のパターン形成についての重要な手がかりを提供することができます。しかし、まもなく移植後の脱落膜からマウス胚の解剖は、挑戦的な手順にすることができ、このプロセスの詳細なステップバイステップの資料が不足している。

ここでは、移植後（6.5 DPC）胚が最初に妊娠マウス（膣栓が指定されていた一日0.5 poistの交尾の検出）の子宮を解剖し、その後母体脱落膜から胚を解剖によって分離されている方法を示しています。ライヘルトの膜の郭清は、栄養膜の円錐の除去と同様に記述されています。

Protocol

雌のマウスからの生殖器官の解剖妊娠動物は、圧縮ガスを使用してCO 2窒息により安楽死させる。 吸収性パッド上に動物の仰臥位に置き、マウスの毛で解剖を汚染の危険性を減らすために70％エタノールに浸けます。 皮膚をつまんで、通常の手術用はさみで正中線にある小さな横切開を行います。しっかりと切開の上下の皮膚を持ち、腹部を露出する頭部と尾部に…

Discussion

マウスのPostimplantationは4.5 DPCと出産の間で発生します。この解剖の方法は、前または後5.5〜8.5 DPCでのステージの胚を分離するために、基本的に前述のように、適用することができます。

Materials

Material Name	Type	Company	Catalogue Number	Comment
Micro Dissecting Forceps serrated, straight	Tool	Roboz	RS-5130	2 pairs
Micro Dissecting Tweezers Pattern #55 INOX	Tool	Roboz	RS-5010	2 pairs
Dulbecco’s Phosphate Buffered Saline (1X)	Reagent	Invitrogen	14190
Fisherbrand Sterile Polysytrene Petri Dish	Tool	Fisher Scientific	08-757-12
4% Paraformaldehyde in PBS	Reagent
Straight Sharp-Pointed Dissecting Scissors	Tool	Fisher Scientific	08-940
Pregnant female mice	Animal
Dissecting Microscope	Microscope