하와이 밥테일 오징어에서 Hemocytes 구하기 Euprymna scolopes와 공생이 아닌 공생 박테리아들의 준수를 관찰
Summary
이 동영상은 하와이 밥테일 오징어에서 hemocytes (혈액 세포)을 구하는 방법을 보여줍니다 것입니다<em> Euprymna scolopes</em> 세포 생물학 및 세균 유착 assays에 사용하기 위해. Hemocytes은 형광 염료와 스테인드 및 GFP – 라벨 박테리아에 노출됩니다.
Abstract
유익한 세균과 호스트 사이의 분자 신호를 중재에 면역 체계의 역할에 관한 연구, 최근에 그들의 microbiota와 eukaryotes의 공동 진화에 대한 우리의 이해에 중요한 기여를 만들었습니다. 하와이 밥테일 오징어 사이의 공생 협회,<em> Euprymna scolopes</em> 그리고 발광 생물 세균<em> 장염 fischeri</em> 동물의 개발에 유익한 박테리아의 영향을 이해하기위한 모델 시스템으로 이용되었습니다. 최근 연구는 대식 세포와 같은 hemocytes은 오징어 호스트의 타고난 면역 체계의 유일한 세포 구성 요소, 가능성이 설립이 협회의 유지 보수를 중재에 중요한 역할을하는 것으로 나타났습니다. 이 프로토콜은에서 hemocytes를 얻는 방법을 보여줍니다 것입니다<em> E. scolopes</em> 그리고 박테리아 바인딩 assays에서 이러한 세포를 사용합니다. hemolymph가 기본 두부 혈관에서 주사기로 수집하기 전에 어른 오징어 먼저 anesthetized 있습니다. 압축을 푼 hemolymph에 포함된 호스트 hemocytes는, chambered 유리 coverslips을 준수하고 녹색 형광 단백질로 분류 공생에 노출되는<em> 장염 fischeri</em>이 아닌 공생<em> 장염 harveyi</em>. hemocytes은 형광 염료 (셀 트래커 오렌지, Invitrogen)에 counterstained 후 형광 현미경을 사용하여 시각입니다.
Protocol
Discussion
유익한 세균과 호스트 사이의 분자 신호를 중재에 면역 체계의 역할에 관한 연구, 최근에 그들의 microbiota와 eukaryotes의 공동 진화에 대한 우리의 이해에 중요한 기여를 만들었습니다. 오징어 / 비브리오 시스템은이 분야 2,3,5,6,8의 근본적 질문에 답변을 취급하기 쉬운 모델 시스템으로 자신을 증명되었습니다. 오징어 Euprymna scolopes의 가벼운 기관은 발광 박테리아 비브리오 fischeri?…
Acknowledgements
자금 출처 : SVN에 코네티컷 연구 재단과 분자 및 세포 생물학의학과 대학교, 시그마 사이 보조금 수준의 연구와 안토니오 H. 및 마조리 R.
AJC에 로마노 대학원 교육 원정대
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Lab-Tek chambered #1.0 borosilicate coverglass system (8-chambers) | Thermo-Fisher Scientific | 155411 | ||
| 26.5 G 1ml latex-free insulin syringe | Becton, Dickinson and Company | C34551 | ||
| Cell Tracker Orange | Invitrogen | C34551 | ||
| SteREO Discovery V20 Microscope | Zeiss | |||
| SP2 Confocal Microscope | Leica |
References
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