दबाव Myography का प्रयोग Murine प्रतिरोध धमनी समारोह का आकलन
Summary
दबाव myography में, एक जहाज के एक अक्षुण्ण छोटे खंड दो छोटे cannulas पर मुहिम शुरू की है और एक उपयुक्त luminal दबाव के लिए दबाव डाला. यहाँ, हम माउस 3 की vasorelaxation प्रतिक्रिया को मापने की विधि का वर्णन<sup> तीसरी</supC57 और sGCα में> आदेश mesenteric धमनियों<sub> 1</sub<sup> – / -</sup> दबाव myography उपयोग कर चूहों.
Abstract
दबाव myograph प्रणाली, छोटी धमनियों के कार्यात्मक मूल्यांकन में नजाकत से उपयोगी होते हैं एक उपयुक्त transmural दबाव के लिए दबाव डाला. दबाव myography में हासिल निकट शारीरिक हालत संवहनी बिस्तर के vivo व्यवहार में लिए extrapolated किया जा सकता है, जो औषधीय और शारीरिक उत्तेजनाओं, के लिए आंतरिक प्रतिक्रियाओं की गहराई लक्षण वर्णन परमिट. दबाव myograph पारंपरिक तार myographs पर कई फायदे हैं. उदाहरण के लिए, छोटे प्रतिरोध वाहिकाओं कसकर नियंत्रित और physiologically प्रासंगिक intraluminal दबाव में अध्ययन किया जा सकता है. यहाँ, हम acetylcholine के जवाब में vaso-आराम करने phenylephrine साथ preconstricted 3 आदेश mesenteric धमनियों (लंबे समय तक 3-4 मिमी), की क्षमता का अध्ययन. Mesenteric धमनियों 60 mmHg के लगातार दबाव में बनाए रखा है कि एक दबाव और सील प्रणाली से जुड़े दो cannulas पर बढ़ रहे हैं. पोत के लुमेन और बाहरी व्यास continuou हैंधूर्त क्रमशः phenylephrine और acetylcholine के जवाब में वाहिकासंकीर्णन और vasorelaxation की वास्तविक समय मात्रा का ठहराव की अनुमति, एक वीडियो कैमरा का उपयोग कर दर्ज की गई.
हृदय रोग के एटियलजि अध्ययन करने के लिए दबाव myography की प्रयोज्यता प्रदर्शन करने के लिए, हम प्रणालीगत उच्च रक्तचाप के एक murine मॉडल में अन्तःचूचुक पर निर्भर नाड़ी समारोह का आकलन किया. घुलनशील guanylate साइक्लेस (- / – sGCα 1) के α 1 सबयूनिट में कमी चूहे जब एक 129S6 (S6) पृष्ठभूमि (sGCα 1 -/-S6) पर उच्च रक्तचाप से ग्रस्त हैं, लेकिन नहीं है जब एक C57BL / 6 (बी -6) पृष्ठभूमि (sGCα पर 1 -/-B6). दबाव myography का प्रयोग, हमें पता चलता है कि भ्रष्ट अन्तःचूचुक पर निर्भर vasorelaxation में sGCα 1 की कमी का परिणाम है. संवहनी रोग sGCα 1 में से sGCα 1 -/-S6 में अधिक स्पष्ट है -/-B6 चूहों, संभावना contributisGCα 1 -/-B6 चूहों में से sGCα 1 -/-S6 में उच्च रक्तचाप के लिए एनजी.
दबाव myography जिससे हृदय रोग अंतर्निहित तंत्र में हमारी जानकारी बढ़ाने, संवहनी संकुचन और विश्राम पर विभिन्न उत्तेजनाओं के प्रभाव का आकलन करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है कि एक अपेक्षाकृत आसान है, लेकिन संवेदनशील और mechanistically उपयोगी तकनीक है.
