Summary
यह प्रोटोकॉल सूअर में महाधमनी बैंडिंग आरोही के लिए एक न्यूनतम इनवेसिव शल्य चिकित्सा प्रक्रिया का वर्णन करता है।
Abstract
दिल की विफलता के बड़े पशु मॉडल मनुष्यों के आकार और शारीरिक समानता के कारण नए चिकित्सीय हस्तक्षेपों के विकास में एक आवश्यक भूमिका निभाते हैं। प्रयासों को दबाव-अधिभार प्रेरित दिल की विफलता का एक मॉडल बनाने के लिए समर्पित किया गया है, और आरोही महाधमनी बैंडिंग जबकि अभी भी सुप्रा-कोरोनरी और मनुष्यों में महाधमनी स्टेनोसिस की एक आदर्श नकल नहीं है, जो मानव स्थिति से काफी मिलती-जुलती है।
इस अध्ययन का उद्देश्य एक महाधमनी बैंड रखकर बाएं वेंट्रिकुलर दबाव अधिभार को प्रेरित करने के लिए एक न्यूनतम इनवेसिव दृष्टिकोण का प्रदर्शन करना है, जो कि उच्च निष्ठा दबाव सेंसर के साथ सटीक रूप से कैलिब्रेट किया गया है। यह विधि सर्जिकल प्रक्रिया (3 आर) के शोधन का प्रतिनिधित्व करती है, जिसके परिणामस्वरूप समरूप ट्रांस-स्टेनोटिक ग्रेडिएंट और इंट्राग्रुप परिवर्तनशीलता कम हो जाती है। इसके अतिरिक्त, यह तेजी से और असमान पशु वसूली को सक्षम बनाता है, जिससे न्यूनतम मृत्यु दर होती है। अध्ययन के दौरान, जानवरों को सर्जरी के बाद 2 महीने तक पालन किया गया था, ट्रांसथोरासिक इकोकार्डियोग्राफी और दबाव-मात्रा लूप विश्लेषण को नियोजित किया गया था। हालांकि, यदि वांछित हो तो लंबी अनुवर्ती अवधि प्राप्त की जा सकती है। यह बड़ा पशु मॉडल नई दवाओं के परीक्षण के लिए मूल्यवान साबित होता है, विशेष रूप से हाइपरट्रॉफी को लक्षित करने वाले और बाएं वेंट्रिकुलर दबाव अधिभार से जुड़े संरचनात्मक और कार्यात्मक परिवर्तन।
Introduction
हार्ट फेल्योर (एचएफ) एक जानलेवा बीमारी है जो दुनिया भर में लाखों लोगों को प्रभावित करती है, जिससे प्रमुख सामाजिक औरआर्थिक प्रभाव पड़ते हैं। इसकी महत्वपूर्ण एटियलजि में से एक महाधमनी वाल्व रोग या महाधमनी स्टेनोसिस (एएस) है। महाधमनी स्टेनोसिस उन्नत उम्र में अधिक प्रचलित है और संयुक्त राज्य अमेरिका में दूसरे सबसे आम वाल्वुलर घाव के रूप में रैंक करता है। यूरोप में एएस से संबंधित मृत्यु दर में भी वृद्धि हुई है, विशेष रूप से हाल ही में हस्तक्षेप प्रक्रियाओं तक पहुंच के बिना देशों में2. एचएफ की जटिलता और चिकित्सीय नवाचारों की कमी को देखते हुए, विश्वसनीय पशु मॉडल की आवश्यकता है जो मानव स्थिति को दोहरा सकते हैं और नए हस्तक्षेपों के परीक्षण की सुविधा प्रदान कर सकते हैं3. जबकि कृंतक मॉडल बड़े पशु मॉडल से आगे निकल जाते हैं, बाद वाले अपने आकार और शारीरिक समानता के कारण कई फायदे प्रदान करते हैं, जिससे मानव उपयोग के लिए दवा की खुराक और चिकित्सा उपकरणों के परीक्षण की अनुमति मिलती है।
इस पद्धति का उद्देश्य जैव चिकित्सा अनुसंधान में उपयोग की जाने वाली अधिकांश बड़ी पशु प्रजातियों पर लागू आरोही महाधमनी बैंडिंग (एएबी) का एक प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य मॉडल स्थापित करना है। इस अध्ययन में, प्रक्रिया को न्यूनतम इनवेसिव दृष्टिकोण का उपयोग करके सूअर में प्रदर्शित किया जाता है, 3R सिद्धांतों (प्रतिस्थापन, कमी और शोधन4) का पालन किया जाता है। यह दृष्टिकोण एक सटीक दबाव ढाल के निर्माण को सुनिश्चित करता है, जिसके परिणामस्वरूप उच्च प्रजनन क्षमता (संभावित रूप से आवश्यक जानवरों की संख्या को कम करना) होता है। इसके अतिरिक्त, छोटे सर्जिकल चीरा (2-3 सेमी) सर्जिकल अपमान को कम करता है, स्टर्नोटॉमी और बड़े थोरैकोटॉमी5 (शोधन) जैसे अधिक आक्रामक दृष्टिकोणों की तुलना में पशु कल्याण में सुधार करता है। इसके अलावा, साहित्य में विस्तृत विवरण के साथ-साथ विधि का एक वीडियो प्रदर्शन प्रदान करना, संभवतः प्रशिक्षण उद्देश्यों (प्रतिस्थापन) के लिए उपयोग किए जाने वाले जानवरों की आवश्यकता को कम कर सकता है, जिससे पशु उपयोग कम हो सकता है। इस मॉडल को अलग-अलग विकास दर के साथ विभिन्न सूअर उपभेदों/नस्लों के लिए अनुकूलित किया जा सकता है और निरंतर दबाव अधिभार को प्रेरित करता है, जिससे 1 या 2 महीने के फॉलो-अप के बाद महत्वपूर्ण अतिवृद्धि होती है।
वर्तमान विधियां निश्चित स्टेनोसिस6 को नियोजित करती हैं, पशु आकार परिवर्तनशीलता की अवहेलना करती हैं, या द्रव से भरे दबाव रीडिंग7 का उपयोग करके ढाल की गणना करती हैं, जो उच्च-निष्ठा दबाव सेंसर की तुलना में कम विश्वसनीय हैं और सिग्नल भिगोना8 के लिए अतिसंवेदनशील होते हैं। एक अन्य दृष्टिकोण स्टेनोसिस5 के लिए एक एकल दबाव माप डिस्टल का उपयोग करता है। हालांकि, percutaneously वितरित उच्च निष्ठा दबाव सेंसर का उपयोग कर एक साथ समीपस्थ और बाहर का दबाव संकेतों के माध्यम से स्टेनोसिस calibrating प्रोटोकॉल का एक पर्याप्त अनुकूलन का प्रतिनिधित्व करता है, बेहतर समूह एकरूपता में जिसके परिणामस्वरूप. इस पद्धति को नेत्रहीन रूप से प्रदर्शित करके, अन्य शोधकर्ताओं को 3R सिद्धांतों के आवेदन को बढ़ावा देते हुए इस मॉडल की उपलब्धता में वृद्धि, महत्वपूर्ण बाधाओं के बिना इसे दोहराने में सक्षम होना चाहिए।
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
पशु प्रयोगों को पोर्टो विश्वविद्यालय, कार्डियोवास्कुलर रिसर्च एंड डेवलपमेंट सेंटर (यूएनआईसी, पोर्टो, पुर्तगाल) में प्रायोगिक सर्जरी प्रयोगशाला में किया गया था। संस्थागत पशु आचार समिति ने राष्ट्रीय पशु स्वास्थ्य प्राधिकरण (Direcção-Geral de Alimentação e Veterinária, DGAV, Ref: 2021-07-30 011706 0421/000/000/2021) के अनुसार अध्ययन को मंजूरी दी। प्रयोगकर्ताओं को या तो लाइसेंस प्राप्त था (फेलासा-समकक्ष प्रयोगशाला पशु विज्ञान प्राधिकरण) या कार्डियोथोरेसिक सर्जन या एनेस्थेसियोलॉजिस्ट थे। इस काम में इस्तेमाल किए गए जानवर लैंड्रेस एक्स पाइट्रेन पृष्ठभूमि के नर थे और डीजीएवी (पीटीएएच 03) द्वारा लाइसेंस प्राप्त ब्रीडर से अधिग्रहित किए गए थे। जानवरों का शुरुआती वजन 20-25 किलोग्राम था, जिसने अधिकतम 2 महीने के अनुवर्ती (70-80 किलोग्राम, चित्रा 1) की अनुमति दी थी। महत्वपूर्ण पशु विकास के कारण लंबे समय तक पालन अवधि से समझौता किया जाता है, जिसे हमारे बुनियादी ढांचे संभालने में असमर्थ थे।
1. संज्ञाहरण और महत्वपूर्ण संकेत निगरानी
- पानी विज्ञापन libitum के साथ रात भर चयनित जानवर तेजी से.
