Alimentation FITC-Dextran : une méthode pour quantifier la perméabilité intestinale chez C. elegans
Published: April 30, 2023
Abstract
Source : Le, T. A. N., et autres. Mesure des effets des bactéries et des produits chimiques sur la perméabilité intestinale de Caenorhabditis elegans. J. Vis. Exp. (2019).
Cette vidéo introduit une méthode de visualisation et de mesure de l’intégrité du lumen intestinal C. elegans en alimentant les vers étiquetés FITC dextran. Le protocole d’exemple montre l’analyse faite avec des vers traités par 3,3′-diindolylmethane (DIM)-traités et pathogènes-alimentés.
Protocol
Ce protocole est un extrait de Le et al, Measuring the Effects of Bacteria and Chemicals on the Intestinal Permeability of Caenorhabditis elegans, J. Vis. Exp. (2019). Préparation des plaques NGM pour tester les effets d’un produit chimique (DIM) sur la permé…
Representative Results
Figure 1 : L’effet du DIM sur la perméabilité intestinale de C. elegans nourri p. aeruginosa. Images de microscopie de vers de (A) E. coli OP50 sans alimentation FITC-dextran, (B) E. coli avec alimentation FITC-dextran, (C) P. aeruginosa</em…
Materials
| 3,3’-diindolylmethane | Sigma | D9568 | |
| 90×15 mm Petri dishes | SPL Life Sciences, South Korea | 10090 | |
| Bactor Agar | Beckton Dickinson | REF. 214010 | |
| Formaldehyde solution | Sigma | F1635 | |
| Caenorhabditis elegans N2 | Caenorhabditis Genetics Center (CGC) | Wild type | |
| Cholesterol | Sigma | C3045 | |
| Costa Assay Plate, 96 Well Black With Clear Flat Bottom Non-treated, No Lid Polystyrene | Corning Incorporated | REF. 3631 | |
| Dimethyl sulfoxide | Sigma | D2650 | |
| Escherichia coli OP50 | Caenorhabditis Genetics Center (CGC) | ||
| Fluorescein isothiocyanate – dextran | Sigma | FD10S | |
| Harmony software | PerkinElmer | verson 3.5 | |
| Magnesium sulfate heptahydrate | Fisher Bioreagents | BP2213-1 | |
| Fluoromount aqueous mounting medium | Sigma | F4680 | |
| Operetta CLS High-Content Analysis System | PerkinElmer | HH16000000 | |
| Peptone | Merck | EMD 1.07213.1000 | |
| Pseudomonas aeruginosa PA01 | Korean Collection for Type Culture | KCTC NO. 1637 | |
| Sodium Chloride | Fisher Bioreagents | BP358-1 | |
| Stereo Microscope | Nikon, Japan | SMZ800N |
Citer Cet Article
FITC-Dextran Feeding: A Method to Quantify Intestinal Permeability in C. elegans. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20167, doi: (2023).