Endothelial कॉलोनी सेल बनाने के प्ररूपी और कार्यात्मक विशेषता मानव नाल गर्भनाल रक्त से व्युत्पन्न
Summary
Endothelial कॉलोनी बनाने कोशिकाओं (ECFCs) मजबूत clonal proliferative संभावित endothelial कोशिकाओं के साथ घूम रहे हैं कि आंतरिक दिखते<em> Vivo में</em> पोत बनाने की क्षमता. प्ररूपी और कार्यात्मक परिणाम endothelial सीबी से प्राप्त कोशिकाओं के लक्षण वर्णन महत्वपूर्ण हैं की पहचान करने के लिए और अलग<em> सदाशयी</em> ECFCs क्षतिग्रस्त ऊतकों की मरम्मत में संभावित नैदानिक आवेदन के लिए है.
Abstract
Angiogenesis, vasculogenesis, और arteriogenesis के माध्यम से नए रक्त वाहिनियों के गठन का पुराना विचार हाल ही में किया गया है 1 समीक्षा. endothelial पूर्वज कोशिकाओं (निर्यात संवर्धन परिषदों) परिसंचारी की उपस्थिति पहले Asahara एट अल द्वारा किए गए वयस्क मानव परिधीय रक्त में पहचान की. 1997 2 संवहनी उत्थान और मरम्मत के लिए नई परिकल्पना और रणनीतियों का एक जलसेक लाने में. निर्यात संवर्धन परिषदों खून परिसंचारी के दुर्लभ लेकिन सामान्य घटक है कि रक्त वाहिनियों के गठन या संवहनी remodeling के साइटों के लिए घर है, और या तो प्रसव के बाद vasculogenesis, angiogenesis, या arteriogenesis मौजूदा पोत 3 कोशिकाओं व्युत्पन्न दीवार के पैराक्राइन उत्तेजना के माध्यम से बड़े पैमाने पर की सुविधा. कोई विशिष्ट एक ईपीसी पहचान के मार्कर की पहचान की गई है, और वर्तमान में इस क्षेत्र की राज्य सहित proangiogenic hematopoietic स्टेम और पूर्वपुस्र्ष कोशिकाओं है कि कई सेल प्रकार को समझने की है, angiogenic कोशिकाओं, Tie2 + monocytes, माइलॉयड पूर्वपुस्र्ष सेल परिसंचारीरास, ट्यूमर जुड़े मैक्रोफेज, और M2 मैक्रोफेज सक्रिय preclinical पशु मॉडल प्रणाली की एक किस्म में और कई रोग 4 राज्यों, 5 में मानव विषयों में angiogenic प्रक्रिया उत्तेजक में भाग लेते हैं. Endothelial कॉलोनी बनाने कोशिकाओं (ECFCs) दुर्लभ परिसंचारी व्यवहार्य endothelial कोशिकाओं को मजबूत clonal proliferative संभावित, द्वितीयक और तृतीयक replating पर क्षमता बनाने कॉलोनी, और प्रत्यारोपण पर vivo वाहिकाओं में immunodeficient 6-8 चूहों में आंतरिक फार्म की क्षमता की विशेषता हैं. जबकि ECFCs सफलतापूर्वक स्वस्थ वयस्क विषयों, स्वस्थ नवजात शिशुओं की नाल गर्भनाल रक्त (सीबी), और कई मानव धमनी और शिरापरक 6-9 वाहिकाओं के पोत दीवार के परिधीय रक्त से अलग किया गया है, सीबी 7 ECFCs की सर्वोच्च आवृत्ति के पास है कि प्रदर्शन सबसे मजबूत clonal proliferative संभावित और vivo में 8, 10-13 में टिकाऊ और कार्यात्मक रक्त वाहिकाओं फार्म. जबकि की व्युत्पत्तिवयस्क परिधीय रक्त से ECFC 15 14, प्रस्तुत किया गया है, यहाँ हम व्युत्पत्ति के लिए तरीके का वर्णन है, क्लोनिंग, विस्तार, और के रूप में मानव नाल की सीबी से ECFCs के vivo लक्षण वर्णन के रूप में अच्छी तरह से इन विट्रो.
Protocol
Discussion
ख्यात endothelial पूर्वज कोशिकाओं के प्ररूपी और कार्यात्मक लक्षण वर्णन सदाशयी ECFCs कि clonally और फिर चढ़ाना serially संस्कृति में सक्षम हैं की पहचान करने के लिए महत्वपूर्ण है और टिकाऊ और कार्यात्मक vivo में प्रत्या?…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
डा. Yoder EndGenitor टेक्नोलॉजीज इंक, सलाहकार और Rimedion टेक्नोलॉजीज इंक, बोर्ड के एक सदस्य के
Materials
| Name of the reagent | Company | Catalogue number |
| Heparin Sodium Injection, USP | APP Pharmaceuticals | 504031 |
| Ficoll-Pague | Amersham Biosciences | 17-1440-03 |
| Mixing cannula | Maersk Medical | 500.11.012 |
| EGM-2 | Lonza | CC-3162 |
| Defined FBS | Hyclone | SH30070.03 |
| TrypLE express | Gibco | 12605 |
| Rat type I collagen | BD Biosciences | 354236 |
| Matrigel | BD Biosciences | 356234 |
| FcR Block | Miltenyi Biotech | 130-059-901 |
| hCD31, FITC conjugated | BD Pharmingen | 555445 |
| hCD45, FITC conjugated | BD Pharmingen | 555482 |
| hCD14, FITC conjugated | BD Pharmingen | 555397 |
| hCD144, PE conjugated | eBioscience | 12-1449-80 |
| hCD146, PE conjugated | BD Pharmingen | 550315 |
| hCD105, PE conjugated | Invitrogen | MHCD10504 |
| Ms IgG1,k antibody, FITC conjugated | BD Pharmingen | 555748 |
| Ms IgG1,k antibody, PE conjugated | BD Pharmingen | 559320 |
| Ms IgG2a,k antibody, FITC conjugated | BD Pharmingen | 555573 |
| Anti-human CD31 | Dako | clone JC70/A |
| Anti-mouse CD31 | BD Pharmingen | 553370 |
| 0.22-μm vacuum filtration system | Millipore | SCGPU05RE |
| Glacial acetic acid, 17.4N | Fisher | A38-500 |
| Antibiotic-Antimycotic | Invitrogen | 15240-062 |
| Fetal bovine serum (FBS) | Hyclone | SH30070.03 |
| IHC Zinc Fixative | BD Biosciences | 550523 |
| Sytox green reagent | Invitrogen | S33025 |
| Cloning cylinders, sterile | Fisher Scientific | 07-907-10 |
References
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