Наш протокол описывает, как препарировать крысу брюшной молочной железы и, как готовить молочную железу тотальных. В нем также описывается, как анализировать молочной железы морфологии с помощью трех конечных точек (число почки терминального конца, эпителиальные удлинения и дифференцировки) и использовать эти результаты для прогнозирования риска развития рака молочной у крыс, которые подвергались диетических изменений<em> Внутриутробно</em> Или во время prepuberty.
Исследования грызунов моделях рака молочной показать рака, воздействия диетические / гормональных факторов в течение внутриутробного и пубертатном периодах, когда молочная железа претерпевает обширные моделирования и повторное моделирование, изменяют восприимчивость к канцерогенным вызванных опухолей молочной железы. Аналогичные результаты были описаны у человека: например, высокий вес при рождении увеличивает позже риск развития рака молочной железы, и диетического потребления соевого в детстве снижает риск рака молочной железы. Считается, что эти предродовой и послеродовой диетические изменения вызывают стойкие морфологические изменения в молочной железе, что, в свою очередь изменить риск рака молочной железы в будущем. Эти морфологические изменения вероятно, отражают эпигенетические модификации, такие как изменения в метилирование ДНК, гистонов и микроРНК выражение, то влиять на транскрипцию генов. В этой статье мы расскажем, как изменения в молочной железе морфологии может предсказать риск развития рака молочной у крыс. Наш протокол специально описывает, как вскрыть и удалить крысы брюшной молочной железы и, как готовить молочную железу тотальных. В нем также описывается, как анализировать молочной железы морфологии в соответствии с тремя концами (число почки терминального конца, эпителиальные удлинения и дифференцировки) и использовать эти данные для прогнозирования риска развития рака молочной железы.
Оценка молочной железы морфологических конечных точек и рост эпителиальных дерево может быть использована для прогнозирования того раннего периода жизни диетические манипуляции, или других манипуляций, которые изменяют внутриутробно или препубертатном гормонального фона, изменять позже рак молочной железы и риск. Поскольку рак молочной железы у человека начинается в молочных структур (терминал протоков единиц очаговая, TDLUs), аналогичные TEBS у крыс, эта методика может быть использована для определения потенциального воздействия ранней жизни влияют на риск рака молочной железы. Далее, у женщин высокой маммографической плотности увеличивает риск рака молочной железы в 4-6 раза, а оценка роста молочных эпителиальных дерево может быть использован для определения факторов, которые определяют маммографической плотности и факторов, которые снижают этой плотности. Для получения этой информации, молочная железа должна полностью рассеченные, правильно растягивается на предметное стекло так, чтобы все его компоненты могут быть визуализированы под микроскопом. Кроме того, надлежащее окрашивания кармином и delipidation в ксилоле обеспечит тотальных, которые подходят для молочных оценки риска рака.
The authors have nothing to disclose.
NCI (U54 CA00100970), NCI (1 R03 CA150040-01), ACS (116602-PF-09-018-01-CNE)
Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
---|---|---|---|---|
Glacial acetic acid | EM | AX0073-9 | Carnoy’s Fixative | |
Absolute ethanol | The Waner-Graham Co. | 64-17-5 | Carnoy’s Fixative | |
Carmine | Sigma | C1022 | Carmine solution | |
Aluminum potassium sulfate | Sigma | A7167 | Carmine solution |