Basınç kasılmaların kâğıda çizilmesi kullanarak Murine Direnç Arter Fonksiyon değerlendirilmesi
Summary
Basınç kasılmaların kâğıda çizilmesi olarak, bir geminin bir sağlam küçük bir bölümü iki küçük kanüller üzerine monte edilir ve uygun bir lümen basınca basınçlandırılmıştır. Burada, fare 3 vasorelaxation tepki ölçmek için yöntem tarif<sup> Rd</supC57 ve sGCα olarak> için mezenterik arterler<sub> 1</sub<sup> – / -</sup> Basıncı kasılmaların kâğıda çizilmesi kullanarak fareler.
Abstract
Basınç myograph sistemleri, küçük arterlerin fonksiyonel değerlendirilmesinde zarif yararlıdır uygun bir transmural basınç basınç uygulanır. Basıncı kasılmaların kâğıda çizilmesi elde Yakın fizyolojik durum vasküler yatağın in vivo davranış için çıkarım olabilir farmakolojik ve fizyolojik uyaranlara, içsel yanıtları derinlemesine karakterizasyonu izin verir. Basınç myograph geleneksel tel myographs üzerinde birçok avantajı vardır. Örneğin, küçük direnç damarları sıkı kontrol ve fizyolojik ilgili lümen içi basınçta incelenebilir. Burada, asetilkolin yanıt olarak vazo-dinlenmek için fenilefrin ile preconstricted 3. amacıyla mezenterik arter (uzun 3-4 mm),, kabiliyeti çalışma. Mezenterik arter 60 mmHg'lik sabit bir basınçta muhafaza edilen bir basınçlı ve kapalı sistem bağlı iki kanül üzerine monte edilmiştir. Damar lümeni ve dış çapı vardır continuousinsi sırasıyla, fenilefrin ve asetilkolin yanıt olarak vazokonstriksiyon ve vasorelaxation gerçek zamanlı kantitatif sağlayan bir video kamera kullanılarak kaydedildi.
Kardiyovasküler hastalık etiyolojisinde çalışma basıncı kasılmaların kâğıda çizilmesi uygulanabilirliğini göstermek için, sistemik hipertansiyon bir fare modelinde endotel bağımlı vasküler fonksiyonu değerlendirildi. Çözünebilir guanilat siklaz (- / – sGCα 1) arasında α alt birimi 1 eksikliği farenin zaman 129S6 (S6), arka plan (sGCα -/-S6 1) üzerine, hipertansiyon, ancak zaman bir C57BL / 6 (B6), arka (sGCα üzerine 1 -/-B6). Basıncı kasılmaların kâğıda çizilmesi kullanarak, göstermektedir ki engelli endotel bağımlı vasorelaxation in sGCα 1-eksikliği sonuçları. Vasküler disfonksiyon sGCα 1 daha sGCα 1 -/-S6 daha belirgindir -/-B6 fareler, muhtemelen katkınınsGCα 1 -/-B6 farelerde daha sGCα 1 -/-S6 en yüksek kan basıncına ng.
Basınç kasılmaların kâğıda çizilmesi böylece kalp-damar hastalığı altında yatan mekanizmaları içine bizim fikir artırmada, damar kasılma ve gevşeme çeşitli uyaranların etkisini değerlendirmek için kullanılabilecek nispeten basit, ama hassas ve mekanik olarak yararlı bir tekniktir.
Introduction
Basınç myograph sistemleri küçük arterler, damarlar ve diğer gemilerin fizyolojik fonksiyonu ve özellikleri ölçmek için kullanılır. Bir damar veya damar bozulmamış bir küçük bir kısmı, iki küçük cam kanül üzerine monte edilmiş ve kabın in vivo özellikleri (Şekiller 1 ve 2) 'deki en korumasına izin verir, uygun bir lümen basınca kadar basınçlı hale getirilir. Bir basınç myograph yakın fizyolojik durumu izole damarlarının yapısal özellikleri (örneğin miyojenik sesi) soruşturma izin, vasküler yatağın in vivo davranış yansıtır. Kas kasılması bir güç dönüştürücü 1 doğrudan mekanik bağlantı ile değerlendirilir tel kasılmaların kâğıda çizilmesi, üzerinde baskı kasılmaların kâğıda çizilmesi avantajlarından bazıları, ise damar sisteminde geliştirilen genel direnci tanımlamak mikro direnci arterler, okudu olabilir (i) tel Myograph büyük boru damar sertliği, (ii) t sınırlıdırhiçbir teller (iii) geminin doğal şekline daha iyi muhafaza edilmesi, damar lümene gereken beri endotel zarar şapka riski azalır, ve (iv) bu gemi boyutu geniş bir de incelenebilir baskılar veya kayma gerilmesi 2.