- जागरूक जानवर का वजन करें (इसे पशु पैमाने पर चलने की अनुमति दें), या आगमन वजन और अपेक्षित वृद्धि दर के आधार पर अनुमान का उपयोग करें।
- केटामाइन (15 मिलीग्राम/किग्रा), मिडाज़ोलम (0.5 मिलीग्राम/किग्रा), और एज़ेपरोन (4 मिलीग्राम/किग्रा) का कॉकटेल 20 एमएल लुअर लॉक सिरिंज में एक एक्सटेंशन लाइन (100 सेमी) से जुड़ा हुआ है, जिसके बाद 21 जी सुई ( सामग्री की तालिकादेखें) तैयार करें। इंजेक्शन टयूबिंग की मृत मात्रा के लिए खाते में पर्याप्त संवेदनाहारी सुनिश्चित करें।
- एक शांत और सुरक्षित वातावरण में सुअर को अलग करें (आमतौर पर एक खाली पशु रखरखाव कक्ष, यदि संभव हो तो) और गर्दन या हिंद पैर की मांसपेशियों में इंट्रामस्क्युलर इंजेक्शन के माध्यम से जानवर को एनेस्थेटाइज करें (संस्थागत प्रोटोकॉल का पालन करना)। पशु एक शांत और अंधेरे जगह में है सुनिश्चित करें और सुनिश्चित करें कि यह खुद को घायल नहीं कर सकते हैं, जबकि लेटा हुआ है, जो 10-15 मिनट लेना चाहिए.
नोट: एक विस्तार लाइन का उपयोग जानवर को नियंत्रित करने की आवश्यकता से बचा जाता है। - एक बार जब जानवर पुनरावृत्ति में होता है, तो एनेस्थेटाइज्ड जानवर को स्ट्रेचर पर रखें और जानवर को ऑपरेटिंग रूम में ले जाएं (इस बिंदु पर जानवर के वजन को मापें यदि सचेत वजन एक विकल्प नहीं था)।
- एक सही या बाएं पार्श्व decubitus में पशु की स्थिति कान cannulated किया जा करने के आधार पर. एक परिपत्र गति में क्लोरहेक्सिडिन और अल्कोहल के साथ कई बार कान साफ करें। फिर, एक 20 जी अंतःशिरा कैथेटर का उपयोग कर सीमांत कान नस canulate और गैर बुना चिपकने वाला ( सामग्री की तालिकादेखें) का उपयोग कर इसे सुरक्षित. चतुर्थ कैथेटर एक 3 बंदरगाह पानी निकलने की टोंटी कई गुना खारा के साथ पूर्व flushed करने के लिए कनेक्ट करें.
नोट: वैकल्पिक रूप से, एक मानक IV जलसेक लाइन (ड्रिप लाइन) की तुलना में, एक जलसेक पंप प्रवाह दर (2 एमएल/किग्रा/एच) के सटीक समायोजन को सक्षम बनाता है। - एक ट्रांसडर्मल fentanyl पैच रखें (50 μg/h) ( सामग्री की तालिकादेखें) contralateral कान में.
- एक रेडियोट्रांसपेरेंट सर्जिकल टेबल पर जानवर रखें, पृष्ठीय पुनरावृत्ति में, एक वार्मिंग गद्दे के ऊपर, और इसे जगह में सुरक्षित करें ( सर्जिकल टेबल पर पंजे को सुरक्षित करने वाली पट्टियाँ)।
- एक प्रोपोफोल छिड़काव लाइन को 3-पोर्ट स्टॉपकॉक मैनिफोल्ड से कनेक्ट करें। एनेस्थीसिया रखरखाव प्रोपोफोल द्वारा प्रदान किया जाएगा जो 10-20 मिलीग्राम / किग्रा / एच की दर से सिरिंज परफ्यूजन पंप ( सामग्री की तालिकादेखें) पर घुड़सवार 50 एमएल सिरिंज के माध्यम से प्रशासित किया जाएगा।
- एपनिया को प्रेरित करने और इंटुबैषेण की अनुमति देने के लिए प्रोपोफोल (4 मिलीग्राम/किग्रा) और फेंटेनाइल (10 माइक्रोग्राम/किग्रा) ( सामग्री की तालिका देखें) का एक बोलस प्रशासित करें।
नोट: जानवर इस क्षण से एपनिया में होगा, और यांत्रिक वेंटिलेशन स्थापित किया जाना चाहिए। आगे बढ़ने से पहले, सुनिश्चित करें कि ऑक्सीजन स्रोत उपलब्ध है, और वेंटिलेटर ( सामग्री की तालिकादेखें) कैलिब्रेटेड है और वेंटिलेशन के लिए तैयार है। - प्रतिक्रियाशीलता के नुकसान को सुनिश्चित करने के बाद, और एक उपयोगकर्ता के साथ सुअर के मुंह को खुला रखने के साथ-साथ जीभ को बाहर की ओर खींचते हुए, एक नंबर 4 मिलर ब्लेड ( सामग्री की तालिकादेखें) के साथ एक लैरींगोस्कोप का उपयोग करें ताकि एपिग्लॉटिस की पहचान की जा सके और धीरे से जुटाया जा सके, मुखर डोरियों का एक दृश्य प्राप्त किया जा सके। या तो एंडोट्रैचियल ट्यूब को सीधे पेश करें या पहले उस पर एक बौगी और एंडोट्रैचियल ट्यूब को आगे बढ़ाएं। कुछ एट्रूमैटिक आंतों के संदंश नरम तालू को जुटाने और एपिग्लॉटिस तक पहुंच प्राप्त करने में सहायता कर सकते हैं।
- एंडोट्रैचियल ट्यूब कफ को फुलाएं और इसे एनेस्थीसिया मशीन/वेंटिलेटर से कनेक्ट करें। वेंटिलेटरी मापदंडों को 8-10 एमएल/किग्रा ज्वारीय मात्रा, श्वसन दर 15-25 श्वसन प्रति मिनट और 5 सेमी एच2ओ पीईईपी (सकारात्मक अंत-श्वसन दबाव) में समायोजित करें। अंत-ज्वारीय सीओ2 को 35 और 45 मिमीएचजी के बीच बनाए रखने के लिए वेंटिलेटरी मापदंडों को समायोजित करें।
- एसपीओ2 सेंसर को जीभ या कान पर रखें (जहां सबसे अच्छा संकेत प्राप्त होता है), एसोफेजेल तापमान जांच रखें, और ईसीजी इलेक्ट्रोड संलग्न करें ( सामग्री की तालिकादेखें)।
- कॉर्नियल चोट को रोकने के लिए बाँझ नेत्र चिकनाई मरहम लागू करें।
2. धमनी कैनुलेशन
- पैल्पेब्रल रिफ्लेक्स और स्थिर हृदय गति और रक्तचाप की अनुपस्थिति से उचित संवेदनाहारी गहराई सुनिश्चित करने के बाद, एक परिपत्र गति में क्लोरहेक्सिडिन और अल्कोहल के साथ कमर क्षेत्र को अच्छी तरह से साफ और कीटाणुरहित करें। फेनेस्टेड बाँझ पर्दे ( सामग्री की तालिकादेखें) के साथ जानवर को कवर करें, ऊरु धमनी क्षेत्र में स्थित छेद के साथ (पहले पैल्पेशन या अल्ट्रासाउंड द्वारा पुष्टि की गई)। किग्रा) को एंटीबायोटिक्स प्रोफिलैक्सिस के रूप में प्रशासित करें।
- यदि प्रक्रिया में पशु वसूली (महाधमनी बैंडिंग) शामिल है, तो इस बिंदु से आगे सड़न रोकनेवाला तकनीक का उपयोग करें।
