Electrodo de fabricación e implantación de Aplysia californica Para grabaciones multi-canal neural y muscular en los animales intactos, libremente Comportarse
Summary
Una técnica se describe para la implantación de cuatro<em> In vivo</em> Electrodos para monitorear el control neuromuscular de la conducta alimenticia en<em> Aplysia californica</em>.
Abstract
Grabación de los nervios y los músculos clave de<em> Aplysia</em> En el comportamiento de alimentación nos permite estudiar los patrones de control de los nervios en un animal intacto. Al mismo tiempo de grabación de múltiples nervios y los músculos nos da información precisa sobre el calendario de la actividad neuronal. Los métodos anteriores han trabajado para la grabación de dos electrodos, pero el estudio de los nervios o los músculos adicionales necesarios combinando y un promedio de las grabaciones de varios animales, lo que hacía difícil determinar los detalles finos de la oportunidad y la eliminación gradual, debido a la variabilidad de la respuesta a la respuesta, y de un animal a otro. La implantación de cuatro electrodos individuo tiene una tasa de éxito muy baja debido a la formación de adherencias que impiden que los animales de la realización de movimientos normales de alimentación. Hemos desarrollado un nuevo método de fabricación de electrodos, que reduce la mayor parte de los electrodos en el interior del animal teniendo en cuenta los movimientos de la alimentación normal. Usando una combinación de gomas para sujetar los resultados de los electrodos en un aislamiento más confiable del electrodo, que dura más tiempo, por lo que es posible grabar por periodos de hasta una semana. La técnica de fabricación que describimos podría ser ampliado para incorporar varios electrodos adicionales, y que se aplique a los animales vertebrados.
Protocol
Discussion
Una innovación clave que ha hecho de estas grabaciones de éxito es la combinación de los electrodos en un cable. Dos grabaciones de electrodos se han usado antes, pero ampliando a cuatro electrodos individuales dio lugar a la formación de adherencias quirúrgicas que a menudo impide al animal hacer los movimientos normales de alimentación. La combinación de los electrodos en un cable reduce la mayor parte de los electrodos en el interior del animal, que a su vez reduce la respuesta inmune y permite que el animal s…
Acknowledgements
Agradecemos el apoyo de los NIH (NS047073 a HJC). También estamos agradecidos a Catherine Kehl por sus primeros experimentos con Kwik-Sil, que nos animó a usarlo para nuestra aplicación.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Enamel coated stainless steel wire | California Fine Wire | 0.001D, coating h | ||
| Household Silicone II Glue | GE | |||
| Kwik-Sil Adhesive | WPI | |||
| Duro Qwik-Gel superglue | Henkel corp. | |||
| A-M Systems model 1700 amplifier | A-M Systems | Filter settings:100-1000Hz nerves,10-1000Hz I2 muscle | ||
| Axoscope 10.1 | Molecular Devices | |||
| Gold Connector Pins | Bulgin | SA3148/1 | ||
| Gold Connector Sockets | Bulgin | SA3149/1 |
References
- Lu, H., Chestek, C. A., Shaw, K. M., Chiel, H. J. Selective extracellular stimulation of individual neurons in ganglia. J. Neural Eng. 5, 287-309 (2008).
- Morton, D. W., Chiel, H. J. In vivo buccal nerve activity that distinguishes ingestion from rejection can be used to predict behavioral transitions in Aplysia. J Comp. Physiol. A. 172, 17-32 (1993).
- Warman, E. N., Chiel, H. J. A new technique for chronic single extracellular recording in freely behaving animals using pipette electrodes. J. Neurosci. Methods. 57, 161-169 (1995).
- Ye, H., Morton, D. W., Chiel, H. J., J, H. nbsp;Neuromechanics of multifunctionality during rejection in Aplysia californica. J. Neurosci. 26, 10743-10755 (2006).
