Elektrod Fabrication och implantation i Aplysia californica För flera kanaler Neural och muskulös Inspelningar i intakt, fritt bete Djur
Summary
En teknik beskrivs för implantering fyra<em> In vivo</em> Elektroder för att övervaka den neuromuskulära kontrollen av utfodring beteende i<em> Aplysia californica</em>.
Abstract
Inspelning från viktiga nerver och muskler<em> Aplysia</em> Under ätbeteende ger oss möjlighet att studera mönster av neurala kontrollen i en intakt djur. Samtidigt inspelning från flera nerver och muskler ger oss exakt information om när neural aktivitet. Tidigare inspelning metoder har arbetat för två elektroder, men studien av ytterligare nerver eller muskler som krävs för att kombinera och genomsnittet av de inspelningar av olika djur, vilket gjorde det svårt att avgöra fina detaljer om timing och fasa, på grund av variation från svar på svar, och från djur till djur. Implantation fyra individuella elektroderna har en mycket låg framgång beror på bildandet av sammanväxningar som hindrar djuren från att utföra normal utfodring rörelser. Vi utvecklade en ny metod för elektrod tillverkning som reducerar huvuddelen av elektroderna inne i djuret möjliggör normal utfodring rörelser. Med en kombination av lim för att fästa elektroderna resulterar i en mer pålitlig isolering av elektrod som varar längre, vilket gör det möjligt att spela in i perioder så länge som en vecka. Tillverkning teknik som vi beskriver kan utsträckas till att omfatta ytterligare ett antal elektroder, och skulle kunna tillämpas på ryggradsdjur.
Protocol
Discussion
En viktig nyhet som har gjort dessa inspelningar framgångsrik är att kombinera elektroder i en kabel. Två elektrod inspelningar har använts tidigare, men expanderar till fyra enskilda elektroder resulterade i bildandet av kirurgiska sammanväxningar som ofta hindrade djuret från att göra vanlig mat rörelser. Kombinera de elektroder i en kabel minskar huvuddelen av elektroderna inne i djuret, vilket i sin tur minskar immunförsvaret och gör det möjligt för djuret att röra sig mer fritt.
<p class="jove_cont…Acknowledgements
Vi erkänner tacksamt stöd från NIH (NS047073 till HJC). Vi är också tacksamma till Catherine Kehl för hennes tidiga experiment med Kwik-Sil, som uppmuntrade oss att använda den för vår ansökan.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Enamel coated stainless steel wire | California Fine Wire | 0.001D, coating h | ||
| Household Silicone II Glue | GE | |||
| Kwik-Sil Adhesive | WPI | |||
| Duro Qwik-Gel superglue | Henkel corp. | |||
| A-M Systems model 1700 amplifier | A-M Systems | Filter settings:100-1000Hz nerves,10-1000Hz I2 muscle | ||
| Axoscope 10.1 | Molecular Devices | |||
| Gold Connector Pins | Bulgin | SA3148/1 | ||
| Gold Connector Sockets | Bulgin | SA3149/1 |
References
- Lu, H., Chestek, C. A., Shaw, K. M., Chiel, H. J. Selective extracellular stimulation of individual neurons in ganglia. J. Neural Eng. 5, 287-309 (2008).
- Morton, D. W., Chiel, H. J. In vivo buccal nerve activity that distinguishes ingestion from rejection can be used to predict behavioral transitions in Aplysia. J Comp. Physiol. A. 172, 17-32 (1993).
- Warman, E. N., Chiel, H. J. A new technique for chronic single extracellular recording in freely behaving animals using pipette electrodes. J. Neurosci. Methods. 57, 161-169 (1995).
- Ye, H., Morton, D. W., Chiel, H. J., J, H. nbsp;Neuromechanics of multifunctionality during rejection in Aplysia californica. J. Neurosci. 26, 10743-10755 (2006).
