Injeção Intratorácica: Entrega composta ao coração de zebrafish adulto

Abstract

Fonte: Bise, T., et al. Injeção intratorácica para o estudo do coração de zebrafish adulto. J. Vis. Exp. (2019).

Este vídeo descreve a técnica de entregar compostos no coração de zebrafish adulto usando injeção intratorácica.

Protocol

1. Preparação do Peixe para Injeção Intratorácica Pegue um zebrafish adulto (Danio rerio) com uma rede e transfira-o para a solução anestéstica. Depois de 1-2 min, quando o peixe parar de nadar e o movimento do operculum é reduzido, toque o peixe com uma colher de plástico para garantir que ele não reaja a nenhum contato. Transfira o peixe com a colher para o sulco da esponja molhada, com o lado ventral para cima. A cabeça do peixe deve apontar para longe da mão dominan…

Representative Results

Figura 1: Injeção intratorácica (TI) em zebrafish adulto. (A) Fotografia de um capilar de microinjeção puxado com filamento (6″, 1,0 mm de diâmetro) e valores do programa de puxador de agulhas utilizados. (B) Fotografia de uma capilarização de microinjeção puxada com filamento (6″, 1,0 mm de diâmetro) preenchida com 2,5 μL de solução contendo 10% de fenol vermelho. A ponta puxada da agulha tem máxima de 7 m…

Materials

Macroscope (binocular)	M400		with Apozoom
Micro-injector femtojet	Eppendorf	5247 0034 77
Microloaders femtotips	Eppendorf	5242 956.003
Micropipette glass needles type C	WPI	TW100F-6	thin-wall capillary
Micropipette puller model P-87	Flaming/Brown	20081016	filament box 2.5 mm x 4.5 mm
Sponge	any	any	dim. carved sponge 7cm x 3 cm x 1 cm
Tricaine (Anestethic)	Sigma	E10521