नोट: एक सख्त सड़न रोकनेवाला तकनीक की आवश्यकता नहीं है अगर यह एक टर्मिनल प्रक्रिया (पीवी लूप विश्लेषण) है। हालांकि, संक्रमण से बचने के लिए बाँझ फैशन में काम करना फायदेमंद है जो हेमोडायनामिक माप को प्रभावित कर सकता है। - पंचर साइट की पहचान करें और चमड़े के नीचे 1% लिडोकेन के साथ क्षेत्र में घुसपैठ करें।
- संवहनी जांच ( सामग्री की तालिकादेखें) का उपयोग करके सामान्य ऊरु धमनी की पहचान करें और अल्ट्रासाउंड मार्कर की स्थिति और सही गहराई की पुष्टि करें।
नोट: ऊरु धमनी पंचर एक छोटी धुरी, लंबी धुरी, या दोनों तकनीकों का एक संयोजन का उपयोग कर प्रदर्शन किया जा सकता है, कुछ प्रणालियों में एक द्वि-विमान साधन का उपयोग. हालाँकि, हमारी टीम अधिक बार लघु-अक्ष दृष्टिकोण को नियोजित करती है। - इसे इकट्ठा करने से पहले हेपरिनाइज्ड खारा के साथ परिचयकर्ता और फैलाव को फ्लश करके परिचयकर्ता म्यान ( सामग्री की तालिकादेखें) तैयार करें। सुनिश्चित करें कि परिचयकर्ता साइड पोर्ट में 3-तरफा पानी निकलने की टोंटी फैलाव को हटाते समय रक्त की हानि से बचने के लिए जानवर की ओर बंद स्थिति में है।
- अल्ट्रासाउंड का उपयोग करके अपने प्रक्षेपवक्र की निगरानी करते हुए ऊरु धमनी में एक धमनी सुई (अधिमानतः एक इकोोजेनिक, सामग्री की तालिका देखें) को आगे बढ़ाएं। एक बार धमनी लुमेन तक पहुंचने के बाद, जिसे सुई हब से बाहर निकलने वाले धमनी रक्त को स्पंदित करके पुष्टि की जा सकती है, धमनी में एक जे-टिप गाइडवायर को आगे बढ़ाएं। अल्ट्रासाउंड के साथ गाइडवायर के सही परिचय की पुष्टि की जा सकती है।
- सुई निकालें, अतिरिक्त रक्तस्राव से बचने के लिए पंचर साइट पर दबाव रखें, और धमनी में परिचयकर्ता + फैलाव (आकार 6 एफआर, 10 सेमी लंबाई) विधानसभा को आगे बढ़ाएं। फैलाव निकालें और अपने पक्ष बंदरगाह से aspirating और क्रमिक बाँझ खारा के साथ setriting द्वारा परिचयकर्ता की स्थिति की पुष्टि.
- रक्तचाप की निगरानी के लिए ऊरु धमनी परिचयकर्ता के साइड-पोर्ट पर एक धमनी दबाव रेखा कनेक्ट करें। सुनिश्चित करें कि दबाव ट्रांसड्यूसर की ऊंचाई सही अटरिया के स्तर पर है और वायुमंडलीय दबाव शून्य है।
- बाएं वेंट्रिकुलर कैथीटेराइजेशन तक एक बाँझ कपड़ा के साथ परिचयकर्ता को कवर करें।
3. आरोही महाधमनी बैंडिंग (तैयारी)
- एक मामूली सही पार्श्व decubitus करने के लिए जानवर की स्थिति को समायोजित करें और बाएं सामने पंजा बढ़ा.
- कार्डियक अल्ट्रासाउंड ट्रांसड्यूसर ( सामग्री की तालिकादेखें) का उपयोग करके आरोही महाधमनी की स्थिति का पता लगाएँ और एक परिपत्र गति में क्लोरहेक्सिडिन और अल्कोहल के साथ जानवर की छाती को अच्छी तरह से कीटाणुरहित करने से पहले चीरा साइट को चिह्नित करें।
- बाँझ पर्दे के साथ जानवर को कवर करें।
- पर्याप्त एनाल्जेसिया सुनिश्चित करने के लिए एक फेंटेनाइल बोलस (10 μg/kg) का प्रशासन करें। संज्ञाहरण और एनाल्जेसिया की गहराई की पुष्टि करने के लिए, पैल्पेब्रल रिफ्लेक्सिस की कमी के लिए निरीक्षण करें और पहला चीरा बनाने पर हृदय गति या रक्तचाप में कोई बदलाव न करें।
- 3/4वें इंटरकोस्टल स्पेस के स्तर पर 2-3 सेमी त्वचा चीरा बनाएं और अंतर्निहित प्रावरणी और मांसपेशियों की परतों को तब तक विच्छेदित करें जब तक कि इंटरकोस्टल स्पेस तक नहीं पहुंच जाता।
- कुंद कैंची का उपयोग कर वक्ष दर्ज करें, जबकि जानवर PEEP के बिना मजबूर समाप्ति में है फेफड़ों को नुकसान पहुंचाने से बचने के लिए.
- 3 सेमी की एक अधिकतम करने के लिए वापस लेने के ब्लेड की नियुक्ति की अनुमति देने के लिए चीरा बढ़ाएँ.
- पसलियों को वापस लें और अंतर्निहित संरचनाओं की कल्पना करें। यदि चीरा सही जगह पर किया जाता है, तो फुफ्फुसीय धमनी आसानी से दिखाई देनी चाहिए। महाधमनी इसके पीछे की ओर होगी।
- न्यूनतम इनवेसिव कार्डियक सर्जरी संदंश और कैंची का प्रयोग, पेरीकार्डियम खोलने और छोड़ दिया अटरिया और किसी भी फेफड़ों के ऊतकों गीला बाँझ धुंध का उपयोग महाधमनी के दृश्य को कवर वापस लेने.
नोट: बाएं अटरिया बहुत ज्यादा हेरफेर से बचें, क्योंकि इससे एट्रियल फाइब्रिलेशन हो जाएगा। यदि ऐसा होता है और अनायास हल नहीं होता है, तो विद्युत कार्डियोवर्जन लागू करें। - ध्यान से फुफ्फुसीय धमनी से महाधमनी को अलग जब तक अनुप्रस्थ पेरिकार्डियल साइनस तक पहुँच जाता है. यह वह चैनल होगा जिसके माध्यम से बैंडिंग सामग्री को पारित किया जाएगा।
नोट: आरोही महाधमनी की बैंडिंग के लिए, पशु आकार और अनुवर्ती अवधि के आधार पर कई सामग्रियों का उपयोग किया जा सकता है। सीमित विकास और / या एक छोटी अनुवर्ती अवधि वाले जानवरों के लिए, एक नायलॉन केबल ज़िप टाई का उपयोग किया जा सकता है (सस्ता विकल्प), जबकि तेजी से बढ़ने वाले जानवरों और / या लंबी अनुवर्ती अवधि के लिए, टाइटेनियम क्लिप के साथ तय किए गए एक संवहनी कृत्रिम अंग ग्राफ्ट का उपयोग किया जा सकता है (अधिक महंगा विकल्प), बैंड आंतरिककरण से बचना (नीचे दिए गए अनुभागों में विस्तार से चर्चा की गई) ( सामग्री की तालिका देखें)। - विकल्प 1 (नायलॉन केबल ज़िप टाई):
- एक ~ बाँझ प्लास्टिक टयूबिंग के एक ~ 10 सेमी खंड में कटौती एक लुमेन के साथ काफी छोटा करने के लिए snuggly नायलॉन बैंड की नोक फिट.