Küçük damarların incelenmesi hipertansiyon gibi kardiyovasküler hastalıklarda değişmiş vasküler sesi katkıda patofizyolojisi ve moleküler mekanizmaları anlamak için daha büyük kanal arterler okuyan daha bilgilendirici olabilir. Örneğin, 8 hafta boyunca fareler yüksek yağlı diyet beslenme ile ilişkili endotelyal fonksiyon bozukluğu ancak aort halkaları 2. dereceden mezenterik arterler 3 (Şekil 3) gösterilmiştir olabilir. Basınç kasılmaların kâğıda çizilmesi başka bir avantajı da, basınçlı kabın iç miyojenik daralma mevcut olmasıdır, ve bu olay da endotele rolü ve fonksiyonu incelenmiştir edilebilir. Burada, Descrengelli nitrik oksit (NO)-cGMP sinyal bir ortamda fare mezenterik 3. amacıyla direnci arterlerin vasküler reaktivite incelemek için bir basınç myograph bir kullanımı IBE.
Protocol
Representative Results
Discussion
Fare kısmen çünkü böylece insan patofizyolojisi için fare modelleri üreten genetik değişiklikler, tanıtmak olasılığı, birçok araştırmacı için tercih edilen deneysel model vardır. Vazoaktif küçük direnç durumu değil, büyük boru gemilerin büyük ölçüde damar sistemi 11 boyunca kan akışının düzenlenmesi tanımlar. Fare gibi küçük hayvanlar, direnç damar boyutu mikrovasküler fonksiyonunu incelemek için bir tel myograph en kullanılmasını önler. Basınç myographs yaln?…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Yazarlar Dr kabul etmek istiyorum. DMT basınç myograph ve Dr kullanımı için Paul Huang ve Dmitriy Atochin. Yüksek yağlı diyet ya da standart diyetle beslenen fareler sağlamak için Binglan Yu ve Chong Lei.
FİNANSMAN KAYNAĞI
Bu çalışma Harvard Tıp Fakültesi (ES Buys) den Tıp Alimler için Bilim Geliştirme Amerikan Kalp Derneği (ES Buys) Grant 10SDG2610313, ve Eleanor ve Miles Shore 50. Yıl Bursu programı tarafından desteklenmiştir.
Materials
| Name | Company | Cataloge No. |
| NaCl | Fisher Scientific | BP358 |
| CaCl2 (2H2O) | Fisher Scientific | C79-500 |
| KCl | Sigma | P9333 |
| MgSO4 | Fisher Scientific | M65-500 |
| KH2PO4 | Sigma | P3786 |
| NaHCO3 | Fisher Scientific | BP328 |
| NaOH | Fisher Scientific | S318 |
| D-Glucose | Sigma | G8270 |
| EDTA | Fisher Scientific | BP121 |
| HEPES | Sigma | H3375 |
| Phenylephrine | Acros Organics | AC20724 |
| Acetylcholine | Sigma | A6625 |
| Pressure Myograph System | DMT |
References
- Bridges, L. E., Williams, C. L., Pointer, M. A., Awumey, E. M. Mesenteric artery contraction and relaxation studies using automated wire myography. J. Vis .Exp. (55), e3119 (2011).
- Arribas, S. M., Daly, C. J., McGrath, I. C. Measurements of vascular remodeling by confocal microscopy. Methods Enzymol. 307, 246-273 (1999).
- Lei, C., Yu, B., et al. Inhaled Nitric Oxide Attenuates the Adverse Effects of Transfusing Stored Syngeneic Erythrocytes in Mice with Endothelial Dysfunction after Hemorrhagic Shock. Anesthesiology. , (2012).
- Buys, E. S., Cauwels, A., et al. sGCα1β1 attenuates cardiac dysfunction and mortality in murine inflammatory shock models. Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 297 (2), H654-H663 (2009).
- Buys, E. S., Sips, P., et al. Gender-specific hypertension and responsiveness to nitric oxide in sGCα1 knockout mice. Cardiovasc. Res. 79 (1), 179-186 (2008).
- Panza, J. A., Quyyumi, A. A., Brush, J. E., Epstein, S. E. Abnormal endothelium-dependent vascular relaxation in patients with essential hypertension. N. Engl. J. Med. 323 (1), 22-27 (1990).
- Huang, P. L., Huang, Z., et al. Hypertension in mice lacking the gene for endothelial nitric oxide synthase. Nature. 377 (6546), 239-242 (1995).
- Friebe, A., Koesling, D. The function of NO-sensitive guanylyl cyclase: what we can learn from genetic mouse models. Nitric Oxide. 21 (3-4), 149-156 (2009).
- Ehret, G. B., Munroe, P. B., et al. Genetic variants in novel pathways influence blood pressure and cardiovascular disease risk. Nature. 478 (7367), 103-109 (2011).
- Buys, E. S., Raher, M. J., et al. Genetic modifiers of hypertension in soluble guanylate cyclase alpha1-deficient mice. J. Clin. Invest. 122 (6), 2316-2325 (2012).
- Kauffenstein, G., Laher, I., Matrougui, K., Guerineau, N. C., Henrion, D. Emerging role of G protein-coupled receptors in microvascular myogenic tone. Cardiovascular Research. 95 (2), 223-232 (2012).
- Ruilope, L. M. Hypertension in 2010: Blood pressure and the kidney. Nat. Rev. Nephrol. 7 (2), 73-74 (2011).
- Michael, S. K., Surks, H. K., et al. High blood pressure arising from a defect in vascular function. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 105 (18), 6702-6707 (2008).
- Mendelsohn, M. E. In hypertension, the kidney is not always the heart of the matter. J. Clin. Invest. 115 (4), 840-844 (2005).
