Homogène de détection rapide des essais biologiques utilisant un support magnétique Système de modulation Biosensing
Summary
Magnétique de modulation biodétection système est utilisé pour rapidement, avec tact et simplement de détecter des dosages biologiques, tels que les molécules d'ADN et des protéines.
Abstract
Un système de modulation magnétique biodétection (MMB) [1,2] rapide et homogène détecté cibles biologiques à de faibles concentrations sans aucun lavage ou étape de séparation. Lorsque l'IL-8 cible a été présent, une «sandwich' essai basé sur des billes magnétiques attachés avec de l'IL-8 anticorps de capture à la streptavidine couplée protéine fluorescente via l'IL-8 et un objectif de l'IL-8 biotinylé anticorps. Les billes magnétiques sont manoeuvré en mouvement oscillatoire en appliquant un gradient de champ magnétique alternatif à travers deux pôles électromagnétiques. Les protéines fluorescentes, qui sont attachés aux billes magnétiques sont condensés dans la zone de détection et leur mouvement dans et hors d'un rayon laser orthogonaux produit un signal périodique fluorescent qui est démodulé en utilisant la détection synchrone. Le système de modulation magnétique biodétection a été précédemment utilisé pour détecter les séquences codantes de la protéine non structurale du virus Ibaraki 3 (NS3) de l'ADN complémentaire (ADNc) [2]. Les techniques qui sont mises en évidence dans ce travail pour la manipulation extérieure et la condensation des particules peut être utilisé pour d'autres applications, par exemple la livraison de médicaments à accouplement magnétique<em> In vivo</em> Ou améliorer le contraste pour<em> In vivo</emLes applications d'imagerie>.
Protocol
Discussion
En résumé, nous avons montré que le système MMB peut être utilisé pour détecter la présence d'IL-8 cibles à faible concentration (0,5 pico-gramme est la limite de détection des tests de précision Bio-Plex cytokine pro [3,4]). La capacité du système ne se limite pas à l'IL-8 et peut être utilisé pour détecter d'autres protéines. Les avantages du système MMB sont la capacité à détecter la cible rapidement et sans aucune séparation ou de lavage. Ainsi, il facilite le processus de détecti…
Acknowledgements
Ce travail a été partiellement financé par le Fonds Ishaya Horowitz.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Bio-Plex Pro Human Cytokine IL-8 set | Bio-Rad | 171-B5008M | ||
| Recombinant human IL-8 target | Thermo Scientific | R202625 | ||
| Biotinylated monoclonal mouse anti human IL-8 antibody G265-8 | BD Biosciences | 554718 | ||
| Streptavidin coupled fluorescent protein | Bio-Rad | Streptavidin PE |
References
- Danielli, A., Arie, A., Porat, N., Ehrlich, M. Detection of fluorescent-labeled probes at sub-picomolar concentrations by magnetic modulation. Optics Express. 16, 19253-19259 (2008).
- Danielli, A., Porat, N., Arie, A., Ehrlich, M. Rapid homogenous detection of the Ibaraki virus NS3 cDNA at pico-molar concentrations by magnetic modulation. Biosensors and Bioelectronics. 25, 858-863 (2009).
- . . Bio-Rad “Human angiogenesis assay panel”. , .
- . Instruction Manual. Bio-Plex Precision Pro Cytokine Assay. , .
