I tryk myography er en intakt lille segment af et fartøj monteret på to små kanyler og presset til at et passende luminale pres. Her beskriver vi den metode til at måle vasorelaksation reaktion af musen 3<sup> Rd</sup> Bestil mesenteriale arterier i C57 og sGCα<sub> 1</sub<sup> – / -</sup> Mus ved anvendelse pres myography.
Pres myograph systemer er udsøgt nyttige i funktionel vurdering af små arterier, tryk til et passende transmural pres. Den næsten fysiologisk tilstand opnået i tryk myography tillader dybdegående karakterisering af iboende reaktioner på farmakologiske og fysiologiske stimuli, der kan ekstrapoleres til in vivo-opførsel i karbanen. Pressure myograph har flere fordele i forhold til konventionelle wire myographs. For eksempel kan mindre modstand fartøjer studeret på tæt kontrollerede og fysiologisk relevant intraluminale pres. Her studerer vi muligheden for 3. ordens mesenteriale arterier (3-4 mm lang), preconstricted med phenylephrin, til vaso-slappe af i respons på acetylcholin. Mesenteriske arterier er monteret på to kanyler forbundet til en tryksat og lukket system, der holdes ved konstant tryk på 60 mmHg. Lumen og ydre diameter af karret er continuouSly optaget med et videokamera, så tidstro kvantificering af vasokonstriktion og vasorelaksation i respons på phenylephrin og acetylcholin, hhv.
For at demonstrere anvendeligheden af pres myography at studere ætiologien af hjertekarsygdomme, vi vurderede endotel-afhængig vaskulære funktion i en murin model af systemisk hypertension. Mus, der mangler den α 1-underenheden af opløselig guanylatcyclase (sGCα 1 – / -) er hypertensive når på en 129S6 (S6) baggrund (sGCα 1 -/-S6), men ikke når på en C57BL / 6 (B6) baggrund (sGCα 1 -/-B6). Brug pres myography, vi viser, at sGCα 1-mangel resulterer i nedsat endotel-afhængig vasorelaksation. Det vaskulære dysfunktion er mere udtalt i sGCα 1 -/-S6 end i sGCα 1 -/-B6 mus, sandsynligvis BIDRAGng til højere blodtryk i sGCα 1 -/-S6 end i sGCα 1 -/-B6 mus.
Tryk myography er en relativt enkel, men følsom og mekanistisk nyttig teknik, som kan anvendes til at vurdere virkningen af forskellige stimuli på vaskulær sammentrækning og afslapning, derved forstærke vores indsigt i mekanismerne bag hjertekarsygdomme.
Pres myograph systemer anvendes til at måle den fysiologiske funktion og egenskaber af små arterier, vener og andre fartøjer. En intakt lille segment af en arterie eller vene er monteret på to små glas kanyler og tryk på en passende luminale tryk, hvormed beholderen at fastholde det meste af dens in vivo egenskaber (figur 1 og 2). Den næsten fysiologisk tilstand i et tryk myograph afspejler in vivo-opførsel i karbanen, så undersøgelsen af stoffets egenskaber (f.eks myogenic tone) i isolerede fartøjer. Nogle af fordelene ved tryk myography løbet wire myography, hvor muskelsammentrækning vurderes ved direkte mekanisk kobling til en krafttransducer 1, omfatter (i) at mikro modstand arterier, som definerer den overordnede modstand udviklet i karsystemet, kan studeres, mens tråd myograph er begrænset til større conduit arterier, (ii) that risikoen for skade endotelet er reduceret, da ingen ledninger skal føres gennem karlysningen, (iii) at den naturlige form af fartøjet bedre opretholdes, og (iv) at fartøjet dimension kan studeres på en bred vifte af pres eller shear stress 2.
Studere mikro skibe kan være mere informative end at studere større conduit arterier hjælp til at forstå patofysiologien og molekylære mekanismer, der bidrager til ændret vaskulær tone i hjerte-kar-sygdomme som forhøjet blodtryk. For eksempel kunne svækkelse af endotel funktion er forbundet med fodring mus en kost med højt fedtindhold i 8 uger påvises i 2 nd-order mesenteriske arterier 3 men ikke i aortaringe (figur 3). En anden fordel ved tryk myography er, at iboende myogenic konstriktion af trykbeholderen er til stede, og at rollen og funktionen af endothelium i dette fænomen kan studeres. Her har vi DescrIBE anvendelse af et tryk myograph at studere vaskulær reaktivitet af mus mesenteriske 3. solgte modstandskar i en indstilling af nedsat nitrogenoxid (NO)-cGMP signalering.
Mus er den eksperimentelle model valg for mange efterforskere, dels på grund af muligheden for at indføre genetiske modifikationer og derved skabe musemodeller for menneskers patofysiologi. Den vasoaktivt status små modstand, men ikke af større conduit fartøjer stort set definerer reguleringen af blodgennemstrømningen i hele karsystemet 11.. Størrelsen af modstandskar i små dyr, såsom mus, forhindrer brugen af en wire myograph at studere mikrovaskulær funktion. Pres myographs ikke kun ov…
The authors have nothing to disclose.
Forfatterne vil gerne anerkende Drs. Paul Huang og Dmitriy Atochin for brug af DMT pres myograph og Drs. Binglan Yu og Chong Lei for at give mus fodret med højt fedtindhold kost eller en standard kost.
Finansieringskilde
Dette arbejde blev støttet af Scientist Development Grant 10SDG2610313 fra American Heart Association (ES Buys) og en Eleanor og Miles Shore 50 års jubilæum Fellowship program for Scholars i Medicine fra Harvard Medical School (ES Buys).
Name | Company | Cataloge No. |
NaCl | Fisher Scientific | BP358 |
CaCl2 (2H2O) | Fisher Scientific | C79-500 |
KCl | Sigma | P9333 |
MgSO4 | Fisher Scientific | M65-500 |
KH2PO4 | Sigma | P3786 |
NaHCO3 | Fisher Scientific | BP328 |
NaOH | Fisher Scientific | S318 |
D-Glucose | Sigma | G8270 |
EDTA | Fisher Scientific | BP121 |
HEPES | Sigma | H3375 |
Phenylephrine | Acros Organics | AC20724 |
Acetylcholine | Sigma | A6625 |
Pressure Myograph System | DMT |