नोट: बाँझ टयूबिंग और नायलॉन बैंड पहले कम से कम 24 घंटे के लिए फॉर्मलाडेहाइड में एथिलीन ऑक्साइड नसबंदी या जलमग्न द्वारा निष्फल होते हैं। - महाधमनी और फुफ्फुसीय धमनी (समीपस्थ) के बीच की जगह से महाधमनी और दाएं अटरिया (डिस्टल) के बीच की जगह से महाधमनी और फुफ्फुसीय धमनी (समीपस्थ) के बीच की जगह से, महाधमनी के चारों ओर प्लास्टिक टयूबिंग (जो नायलॉन बैंड के लिए एक एट्रूमैटिक गाइड के रूप में कार्य करता है) को पारित करने के लिए 90 ° घुमावदार संदंश का उपयोग करें। उंगली के साथ तालमेल सही पथ के माध्यम से संदंश मार्गदर्शन में मदद कर सकते हैं.
- ध्यान रखें कि फुफ्फुसीय धमनी या दाएं अटरिया पर बहुत अधिक तनाव न डालें, क्योंकि इससे हेमोडायनामिक अस्थिरता हो सकती है। प्रणालीगत हाइपोटेंशन की लंबी अवधि से बचने के लिए इस चरण के दौरान महत्वपूर्ण संकेतों पर पूरा ध्यान दें।
- एक बार प्लास्टिक गाइड बाहर का पक्ष पर देखा जाता है, ऊतक संदंश के साथ यह समझ और ध्यान से महाधमनी के चारों ओर यह खींच, इसके साथ नायलॉन बैंड लाने. महाधमनी को संकुचित किए बिना नायलॉन बैंड के दो सिरों को कनेक्ट करें।
- एक ~ बाँझ प्लास्टिक टयूबिंग के एक ~ 10 सेमी खंड में कटौती एक लुमेन के साथ काफी छोटा करने के लिए snuggly नायलॉन बैंड की नोक फिट.
- विकल्प 2 (ePTFE ग्राफ्ट)
- एक ~ 10 सेमी बाँझ ePTFE एक 5 मिमी 40 सेमी लंबे भ्रष्टाचार कटौती.
- एक 90 डिग्री घुमावदार संदंश का प्रयोग करें भ्रष्टाचार को संभालने और महाधमनी के आसपास यह पास. चरण 3.11.2 और 3.11.3 देखें।
- महाधमनी कैथीटेराइजेशन की सुविधा के लिए बैंडिंग क्षेत्र में एक रेडियोपैक मार्कर ( सामग्री की तालिकादेखें) रखें।
- गीले धुंध और बाँझ पर्दे के साथ इंटरकोस्टल स्पेस को कवर करें।
4. बाएं वेंट्रिकल (एलवी)/महाधमनी कैथीटेराइजेशन
- हेपरिन (200 U.kg-1) का प्रशासन करें।
नोट: एंडोवास्कुलर प्रक्रियाएं थक्का गठन और डिस्टल एम्बोलिज़ेशन के जोखिम से जुड़ी होती हैं, जबकि हेपरिन प्रशासन महाधमनी के सर्जिकल एक्सेस के दौरान अत्यधिक रक्तस्राव का कारण बनता है। इसलिए, महाधमनी तक पहुँचने और बैंडिंग लगाने के बाद LV/aorta कैथीटेराइजेशन किया जाता है। - एक दोहरी हेमोस्टेसिस वाल्व एडाप्टर या एक स्टार के आकार का हेमोस्टेसिस वाल्व को 6 Fr MP1 गाइड कैथेटर ( सामग्री की तालिकादेखें) से कनेक्ट करें और हेपरिनाइज्ड खारा के साथ फ्लश करें। जे-टिप गाइडवायर में 260 सेमी 0.035 के साथ गाइड कैथेटर प्रीलोड करें। ऊरु धमनी म्यान के माध्यम से इस विधानसभा का परिचय दें।
नोट: एक मानक क्रॉस-कट हेमोस्टेसिस वाल्व के माध्यम से दो उच्च-निष्ठा दबाव सेंसर (एचएफपीएस) को आगे बढ़ाते समय रक्तस्राव का खतरा हो सकता है। एक वैकल्पिक दृष्टिकोण दो अलग-अलग गाइड कैथेटर का उपयोग कर सकता है, लेकिन इसके लिए दूसरी धमनी पहुंच साइट की आवश्यकता होगी। रक्तस्राव के मुद्दे और अतिरिक्त पहुंच साइटों की आवश्यकता दोनों को संबोधित करने के लिए, कोई भी दोहरी पोर्ट हेमोस्टेसिस वाल्व या स्टार के आकार के हेमोस्टेसिस वाल्व का विकल्प चुन सकता है। ये विकल्प रक्तस्राव की समस्या को हल करते हैं और अतिरिक्त पहुंच बिंदुओं की आवश्यकता को समाप्त करते हैं। एक बार गाइड कैथेटर धमनी म्यान के माध्यम से उन्नत है, यह ध्यान रखना महत्वपूर्ण है कि म्यान के साइड पोर्ट रक्तचाप माप के लिए अनुमति नहीं देगा. रक्तचाप को मापने के लिए, इसके बजाय गाइड कैथेटर के हेमोस्टेसिस वाल्व एडाप्टर के साइड पोर्ट से धमनी रेखा को जोड़ना आवश्यक है। - गाइडवायर को आगे बढ़ाएं और फ्लोरोस्कोपिक मार्गदर्शन के तहत आरोही महाधमनी में कैथेटर का मार्गदर्शन करें। जब महाधमनी वाल्व की पहचान की जाती है, तो ध्यान से इसे गाइडवायर के साथ पार करें, और गाइड कैथेटर को एलवी में पेश करें। यदि आवश्यक हो, तो शारीरिक स्थिति की सुविधा के लिए कंट्रास्ट का उपयोग करें। एलवी स्थिति की पुष्टि करने के लिए दबाव के निशान की जाँच करें।
- LV में गाइड कैथेटर छोड़ते समय गाइडवायर निकालें। महाप्राण के बाद कैथेटर फ्लश करें और सुनिश्चित करें कि कैथेटर में कोई हवाई बुलबुले मौजूद नहीं हैं।
- एलवी में दोहरी हेमोस्टेसिस वाल्व के बंदरगाहों में से एक के माध्यम से पहले से ही कैलिब्रेटेड एचएफपीएस को आगे बढ़ाएं। एक बाँझ कलम के साथ एक निशान कैथेटर शरीर पर रखा जा सकता है यह जानने के लिए जब यह गाइड कैथेटर टिप से बाहर आता है. वैकल्पिक रूप से, एक स्पष्ट वेंट्रिकुलर दबाव संकेत की पुष्टि गाइड कैथेटर से बाहर निकलने का संकेत है (सिग्नल हस्तक्षेप मनाया जाता है जबकि एचएफपीएस गाइड कैथेटर के अंदर है)।
- दोहरी हेमोस्टेसिस वाल्व के दूसरे बंदरगाह के माध्यम से और एलवी में एक दूसरे एचएफपीएस को आगे बढ़ाएं।
- गाइड कैथेटर वापस आरोही महाधमनी में खींचो दूर से रेडियोपैक मार्कर बैंडिंग साइट पर रखा है, जबकि एलवी में एचएफपीएस में से एक छोड़ने. दबाव निशान का उपयोग कैथेटर स्थिति की पुष्टि करें.
