获得血细胞从夏威夷短尾鱿鱼 Euprymna scolopes和观察他们坚持共生和非共生细菌
Summary
该视频将演示如何从夏威夷短尾乌贼的血细胞（血细胞），<em> Euprymna scolopes</em>细胞生物和细菌粘附实验使用。血细胞将用荧光染料染色和GFP标记的细菌接触到。
Abstract
有关免疫系统的作用，在调解有益的细菌和主机之间的分子信号研究，近年来，我们与他们的菌群真核生物的共同进化理解作出了重大贡献。夏威夷短尾鱿鱼之间的共生协会，<em> Euprymna scolopes</em>和发光细菌<em>弧菌鲵</em>已被利用作为一个模型系统了解动物发育有益细菌的影响。最近的研究表明，血细胞巨噬细胞样，唯一的鱿鱼主机的先天免疫系统的细胞成分，可能发挥了重要作用，在调解这个协会的建立和维护。该协议将展示如何获得血细胞从<em> E。 scolopes</em然后用这些细胞的细菌结合实验。成人鱿鱼先麻醉前用注射器收集主要头侧血管血淋巴。主机的血细胞，提取的血淋巴中，坚持腔盖玻片，然后接触到绿色荧光蛋白标记的共生<em>弧菌鲵</em>和非共生<em>哈维氏弧菌</em>。血细胞用荧光染料（细胞跟踪橙色，Invitrogen公司），然后counterstained可视化使用荧光显微镜。
Protocol
Discussion
有关免疫系统的作用，在调解有益的细菌和主机之间的分子信号研究，近年来，我们与他们的菌群真核生物的共同进化理解作出了重大贡献。鱿鱼/弧菌系统本身已经证明了作为一个听话的模型系统回答在这一领域的根本性问题2,3,5,6,8。鱿鱼Euprymna scolopes光器官允许殖民统治完全由发光弧菌鲵 。由于房子的组织，保持与海水接触的细菌，鱿鱼，必须不仅促进具体的共生还要继?…
Acknowledgements
资金来源：康涅狄格州大学研究基金会和分子和细胞生物学系到SVN，西格玛郗赠款援助的研究和安东尼H.和Majorie R.
普罗迪研究生教育奖学金，以AJC
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Lab-Tek chambered #1.0 borosilicate coverglass system (8-chambers) | Thermo-Fisher Scientific | 155411 | ||
| 26.5 G 1ml latex-free insulin syringe | Becton, Dickinson and Company | C34551 | ||
| Cell Tracker Orange | Invitrogen | C34551 | ||
| SteREO Discovery V20 Microscope | Zeiss | |||
| SP2 Confocal Microscope | Leica |
References
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