Использование животных Модель Сепсис для оценки Роман травяной терапии
Summary
Сепсис относится к синдрома системного воспалительного ответа в результате микробной инфекции, и могут быть смоделированы с помощью хирургической техникой слепой кишки называется перевязка и прокол (CLP). Здесь мы опишем метод использовать CLP-индуцированной животной модели для скрининга лекарственных трав для терапевтических агентов.
Abstract
Сепсис относится к синдрома системного воспалительного ответа в результате микробной инфекции. Это было обычно моделируются на животных несколько методов, в том числе вливания экзогенного бактериального токсина (эндотоксемии) или бактерии (бактериемия), а также хирургическое перфорация слепой от слепой кишки перевязки и пункции (CLP) 1-3. CLP позволяет бактериям и разлива фекальных загрязнений в брюшную полость, имитируя человеческий клинической болезни перфорированный аппендицит или дивертикулит. Тяжесть сепсиса, как это отражено в возможной смертности, можно контролировать хирургическим путем изменения размера иглы для прокола слепой кишки 2. У животных, CLP вызывает подобное, двухфазный гемодинамики сердечно-сосудистой системы, метаболических и иммунологических реакций, как наблюдалось в течение клинического течения сепсиса человека 3. Таким образом, модель CLP считается одним из наиболее клинически значимых моделей для экспериментального сепсиса 1-3. </ P>
Различные модели животных были использованы для выяснения сложных механизмов, лежащих в основе патогенеза экспериментального сепсиса. Смертельным следствием сепсиса связано отчасти с чрезмерным накоплением ранних цитокинов (таких как ФНО, ИЛ-1 и ИФН-γ) 4-6 и поздно провоспалительных медиаторов (например, HMGB1) 7. По сравнению с ранними провоспалительных цитокинов, в конце действия посредники имеют более широкое терапевтическое окно для клинического применения. Например, задержка администрации HMGB1-нейтрализующих антител начинается через 24 часа после CLP-прежнему спасли мышей от летальность 8,9, создание HMGB1 в конце посредником летальный сепсис. Открытие HMGB1 в конце действия посредника инициировал новое поле исследований для развития сепсиса терапии с использованием традиционной китайской травяной медицины. В этой статье мы опишем процедуру CLP-индуцированной сепсисом, и его использование при проверке лекарственных трав для HMGB1-планирование лечения.
Protocol
Discussion
В лаборатории несколько животных моделях сепсиса были использованы для понимания патогенеза сепсиса, для того, чтобы развивать потенциал терапии романа. Их клиническое значение остается предметом дискуссий до успешного воплощения в исследованиях на животных в клинической практике ?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Эта работа была поддержана грантами от Национального института здравоохранения, Национальный институт общей медицинских наук (R01GM063075) и Национального центра дополнительной и альтернативной медицины (R01AT05076).
Materials
| Name of the reagent | Company | Catalogue number |
| Betadine | Purdue Products L.P. | 25655-41-8 |
| imipenem | Merck & Co., Inc. | 9882821 |
| Ketamine HCl | Hospira Inc. | RL-0065 |
| Xylazine | Lloyd Laboratories | 4821 |
| Autoclip | Becton Dickinson | 427631 |
| 4-0 silk suture | Roboz | SUT-15-2 |
| Surflo I.V. Catheter | Terumo | SR*OX2419CA |
| RayBio mouse cytokine antibody array | RayBiotech, Inc. | AAM-CYT-3 |
| Thioglycollate | Becton Dickinson | 211716 |
References
- Wichterman, K. A., Baue, A. E., Chaudry, I. H. Sepsis and septic shock–a review of laboratory models and a proposal. J. Surg. Res. 29, 189-201 (1980).
- Baker, C. C., Chaudry, I. H., Gaines, H. O., Baue, A. E. Evaluation of factors affecting mortality rate after sepsis in a murine cecal ligation and puncture model. Surgery. 94, 331-335 (1983).
- Hubbard, W. J. Cecal ligation and puncture. Shock. 24, 52-57 (2005).
- Akira, S., Takeda, K. Toll-like receptor signalling. Nat. Rev. Immunol. 4, 499-511 (2004).
- Baggiolini, M., Loetscher, P. Chemokines in inflammation and immunity. Immunol. Today. 21, 418-420 (2000).