नोट: एचएफपीएस को रिकॉर्डिंग सिस्टम से जोड़ा जाना चाहिए और दबाव सेंसर को संतुलित करने की अनुमति देने के लिए उपयोग करने से पहले कम से कम 30 मिनट के लिए बाँझ खारा में रखा जाना चाहिए। गाइड कैथेटर में एचएफपीएस शुरू करने से पहले, सेंसर को बाँझ खारा की सतह पर रखकर दबाव को शून्य करना सुनिश्चित करें। - एक बाँझ कपड़ा के साथ संवहनी पहुंच साइट को कवर करें और महाधमनी को संकुचित करने के लिए वक्ष पर जाएं।
5. आरोही महाधमनी बैंडिंग (कसना)
- नायलॉन बैंड (विकल्प 1) या ePTFE ग्राफ्ट (विकल्प 2) पर थोड़ा खींचें ताकि यह सुनिश्चित हो सके कि एचएफपीएस ठीक से स्थित है - एलवी दबाव ऊपर जाना चाहिए, जबकि बैंडिंग (रेडियोपैक मार्कर) के लिए महाधमनी दबाव डिस्टल नहीं बढ़ना चाहिए।
- यदि कैथेटर पोजिशनिंग गलत है, तो यह सुनिश्चित करने के लिए एचएफपीएस की स्थिति को समायोजित करें कि कसना साइट पर समीपस्थ और डिस्टल दबाव स्पष्ट रूप से दर्ज किया गया है।
- विकल्प 1: नायलॉन बैंड को तब तक बंद करें जब तक कि वह महाधमनी के चारों ओर न घूम जाए।
- दबाव की बारीकी से निगरानी करते हुए एक बार में नायलॉन बैंड एक क्लिक बंद करें। प्रत्येक क्लिक के बाद, दबाव को स्थिर करने की अनुमति दें।
- नायलॉन बैंड को धीरे-धीरे बंद करें जब तक कि वांछित दबाव ढाल तक न पहुंच जाए। लक्ष्य लगभग 100 mmHg का ढाल है, जबकि यह सुनिश्चित करता है कि बाएं वेंट्रिकुलर अंत-डायस्टोलिक दबाव 25 mmHg से अधिक न हो।
नोट: यदि प्राप्त ढाल सिर्फ 100 mmHg (यानी, 90-95 mmHg के बीच) के तहत है, तो नायलॉन बैंड को और कसने से बचना चाहिए। यह महत्वपूर्ण है कि इस स्थिति में अधिक कसना न हो। हालांकि, अगर नायलॉन बैंड गलती से प्रक्रिया के दौरान या स्थिरीकरण के बाद अत्यधिक कड़ा कर दिया है, एक नायलॉन बैंड में कटौती करने के लिए हड्डी कटर ( सामग्री की तालिकादेखें) का उपयोग कर सकते हैं और फिर पिछली प्रक्रियाओं को दोहराने (कदम 3.11 और कदम 5.3) समायोजित और उचित दबाव ढाल प्राप्त करने के लिए. - आसपास की संरचनाओं को किसी भी आकस्मिक क्षति से बचने के लिए नायलॉन बैंड अंत पर बाँझ प्लास्टिक टयूबिंग का एक टुकड़ा रखें.
- विकल्प 2: ePTFE समाप्त होता है अनुमानित और 45 ° संदंश का उपयोग कर बैंड संकुचित, जबकि दबाव की निगरानी, कसना के सापेक्ष स्थान का अनुमान लगाने के लिए.
- संदंश स्थिति पर एक टाइटेनियम हेमोक्लिप रखें (ePTFE भ्रष्टाचार के दो सिरों को क्लैंप करने से उस पर एक निशान छोड़ दिया जाएगा, हेमोक्लिप स्थिति का मार्गदर्शन करने के लिए सेवा करेगा)।
- दबाव ढाल की जाँच करें। यदि ढाल इष्टतम है, तो पिछले हेमोक्लिप को पिछले एक के ठीक ऊपर दूसरा हेमोक्लिप रखकर पिछली हेमोक्लिप स्थिति की पुष्टि करें (इससे कसना नहीं बढ़ेगा लेकिन क्लिप के किसी भी डिस्टल फिसलन से बचा जाएगा)।
- ढाल पर्याप्त नहीं है, (आगे महाधमनी constricting) पिछले क्लिप के नीचे एक अतिरिक्त क्लिप जगह है. ऐसा तब तक करें जब तक ग्रेडिएंट इष्टतम न हो जाए। यदि ग्रेडिएंट बहुत बड़ा है, तो क्लिप को हटाने के लिए क्लिप एप्लायर का उपयोग करें और दूसरे को और अधिक दूर से रखें।
- छाती में बहुत अधिक भ्रष्टाचार सामग्री होने से बचने के लिए ePTFE भ्रष्टाचार के सिरों ट्रिम और एक 5.0 सिवनी का उपयोग महाधमनी के समीपस्थ पक्ष के लिए भ्रष्टाचार सीवन ( सामग्री की तालिकादेखें) भ्रष्टाचार के बाहर का आंदोलन से बचने के लिए.
- दबावों को स्थिर करने के लिए बैंडिंग रखने के बाद 15 मिनट प्रतीक्षा करें और यह निर्धारित करें कि क्या ढाल इष्टतम रहता है या यदि विघटन और तीव्र विफलता स्थापित होगी। यदि हाइपोटेंशन सहज संकल्प के बिना होता है, तो यह बहुत संभावना है कि एलवी विघटित हो रहा है, और बैंडिंग उन्मूलन की आवश्यकता है।
- 3-0 पीडीएस II सिवनी का उपयोग करके पेरीकार्डियम बंद करें (सामग्री की तालिकादेखें)।
- एक छाती नाली रखें और इसे सर्जिकल एस्पिरेटर से कनेक्ट करें। एटेलेक्टैसिस से पीड़ित किसी भी फेफड़े की भर्ती शुरू करने के लिए पीईईपी को 10 सेमीएच2ओ तक बढ़ाएं।
- एक 3-0 PDS द्वितीय सिवनी का उपयोग परतों में छाती की दीवार बंद करें.
- छाती की नाली को हटाते समय अंतिम मांसपेशी सिलाई को बंद करें और वेंटिलेशन के साथ उच्च दबाव के साथ अंत-समाप्ति पर रुक गया (मैन्युअल रूप से 20-30 सेमीएच2ओ तक समायोजित)।
- सामान्य वेंटिलेशन फिर से शुरू करें और आयोडीन-पोविडोन के साथ सर्जिकल घाव को फ्लश करने के बाद एक इंट्राडर्मल पैटर्न के साथ 3-0 पीडीएस II सिवनी का उपयोग करके त्वचा को बंद कर दें।
- माइक्रो-कैथ निकालें ( सामग्री की तालिकादेखें) और प्रक्रिया के दौरान दबाव बहाव के लिए सतह के दबाव की जांच करें।
- गाइड कैथेटर निकालें.
- परिचयकर्ता म्यान निकालें और धमनीशोटनी को बंद करने के लिए मैन्युअल संपीड़न लागू करें। कम से कम 10 मिनट के लिए एक्सेस साइट पर संपीड़न लागू करें। धीरे-धीरे दबाव को हटाकर और रक्तस्राव या हेमेटोमा गठन की अनुपस्थिति की पुष्टि करके हेमोस्टेसिस के लिए साइट का आकलन करें।
- यदि आवश्यक हो तो एक शोषक सिवनी का उपयोग करके पंचर साइट पर एक सिलाई रखें।
नोट: यदि आवश्यक हो, तो इस समय, एक त्वरित ट्रान्सथोरासिक इकोकार्डियोग्राम यह निर्धारित करने में मदद कर सकता है कि क्या हृदय समारोह अच्छा है और महाधमनी दबाव ढाल के अनुमान की अनुमति देता है। जबकि आवश्यक नहीं है (जैसा कि दबाव ढाल को उच्च-निष्ठा दबाव सेंसर के साथ मापा गया था), नैदानिक डेटा के साथ मॉडल की तुलना करने के लिए एक गूंज-व्युत्पन्न ढाल का उपयोग किया जा सकता है। ध्यान दें कि सर्जरी के कारण, छवि गुणवत्ता से समझौता किया जाएगा। - संज्ञाहरण बंद करो और एक बार सहज वेंटिलेशन का पता चला है जानवर extubate. वेंटिलेटर से पशु डिस्कनेक्ट और उचित airflow endotracheal ट्यूब के माध्यम से महसूस किया जाता है और परिधीय ऑक्सीकरण समझौता नहीं किया है कि सुनिश्चित करें.
- यदि आवश्यक हो तो एक गुएडेल को बाहर निकालें और रखें।
- परिधीय नस कैथेटर निकालें.
- ईसीजी/हृदय गति और परिधीय ऑक्सीजनेशन की निगरानी करते हुए कम से कम 15 मिनट के लिए पशु की निगरानी करें।
- स्थिर है, वृद्धि परिवेश के तापमान के साथ एक साफ वसूली कलम के लिए पशु ले. एक पोर्टेबल महत्वपूर्ण संकेत उपकरण का उपयोग करें ( सामग्री की तालिकादेखें) लगातार हृदय गति और संतृप्ति की निगरानी करने के लिए जब तक जानवर चेतना वापस आ जाता है.
