التشخيص والتشريح والأنسجة عينة مختارة كوكتيل في الجرذان والفئران
Summary
توضح هذه المقالة كيفية إجراء الفحص بعد الوفاة الأساسية للماوس أو الفئران ، وجمع من الأجهزة الأساسية ، فضلا عن أكثر من أنواع التحدي عينة من أجل التقييم النسيجي ، الميكروبيولوجية ، وPCR.
Abstract
هناك أنواع متعددة العينة التي يمكن جمعها من حيوان الموت الرحيم من أجل المساعدة في تشخيص أو اكتشاف العوامل المعدية في مستعمرة الحيوانات. ويمكن جمع الأنسجة السليمة لمعالجة النسيجي مزيد من التأثير على نوعية نتائج الاختبار. توضح هذه المقالة إجراء الفحص الإجمالي الأساسية بما في ذلك تحديد القلب والكبد والرئتين والكليتين ، والطحال ، وكذلك كيفية جمع تلك الأجهزة. وبالإضافة إلى ذلك أظهرت four التقنيات أكثر صعوبة جمع الأنسجة / العينة. ويمكن جمع نضح الرئة وتكون تحديا من نوع خاص مثل الأنسجة يحتاج إلى مبالغ بشكل صحيح مع مثبت من أجل داخل الأنسجة لإصلاح صحيح وتمكين نسيجية تقييم شامل. هذه المقالة يوضح خطوة خطوة تقنية لإزالة تضخم الرئة وذلك مع مثبت من أجل تحقيق التثبيت الأمثل للنسيج في غضون 24 ساعة. ويمكن جمع الدماغ يمكن أن يكون تحديا بالمثل كما الأنسجة الناعمة وتلف بسهولة. هذه المقالة يوضح خطوة خطوة تقنية لكشف وازالة الدماغ من الجمجمة بأقل ضرر للأنسجة. العقدة الليمفاوية المساريقي هو نوع العينة التي جيدة في الكشف عن العديد من العوامل المعدية والفيروسات المعوية المشتركة لفترات اطول في العقدة الليمفاوية مما هي أنها تسلط في البراز. هذه المقالة يوضح الإجراء خطوة خطوة لتحديد موقع وإزالة جو معقم و مطهر المساريقي العقدة الليمفاوية. أخيرا ، قد يتم تنفيذ وتحديد العوامل المعدية في الجهاز التنفسي عن طريق الثقافة البكتيرية أو اختبار PCR و / أو الأنف القصبي aspirates اتخذت السوائل في التشريح. يصف هذا الإجراء الحصول على العينة وإعداد نضح التنفسية الجرثومية للثقافة واختبار PCR.
Protocol
Discussion
قد جمع البيانات في نهاية الدراسة تتطلب الفحص بعد الوفاة من الحيوانات. يصف ما يراه جيدا وتذكر لدراسة جميع الأنسجة. وتهدف هذه الإجراءات بالدرجة الأولى إلى تحسين التشريح وجمع العينات لمراقبة الأمراض المعدية ، ولكن يتم تكييفها بسهولة أكثر لتحقيقات مركزة من حوادث أو مرض …
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Materials
| Reagent name | Company | Catalog number | Comments |
|---|---|---|---|
| Cutting board | Thermo Electron Corp Cat #36114 | Cat #36114 | |
| Small scissors | ROBOZ | RS-5910, G204 | 23mm blades, 3.5″ length, straight |
| Medium scissors | ROBOZ | RS-6808, G207 | 5″ |
| Large scissors | ROBOZ | RS-6826, G65″ | 6.25″ |
| Forceps-Curved | ROBOZ | RS-8254 (M1/21004) | 4.5″, serrated, slight curve |
| Forceps-Microdissecting | ROBOZ | RS-5238 | Hudson-(EWALD) |
| Forceps-Tissue Forceps | ROBOZ | RS–8160 | Rat tooth |
| Flame sterilizer | Oxford Labware Products | Bacti-Cinerator #5889-001007 | |
| Scalpel | Cancer Diagnostics, Inc. | Finger Scalpels #60, Cat#FS0060 | |
| Pipettes | VWR | Pasteur Pipet 5 3/4″, Cat#14672-400 | |
| Autoclave bags | Propper Manufacturing Company | Sterilizer Bag Paper Pouches Cat#021002(3100923)E09110 | For Pasteur pipettes |
| Pipette bulb | VWR | Cat#56310-240 | |
| Eppendorf tubes | Sarstedt | SafeSeal microtube 2mL, Ref#72.695 | |
| Eppendorf tubes | Argos | 5mL microtube Cat#T20765-C | |
| Syringe | BD (Beckton Dickenson) | 1ml-309602 3 ml-300910 5ml-309603 10mL Cat#309604 20mL Cat#309661 | |
| Needles | BD | 26G-309625 18G-305195 | |
| Neutral buffered formalin | VWR | 20L 10% NBF, Cat#16004-128 | |
| Saline | ThermoScientific | Buffered Blood Bank Saline, Cat#23-309-178 | |
| Trypticase soy broth | Becton Dickenson | TSB: Dehydrated, Cat#211825 | |
| Phosphate buffered saline | Sigma Aldrich | HA Buffer, Cat#P3813-10PAK | |
| Formalin cups | VWR | 4oz Cat#36318-852 8oz Cat#36318-860 16oz Cat#36318-858 | |
| Large formalin cups | OakRidge Products | 32oz container Cat#0432-1100 | |
| Extra large formalin cup | VWR | HDPE Multipurpose 160oz container Cat#89038-282 | |
| Suture material | Henry Schein | Braided silk surgical suture, Ref#100-5000, M766750 | For mouse lung inflation |
| Twine | Staples | Cat#QUA-46173 | For rat lung inflation |
References
- AVMA. . AVMA Guidelines on Euthanasia. , (2007).
- Feldman, D. B., Seely, J. C. . Necropsy Guide: Rodents and the rabbit. , (1988).
- King, J. M., Dodd, D. C., Roth, L. . The Necropsy Book. , (2006).
- Kittel, B. Revised guides for organ sampling and trimming in rats and mice–Part 2. A joint publication of the RITA and NACAD groups. Exp Toxicol Pathol. 55, 413-431 (2004).
- Komarek, V., Fox, J. G. Chapter 1. The Mouse in Biomedical Research. , 1-22 (2007).
- Morawietz, G. Revised guides for organ sampling and trimming in rats and mice–Part 3. A joint publication of the RITA and NACAD groups. Exp Toxicol Pathol. 55, 433-449 (2004).
- Popesko, P., Raijtová, V., Horák, J. . Colour Atlas of Anatomy of Small Laboratory Animals. 2, 91-106 (2002).
- Ruehl-Fehlert, C. Revised guides for organ sampling and trimming in rats and mice–part 1. Exp Toxicol Pathol. 55, 91-106 (2003).
