הכנת דגם לערער של Epileptogenesis פוסט במכרסמים
Summary
קליפת המוח מבודד חלקית ("לערער") הוא מודל של בעל חיים יעיל epileptogenesis פוסט. כאן אנו מדגימים כיצד להפוך מכשיר כירורגי חדשני להשתמש בו כדי לבצע נגעים מדויקת יותר ועקבית כדי ליצור את המודל הזה.
Abstract
קליפת המוח מבודד חלקית ("לערער") הוא מודל של בעל חיים epileptogenesis פוסט. הליך כירורגי כרוך חיתוך דרך קליפת המוח הסנסורית מתחת החומר הלבן (לערער), כך אזור מסוים בקליפת המוח מבודד במידה רבה בקליפת השכנות ואזורים קורטיקליים 1-3. לאחר ההשהיה של שבועיים או יותר לאחר הניתוח, הפרשות epileptiform יכול להיות מוקלט פרוסות המוח של מכרסמים 1; והתקפים חשמל או התנהגות ניתן להבחין in vivo ממינים אחרים, כגון חתול קוף 4-6. מודל זה מבוסס היטב חיה יעילה כדי ליצור מחקה מאפיינים חשובים של פגיעה מוחית טראומטית. עם זאת, הוא מאתגר מבחינה טכנית מנסה לעשות נגעים קורטיקליים המדויק במוח מכרסם קטן ביד חופשית. על פי הנוהל שנקבע בתחילה באוניברסיטת סטנפורד 1 במעבדה של ד"ר דוד של הנסיך, כאן אנו מציגים טכניקה משופרת לבצע ניתוח להכנת מודל זה עכברים וחולדות. אנו מדגימים כיצד להפוך מכשיר כירורגי פשוט להשתמש בו כדי להשיג שליטה טובה יותר של חיתוך עומק וזווית להפיק תוצאות מדויקות יותר עקבית. המכשיר קל לעשות, ההליך הוא מהיר ללמוד. הדור של מודל זה החי מספק מערכת יעילה ללימוד על המנגנונים של epileptogenesis פוסט.
Protocol
Discussion
המודל לערער היא מערכת היעילה ביותר ללימוד epileptogenesis פוסט. ניתוח טיפוסי לוקח רק כ 20-30 דקות לסיום, והוא עורר או פעילות ספונטנית epileptiform יכול להיות מוקלט פרוסות מרוב חיות שבועיים לאחר הניתוח 1-2. וחשוב יותר, המודל הזה מחקה ההיבטים של השינויים הבאים פגיעה מוחית טראומטי?…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
עבודה זו נתמכה על ידי NIH / NINDS מענק 4R00 NS 057940, ולהעניק SCBI 200-12 מ חוט השדרה פגיעה מוחית מחקר קרן ממדינת אינדיאנה מחלקת הבריאות.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number |
| Foredom micromotor kit | equipment | Foredom | K.1070 |
| 1.5 inch 22-gauge syringe needle | material | BD company | 305156 |
| 1.5 inch 25-gauge syringe needle | material | BD company | 305127 |
| Cyanoacrylate glue | material | Ted Pella | 14450 |
References
- Hoffman, S. N., Salin, P. A., Prince, D. A. Chronic neocortical epileptogenesis in vitro. J Neurophysiol. 71, 1762-1773 (1994).
- Topolnik, L., Steriade, M., Timofeev, I. Hyperexcitability of intact neurons underlies acute development of trauma-related electrographic seizures in cats in vivo. Eur J Neurosci. 18, 486-496 (2003).
- Graber, K., Prince, D. A. . Models of Seizures and Epilepsy. , 477-493 (2005).
- Nita, D. A., Cisse, Y., Timofeev, I., Steriade, M. Increased propensity to seizures after chronic cortical deafferentation in vivo. J Neurophysiol. 95, 902-913 (2006).
- Sharpless, S. K., Halpern, L. M. The electrical excitability of chronically isolated cortex studied by means of permanently implanted electrodes. Electroencephalogr Clin Neurophysiol. 14, 244-255 (1962).
- Echlin, F. A., Battista, A. Epileptiform Seizures from Chronic Isolated Cortex. Arch Neurol. 9, 154-170 (1963).
- Prince, D. A. Epileptogenic neurons and circuits. Adv Neurol. 79, 665-684 (1999).
- Marin-Padilla, M. Developmental neuropathology and impact of perinatal brain damage. II: white matter lesions of the neocortex. J Neuropathol Exp Neurol. 56, 219-235 (1997).
- Jin, X., Prince, D. A., Huguenard, J. R. Enhanced excitatory synaptic connectivity in layer v pyramidal neurons of chronically injured epileptogenic neocortex in rats. J Neurosci. 26, 4891-4900 (2006).
- Li, H., Prince, D. A. Synaptic activity in chronically injured, epileptogenic sensory-motor neocortex. J Neurophysiol. 88, 2-12 (2002).
- Salin, P., Tseng, G. F., Hoffman, S., Parada, I., Prince, D. A. Axonal sprouting in layer V pyramidal neurons of chronically injured cerebral cortex. J Neurosci. 15, 8234-8245 (1995).
- Avramescu, S., Nita, D. A., Timofeev, I. Neocortical post-traumatic epileptogenesis is associated with loss of GABAergic neurons. J Neurotrauma. 26, 799-812 (2009).
- Avramescu, S., Timofeev, I. Synaptic strength modulation after cortical trauma: a role in epileptogenesis. J Neurosci. 28, 6760-6772 (2008).