- वांछित अवधि के लिए जानवरों का पालन करें और हृदय समारोह निर्धारित करने के लिए transthoracic इकोकार्डियोग्राफी या दबाव मात्रा पाश विश्लेषण प्रदर्शन.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
मॉडल के प्रारंभिक विकास के दौरान, मृत्यु दर लगभग 30% थी, जिसमें बैंडिंग और सर्जिकल जटिलताओं के बाद तीव्र हृदय विफलता से मरने वाले जानवर थे। हालांकि, मॉडल स्थापित होने के बाद, सर्जिकल जटिलताएं कम आम हो गईं, और मृत्यु दर लगभग 15% तक गिर गई। जो दो मौतें हुईं, वे विच्छेदन के दौरान महाधमनी के टूटने के कारण हुईं।
उच्च-निष्ठा दबाव सेंसर का उपयोग उच्च गुणवत्ता वाले दबाव संकेतों (चित्रा 2) को प्राप्त करने में सक्षम बनाता है, जिससे स्टेनोसिस के वास्तविक समय और सटीक अंशांकन की अनुमति मिलती है। यह सुनिश्चित करता है कि सभी संचालित जानवरों को बाएं वेंट्रिकुलर दबाव अधिभार की एक समान डिग्री का अनुभव होता है, जिससे समूह के भीतर परिवर्तनशीलता कम हो जाती है। इसके अलावा, कैथेटर में ही 2.3 एफ शाफ्ट होता है, जिसका बड़े द्रव से भरे कैथेटर की तुलना में प्रवाह बाधा पर न्यूनतम प्रभाव पड़ता है। प्रारंभिक निवेश के बाद, कैथेटर को कई बार पुन: उपयोग किया जा सकता है, और यदि नसबंदी की आवश्यकता होती है, तो एथिलीन ऑक्साइड का उपयोग किया जा सकता है (आमतौर पर अस्पताल में सर्जिकल विभागों के सहयोग से उपलब्ध)।
ट्रांस-स्टेनोटिक ग्रेडिएंट की गणना सॉफ्टवेयर द्वारा वास्तविक समय में की जा सकती है, जो बाएं वेंट्रिकल (समीपस्थ दबाव) और डिस्टल महाधमनी (डिस्टल प्रेशर) के बीच दबाव अंतर को मापता है। प्रत्येक कसना कदम के बीच स्थिरीकरण के कुछ मिनट सुनिश्चित करता है कि बाएं वेंट्रिकल के अनुकूल होने का समय है। वांछित कसना डिग्री का निर्धारण करने के बाद, बैंडिंग डिग्री स्थिर रहता है और पशु (चित्रा 2 ए) मुआवजा दिया जाता है कि सुनिश्चित करने के लिए एक 15 मिनट स्थिरीकरण अवधि लागू किया जाना चाहिए.
यह दृष्टिकोण अन्य पद्धतियों से बेहतर है जो वास्तविक समय में ट्रांस-स्टेनोटिक ढाल को नहीं मापते हैं और सभी जानवरों के बीच समान ढाल होने की एकरूपता दोनों की कमी है (92.3 ± 2.3 मिमीएचजी, माध्य और मानक त्रुटि, क्रमशः, 7 संचालित जानवरों के लिए) और बाएं वेंट्रिकुलर दबावों की कड़ी निगरानी। इसके अतिरिक्त, यह दृष्टिकोण सूअर में ट्रांसथोरासिक इकोकार्डियोग्राफी करने से जुड़ी कठिनाइयों से बचा जाता है, विशेष रूप से वियतनामी पॉटबेलिड सुअर जैसी कुछ नस्लों में, जिसमें अधिक महत्वपूर्ण उरोस्थि होती है।
ट्रान्सथोरासिक इकोकार्डियोग्राफी सर्जरी के तुरंत बाद और अनुवर्ती समय बिंदुओं (चित्रा 3) के दौरान महाधमनी बैंडिंग की पुष्टि कर सकती है। बैंडिंग सर्जरी के परिणामस्वरूप अशांत प्रवाह के साथ महाधमनी का महत्वपूर्ण स्टेनोसिस होता है, जिसे निरंतर तरंग डॉपलर का उपयोग करके गुणात्मक रूप से मूल्यांकन या मात्रा निर्धारित की जा सकती है। चित्रा 2 2 महीने अनुवर्ती इकोकार्डियोग्राफी के प्रतिनिधि छवियों को प्रदर्शित करता है, महत्वपूर्ण महाधमनी स्टेनोसिस (ऊपरी पंक्ति) और बाएं वेंट्रिकुलर गाढ़ा अतिवृद्धि (मध्य और नीचे पंक्तियों) दिखा रहा है। बैंडिंग के दो महीने बाद, जानवर महत्वपूर्ण हृदय अतिवृद्धि विकसित करते हैं। मैक्रोस्कोपिक मूल्यांकन ने बड़े दिल और एक मोटी बाएं वेंट्रिकुलर दीवार (चित्रा 4) का खुलासा किया। दो महीने की अनुवर्ती अवधि इस्तेमाल किए गए जानवरों की वृद्धि दर के आधार पर निर्धारित की गई थी, क्योंकि लंबी अनुवर्ती अवधि के परिणामस्वरूप जानवरों को हमारे बुनियादी ढांचे द्वारा नियंत्रित किया जाना बहुत बड़ा होगा।
चित्रा 1: महाधमनी बैंडिंग प्रोटोकॉल के योजनाबद्ध। 20-25 किलोग्राम नर सूअर प्राप्त करने के बाद, जानवरों को 1 सप्ताह की संगरोध अवधि में प्रस्तुत किया जाता है। प्रक्रिया के दिन, जानवरों को संवेदनाहारी किया जाता है, एलवी और महाधमनी को कैथीटेराइज्ड किया जाता है, और उच्च-निष्ठा दबाव सेंसर लगाए जाते हैं, इसके बाद महाधमनी बैंडिंग और पशु वसूली होती है। पूरी प्रक्रिया, एक बार महारत हासिल करने के बाद, लगभग 2 घंटे तक चलती है। सर्जरी के दो महीने बाद, जानवरों को एक टर्मिनल मूल्यांकन के लिए प्रस्तुत किया जाता है, जिसमें नमूनों का संग्रह और शारीरिक चर का माप शामिल है। एबी-महाधमनी बैंडिंग, एओ-महाधमनी, एलवी-बाएं वेंट्रिकल, पीवी-दबाव-मात्रा, आरएचसी-दाएं हृदय कैथीटेराइजेशन, यूएस-अल्ट्रासाउंड। कृपया इस चित्र का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.
चित्रा 2: महाधमनी बैंडिंग के दौरान दबाव माप। (ए) महाधमनी बैंडिंग के दौरान एलवी और महाधमनी (बैंडिंग के लिए डिस्टल) दबाव के प्रतिनिधि निशान। एलवी और महाधमनी दबाव से पहले (बी) और बाद में (सी) कसना पर ज़ूम, ढाल निर्माण (शिखर सिस्टोलिक एलवी और महाधमनी दबाव के बीच अंतर) दिखा रहा है. (डी) वेंट्रिकुलर प्रेशर सेंसर का पुल-ऑफ, महाधमनी समीपस्थ से बैंडिंग तक बैंडिंग से महाधमनी डिस्टल तक बैंडिंग में संक्रमण। एपी-धमनी दबाव, एलवीपी-बाएं वेंट्रिकल दबाव, एमसी-उच्च-निष्ठा दबाव सेंसर। कृपया इस चित्र का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.
चित्रा 3: ट्रान्सथोरासिक इकोकार्डियोग्राफी। सर्जरी के 2 महीने बाद फॉलो-अप से महाधमनी (काला तीर, ऊपरी पंक्ति) के महत्वपूर्ण स्टेनोसिस का पता चलता है। एलवी अतिवृद्धि स्पष्ट है, दोनों 2 डी (सफेद तीर, मध्य पंक्ति), साथ ही एम-मोड में, जो गाढ़ा अतिवृद्धि (सफेद तीर, नीचे की पंक्ति) को भी प्रदर्शित करता है। ऊर्ध्वाधर बार 3 सेमी से मेल खाती है, और 2 डी पीएसएएक्स छवियों को 15 सेमी की गहराई पर अधिग्रहित किया गया था। कृपया इस चित्र का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.