- Balkwill, F. Cytokines–soluble factors in immune responses. Curr. Opin. Immunol. 1, 241-249 (1988).
- Wang, H. HMG-1 as a late mediator of endotoxin lethality in mice. Science. 285, 248-251 (1999).
- Yang, H. Reversing established sepsis with antagonists of endogenous high-mobility group box 1. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 101, 296-301 (2004).
- Qin, S. Role of HMGB1 in apoptosis-mediated sepsis lethality. J. Exp. Med. 203, 1637-1642 (2006).
- Ray, A., Dittel, B. N. Isolation of Mouse Peritoneal Cavity Cells. J. Vis. Exp. (35), e1488 (2010).
- Rendon-Mitchell, B. IFN-gamma Induces High Mobility Group Box 1 Protein Release Partly Through a TNF-Dependent Mechanism. J. Immunol. 170, 3890-3897 (2003).
- Li, W. A Major Ingredient of Green Tea Rescues Mice from Lethal Sepsis Partly by Inhibiting HMGB1. PLoS ONE. 2, e1153 (2007).
- Osuchowski, M. F., Welch, K., Siddiqui, J., Remick, D. G. Circulating cytokine/inhibitor profiles reshape the understanding of the SIRS/CARS continuum in sepsis and predict mortality. J. Immunol. 177, 1967-1974 (2006).
- Heuer, J. G. Evaluation of protein C and other biomarkers as predictors of mortality in a rat cecal ligation and puncture model of sepsis. Crit. Care. Med. 32, 1570-1578 (2004).
- Bozza, F. A. Cytokine profiles as markers of disease severity in sepsis: a multiplex analysis. Crit. Care. 11, R49 (2007).
- Li, W. EGCG stimulates autophagy and reduces cytoplasmic HMGB1 levels in endotoxin-stimulated macrophages. Biochem. Pharmacol. 81, 1152-1163 (2011).
- Beutler, B., Milsark, I. W., Cerami, A. C. Passive immunization against cachectin/tumor necrosis factor protects mice from lethal effect of endotoxin. Science. 229, 869-871 (1985).
- Tracey, K. J. Anti-cachectin/TNF monoclonal antibodies prevent septic shock during lethal bacteraemia. Nature. 330, 662-664 (1987).
- Eskandari, M. K. Anti-tumor necrosis factor antibody therapy fails to prevent lethality after cecal ligation and puncture or endotoxemia. J. Immunol. 148, 2724-2730 (1992).
- Ziegler, E. J. Treatment of gram-negative bacteremia and septic shock with HA-1A human monoclonal antibody against endotoxin. A randomized, double-blind, placebo-controlled trial. The HA-1A Sepsis Study Group. N. Engl. J. Med. 324, 429-436 (1991).
- Ziegler, E. J. Treatment of gram-negative bacteremia and shock with human antiserum to a mutant Escherichia coli. N. Engl. J. Med. 307, 1225-1230 (1982).
- Abraham, E. Efficacy and safety of monoclonal antibody to human tumor necrosis factor alpha in patients with sepsis syndrome. A randomized, controlled, double-blind, multicenter clinical trial. TNF-alpha MAb Sepsis Study Group. JAMA. 273, 934-941 (1995).
- Cohen, J. Adjunctive therapy in sepsis: a critical analysis of the clinical trial programme. Br. Med. Bull. 55, 212-225 (1999).
- Dellinger, R. P. Surviving Sepsis Campaign: international guidelines for management of severe sepsis and septic shock: 2008. Crit. Care Med. 36, 296-327 (2008).
- Wang, H., Zhu, S., Zhou, R., Li, W., Sama, A. E. Therapeutic potential of HMGB1-targeting agents in sepsis. Expert. Rev. Mol. Med. 10, e32 (2008).
- Wang, H. The aqueous extract of a popular herbal nutrient supplement, Angelica sinensis, protects mice against lethal endotoxemia and sepsis. J. Nutr. 136, 360-365 (2006).
- Li, W. A cardiovascular drug rescues mice from lethal sepsis by selectively attenuating a late-acting proinflammatory mediator, high mobility group box 1. J. Immunol. 178, 3856-3864 (2007).
- Fukuyama, M. Mixed bacterial infection model of sepsis in rabbits and its application to evaluate superantigen-adsorbing device. Blood Purif. 23, 119-127 (2005).