चित्रा 4: दिल का पोस्टमार्टम मैक्रोस्कोपिक विश्लेषण। महाधमनी बैंडिंग कार्डियोमेगाली की ओर जाता है, जिसमें एलवी दीवार की स्पष्ट अतिवृद्धि होती है। हार्ट स्लाइस बेस, मिड-कैविटी और बाएं से दाएं एपेक्स होते हैं। पेरिकार्डियल आसंजन पूरे एपिकार्डियम में देखे जा सकते हैं। स्केल बार 1 सेमी (ऊपरी पंक्ति) और 4 सेमी (निचली पंक्ति) का प्रतिनिधित्व करते हैं। कृपया इस चित्र का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
हाल के वर्षों में, कई अध्ययनों ने सर्जिकल महाधमनी बैंडिंग का उपयोग बाएं वेंट्रिकुलर दबाव अधिभार और दिल की विफलता (9 से आरोही महाधमनी10 पर उतरते हुए) के लिए एक मॉडल के रूप में किया है, जिससे शोधकर्ताओं को उनकी विशिष्ट आवश्यकताओं के अनुरूप विभिन्न फेनोटाइप प्राप्त करने की अनुमति मिलती है। हालांकि ऐसे मॉडलों का उपयोग करने के लिए महंगे उपकरण और विशेष ज्ञान की आवश्यकता होती है, लेकिन वे जो जानकारी प्रदान करते हैं वह अमूल्य है। सूअर, अपने आकार और मानव हृदय की समानता के कारण, एक आदर्श मॉडल11 के रूप में कार्य करता है, जो ज़ेनोट्रांसप्लांटेशन के लिए अंग दाताओं के रूप में नैतिक स्वीकृति प्राप्त करता है।
इस पद्धति में मुख्य महत्वपूर्ण कदम महाधमनी का विच्छेदन और इसके चारों ओर बैंडिंग सामग्री (नायलॉन केबल या ePTFE ग्राफ्ट) की नियुक्ति है। इस चरण के दौरान, कई जटिलताएं हो सकती हैं, जिनमें आसपास की संरचनाओं या महाधमनी का टूटना या टूटना शामिल है। इस तरह की जटिलताओं को नियंत्रित करने के लिए छेद पर गिरवी के साथ एक पीछा-स्ट्रिंग सिवनी या एक गद्दा सिवनी रखकर प्राप्त किया जा सकता है यदि घाव को ठीक से देखने के लिए रक्तस्राव को नियंत्रित किया जा सकता है। कार्डियोथोरेसिक सर्जन द्वारा की जाने वाली प्रक्रिया की दृढ़ता से सिफारिश की जाती है, जो जटिलता और मृत्यु दर को काफी कम कर देती है।
एक और महत्वपूर्ण कदम महाधमनी का कसना है, जिसे बीच में स्थिरीकरण अवधि के साथ अनुक्रमिक चरणों में किया जाना चाहिए। प्रणालीगत परिधीय दबावों पर पूरा ध्यान देना महत्वपूर्ण है, क्योंकि निरंतर महत्वपूर्ण हाइपोटेंशन (60 मिमीएचजी से नीचे धमनी दबाव) वर्तमान स्टेनोसिस से निपटने में एलवी की अक्षमता के परिणामस्वरूप हो सकता है। यदि हल नहीं किया जाता है, खासकर जब वेंट्रिकुलर दबाव भी गिरना शुरू हो जाता है, तो तीव्र हृदय विफलता से जानवर का नुकसान होगा। नायलॉन केबल या टाइटेनियम क्लिप को हटाना आवश्यक है जब हाइपोटेंशन अनायास हल नहीं होता है।
हालांकि, इस मॉडल की मुख्य सीमा, और कई महाधमनी बैंडिंग मॉडल, कोरोनरी ओस्टिया के सापेक्ष बैंड का स्थान है। सुप्रा-कोरोनरी बैंडिंग प्लेसमेंट पूरी तरह से महाधमनी स्टेनोसिस की नकल नहीं करता है और कोरोनरी परिसंचरण में रक्तचाप में वृद्धि हो सकती है, जो सुरक्षात्मक12 हो सकता है। सीमित साक्ष्य सूअरों13 में उप-कोरोनरी और सुप्रा-कोरोनरी महाधमनी बैंडिंग के बीच कोई अंतर नहीं बताते हैं, यह दर्शाता है कि उप-कोरोनरी बैंडिंग सर्जरी से जुड़ी बढ़ी हुई जटिलताएं सार्थक नहीं हो सकती हैं।
उपयोग किए गए पशु तनाव और अनुवर्ती समय के आधार पर, बैंड आंतरिककरण एक मुद्दा बन सकता है। हालांकि मुख्य रूप से कृन्तकों14 में वर्णित, यह भी सूअरों15 के फुफ्फुसीय धमनी में मनाया गया है. ePTFE ग्राफ्ट सेगमेंट का उपयोग करने से संपर्क क्षेत्र में काफी वृद्धि होती है और बैंड आंतरिककरण की घटना समाप्त हो जाती है। हालांकि, ईपीटीएफई ग्राफ्ट अधिक महंगे हैं, और धीमी गति से बढ़ने वाली नस्लों का उपयोग करते समय, जैसे कि वियतनामी पॉट-बेलिड सुअर, नायलॉन ज़िप संबंधों का उपयोग करते समय बैंड आंतरिककरण कोई मुद्दा नहीं है। शोधकर्ताओं को इस्तेमाल की जाने वाली पशु नस्ल के आधार पर अपना दृष्टिकोण चुनना चाहिए।
तेजी से बढ़ने वाली नस्लों के लिए, जानवरों के आकार (>100 किलोग्राम जानवरों को संभालने के लिए पर्याप्त बुनियादी ढांचे और उपकरणों की उपलब्धता) और निषेधात्मक रखरखाव लागत के कारण दीर्घकालिक अनुवर्ती चुनौतीपूर्ण हो सकता है।
इस मॉडल की एक और सीमा, साथ ही पेरिकार्डियल स्पेस एक्सेस की आवश्यकता वाले सभी मॉडल, सर्जरी के बाद महत्वपूर्ण पेरिकार्डियल आसंजनों की उपस्थिति है। हमारा अनुभव बैंड प्लेसमेंट के बाद पेरिकार्डियल चीरा को बंद करने या बंद न करने के बीच कोई अंतर नहीं दिखाता है। हालांकि यह कार्य को प्रभावित नहीं करता है, हृदय को विच्छेदित करना और विभिन्न संरचनाओं की पहचान करना अधिक समय लेने वाला हो जाता है, और यदि पेरीकार्डियम पूरी तरह से अलग हो जाता है तो एपिकार्डियम क्षतिग्रस्त होने की संभावना है।
यह न्यूनतम इनवेसिव विधि विशिष्ट सर्जिकल प्रक्रिया के एक महत्वपूर्ण शोधन का प्रतिनिधित्व करती है, जिससे एक असमान और तेज वसूली होती है। एक साथ दबाव माप और वास्तविक समय ढाल माप के लिए दो उच्च-निष्ठा कैथेटर का उपयोग प्रक्रिया की सटीकता और मॉडल की प्रजनन क्षमता में काफी सुधार करता है, जिससे आवश्यक जानवरों की संख्या में कमी आती है। मॉडल को बाएं वेंट्रिकुलर हाइपरट्रॉफी के उद्देश्य से नए चिकित्सीय हस्तक्षेप या उपकरणों के अध्ययन के लिए लागू किया जा सकता है, साथ ही बाएं वेंट्रिकुलर दबाव अधिभार से जुड़े नए पैथोफिजियोलॉजिकल तंत्र का निर्धारण भी किया जा सकता है।
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
लेखकों के पास खुलासा करने के लिए कुछ भी नहीं है।
Acknowledgments
इस काम को QREN प्रोजेक्ट 2013/30196, "ला कैक्सा" बैंकिंग फाउंडेशन, Fundação para a Ciência e Tecnologia (FCT) प्रोजेक्ट, LCF/PR/HP17/52190002 के तहत समर्थित और वित्त पोषित किया गया था। जेएस और ईबी को मैरी स्कोलोडोस्का-क्यूरी अनुदान समझौते संख्या 813716 के तहत यूरोपीय संघ के क्षितिज 2020 अनुसंधान और नवाचार कार्यक्रम द्वारा समर्थित किया गया था। PdCM को स्टिचिंग लाइफ साइंसेज हेल्थ (LSH)-TKI प्रोजेक्ट मध्यस्थ (LSHM 21016) द्वारा समर्थित किया गया था।
Materials
Name | Company | Catalog Number | Comments |
3-0 PDS II suture | Ethicon | Z683G | Aorta banding |
5-0 prolene | Ethicon | 7472H | Aorta banding |
ACUSON NX2 Ultrasound System | Siemens | (240)11284381 | Vascular Access and Echocardiography |
Arterial Extension 200 cm | PMH | 303.0666 | Anesthesia Maintenance |
Atlan A300 Ventilator | Draeger | 8621300 | Ventilation |
Bone cutters | Fehling | AMP 367.00 | Aorta banding |
Cefazolin 1000 mg | Labesfal | 100063 | Antibiotic |
Chlorhexidine 4% Wash Solution | AGA | 19110008 | Cleaning |
Doyen Intestinal Forceps | Aesculap | EA121R | Intubation |
Echogenic Introducer Needle | Teleflex | AN-04318 | Vascular Access |
Endotracheal tube | Intersurgical | 8040070 | Intubation |
ePTFE vascular graft (5 mm x 40 cm) | GORE-TEX | S0504 | Aorta banding |
Extension line 100 cm | PMH | 303.0394 | Anesthesia Induction |
F.O. Laryngoscope | Luxamed | E1.317.012 | Intubation |
F.O. Miller Blade 4 204 x 17 mm | Luxamed | 3 | Intubation |
Fenestrated Sterile Drape | Bastos Viegas | 4882-256 | Aseptic Technique |
Fentanyl 0.5 mg/10 mL | B.Braun | 5758883 | Anesthesia / Analgesia |
Guidewire 260 cm J-tip | B.Braun | J3 FC-FS 260-035 | Left Ventricle catheterization |
Infusomat Space Infusion Pump | B.Braun | 24101800 | Fluids / Drug administration |
Intercostal retractor | Fehling Surgical | MRP-1 | Thoracotomy |
Introcan Certo IV Catheter 20G | B.Braun | 4251326 | Fluids / Drug administration |
Isotonic Saline Solution 0.9% | B.Braun | 5/44929/1/0918 | Fluids / Drug administration |
Ketamidor 100 mg/mL | Richter pharma | 1121908AB | Anesthesia Induction |
L10-5v Linear Transducer | Siemens | 11284481 | Vascular Access |
Midazolam 15 mg/3 mL | Labesfal | PLB762-POR/2 | Anesthesia Induction |
Mikro-cath | Millar | 63405(1) | Pressure recording |
MP1 guide catheter 6 Fr | Cordis | 67027000 | Left Ventricle catheterization |
Needle Holder | Fehling Surgical | ZYY-5 | Aorta banding |
Non-woven adhesive | Bastos Viegas | 442-002 | Fluids / Drug administration |
P4-2 Phased Array Transducer | Siemens | 11284467 | Echocardiography |
Perfusor Compact Syringe Perfusion Pump | B.Braun | 8717030 | Fluids / Drug administration |
Pressure Signal Conditioner | ADinstruments | PCU-2000 | Pressure recording |
Propofol Lipuro 2% | B.Braun | 357410 | Anesthesia Maintenance |
Radifocus Introducer II Standard Kit B - Introducer Sheath | Terumo | RS+B60K10MQ | Vascular Access |
Radiopaque marker | Scanlan | 1001-83 | Aorta banding |
Scissors | Fehling Surgical | Thoracotomy | |
Skinprep (Chlorhexidine 2% / 70% Isopropyl alcohol) | Vygon | SKPC015ES | Disinfection |
Stopcock manifold (3 ports) | PMH | 310.0489 | Fluids / Drug administration |
Straight forceps | Fehling Surgical | ZYY-1 | Thoracotomy |
Stresnil 40 mg/mL | ecuphar | 572184.2 | Anesthesia Induction |
Syringe Luer Lock 20 cc | Omnifix B.Braun | 4617207V | Anesthesia Induction |
Syringe Luer Lock 50 cc | Omnifix B.Braun | 4617509F | Anesthesia Maintenance |
Transdermal fentanyl Patch 50 mcg/h | Mylan | 5022153 | Analgesia |
Ultravist | Bayer | KT0B019 | Angiography |
Universal Hemostasis Valve Adapter | Merit Medical | UHVA08 | Left Ventricle catheterization |
Velcro Limb Immobilizer | PMH | SU-211 | Animal stabilization |
Venofix A, 21 G | B.Braun | 4056337 | Anesthesia Induction |
Vista 120S Patient Monitor | Draeger | MS32997 | Monitoring |
Weck titanium clip | Teleflex | 523760 | Aorta banding |
Weck titanium clip applier | Teleflex | 523166 | Aorta banding |
Zhiem Vision | Iberdata | N/A | Fluoroscopy |
References
- Savarese, G., et al. Global burden of heart failure: a comprehensive and updated review of epidemiology. Cardiovascular Research. 118 (17), 3272-3287 (2023).
- Hartley, A., et al. Trends in mortality from aortic stenosis in Europe: 2000-2017. Frontiers in Cardiovascular Medicine. 8, 748137 (2021).
- Silva, K. A. S., Emter, C. A. Large Animal models of heart failure: a translational bridge to clinical success. Journal of the American College of Cardiology: Basic to Translational Science. 5 (8), 840-856 (2020).
- Brink, C. B., Lewis, D. I. The 12 Rs framework as a comprehensive, unifying construct for principles guiding animal research ethics. Animals (Basel). 13 (7), 1128 (2023).
- Choy, J. S., Zhang, Z. D., Pitsillides, K., Sosa, M., Kassab, G. S. Longitudinal hemodynamic measurements in swine heart failure using a fully implantable telemetry system. PLoS One. 9 (8), 103331 (2014).
- Ishikawa, K., et al. Increased stiffness is the major early abnormality in a pig model of severe aortic stenosis and predisposes to congestive heart failure in the absence of systolic dysfunction. Journal of the American Heart Association. 4 (5), 001925 (2015).
- Emter, C. A., Baines, C. P. Low-intensity aerobic interval training attenuates pathological left ventricular remodeling and mitochondrial dysfunction in aortic-banded miniature swine. American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology. 299 (5), H1348-H1356 (2010).
- Brito, J., Raposo, L., Teles, R. C. Invasive assessment of aortic stenosis in contemporary practice. Frontiers in Cardiovascular Medicine. 9, 1007139 (2022).
- Tan, W., et al. A Porcine model of heart failure with preserved ejection fraction induced by chronic pressure overload characterized by cardiac fibrosis and remodeling. Frontiers in Cardiovascular Medicine. 8, 677727 (2021).
- Bikou, O., Miyashita, S., Ishikawa, K. Pig model of increased cardiac afterload induced by ascending aortic banding. Methods in Molecular Biology. 1816, 337-342 (2018).
- Lelovas, P. P., Kostomitsopoulos, N. G., Xanthos, T. T. A comparative anatomic and physiologic overview of the porcine heart. Journal of the American Association for Laboratory Animal Science. 53 (5), 432-438 (2014).
- Tian, L., et al. Supra-coronary aortic banding improves right ventricular function in experimental pulmonary arterial hypertension in rats by increasing systolic right coronary artery perfusion. Acta Physiologica (Oxf). 229 (4), 13483 (2020).
- Sorensen, M., Hasenkam, J. M., Jensen, H., Sloth, E. Subcoronary versus supracoronary aortic stenosis. An experimental evaluation. Journal of Cardiothoracic Surgery. 6, 100 (2011).
- Lygate, C. A., et al. Serial high resolution 3D-MRI after aortic banding in mice: band internalization is a source of variability in the hypertrophic response. Basic Research in Cardiology. 101 (1), 8-16 (2006).
- Jalal, Z., et al. Unexpected Internalization of a Pulmonary Artery Band in a Porcine Model of Tetralogy of Fallot. World Journal for Pediatric and Congenital Heart Surgery. 8 (1), 48-54 (2017).