Introduction
दबाव myograph सिस्टम छोटे धमनियों, नसों और अन्य जहाजों की शारीरिक समारोह और गुणों को मापने के लिए किया जाता है. एक धमनी या शिरा के एक अक्षुण्ण छोटे खंड दो छोटे गिलास cannulas पर घुड़सवार और पोत विवो विशेषताओं (आंकड़े 1 और 2) में अपने से ज्यादातर को बनाए रखने की अनुमति देता है, एक उपयुक्त luminal दबाव के लिए दबाव डाला जाता है. एक दबाव myograph में पास शारीरिक हालत पृथक वाहिकाओं के आंतरिक गुणों (जैसे myogenic स्वर) की जांच की अनुमति, संवहनी बिस्तर के vivo व्यवहार को दर्शाता है. मांसपेशियों के संकुचन एक बल ट्रांसड्यूसर 1 से प्रत्यक्ष यांत्रिक युग्मन द्वारा मूल्यांकन किया है जहां तार myography, अधिक दबाव myography के लाभ में से कुछ, जबकि नाड़ी तंत्र में विकसित समग्र प्रतिरोध को परिभाषित जो सूक्ष्म प्रतिरोध धमनियों का अध्ययन किया जा सकता है (मैं) में शामिल तार myograph बड़ा नाली धमनियों, (दो) टी तक सीमित हैकोई तार (तीन) पोत के प्राकृतिक स्वरूप को बेहतर बनाए रखा है कि, पोत लुमेन के माध्यम से पारित करने की आवश्यकता के बाद से अन्तःचूचुक नुकसान को टोपी जोखिम कम हो जाता है, और (iv) कि पोत आयाम एक विस्तृत श्रृंखला के में अध्ययन किया जा सकता है दबाव या कतरनी तनाव 2.
सूक्ष्म वाहिकाओं का अध्ययन कर उच्च रक्तचाप जैसे हृदय रोगों में बदल संवहनी टोन करने के लिए योगदान करते हैं कि pathophysiology, और आणविक तंत्र को समझने में मदद करने के लिए बड़ा नाली धमनियों अध्ययन से अधिक जानकारीपूर्ण हो सकता है. उदाहरण के लिए, 8 सप्ताह के लिए चूहों के एक उच्च वसा आहार खिलाने के साथ जुड़े endothelial समारोह की हानि नहीं बल्कि महाधमनी के छल्ले में 2 एन डी के आदेश mesenteric धमनियों 3 (चित्रा 3) में प्रदर्शन किया जा सकता है. दबाव myography का एक अन्य लाभ यह है कि दबाव पोत की आंतरिक myogenic कसना मौजूद है, और इस घटना में अन्तःचूचुक की भूमिका और समारोह का अध्ययन किया जा सकता है. यहाँ, हम descrबिगड़ा नाइट्रिक ऑक्साइड (सं) cGMP संकेत की एक सेटिंग में माउस मेसेंतेरिक 3 आदेश प्रतिरोध धमनियों की संवहनी जेट अध्ययन करने के लिए एक दबाव myograph का उपयोग IBE.
Protocol
Representative Results
Discussion
चूहे भाग में, क्योंकि इस तरह मानव pathophysiology के लिए माउस मॉडल पैदा आनुवंशिक संशोधन, शुरू करने की संभावना के कारण, कई जांचकर्ताओं के लिए पसंद की प्रयोगात्मक मॉडल हैं. vasoactive छोटे प्रतिरोध की स्थिति नहीं है लेकिन…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
लेखक डीआरएस स्वीकार करना चाहते हैं. डीएमटी दबाव myograph और डीआरएस के इस्तेमाल के लिए पॉल हुआंग और डिमिट्री Atochin. उच्च वसा आहार या मानक आहार के साथ खिलाया चूहों को उपलब्ध कराने के लिए Binglan यू और चोंग ली.
धन के स्रोत
इस काम के हार्वर्ड मेडिकल स्कूल (ते के लिए खरीदता है) से चिकित्सा के लिए विद्वान वैज्ञानिक विकास अमेरिकन हार्ट एसोसिएशन (ते के लिए खरीदता है) से अनुदान 10SDG2610313, और एक एलेनोर और मीलों शोर 50 वीं वर्षगांठ फैलोशिप प्रोग्राम द्वारा समर्थित किया गया था.
Materials
| Name | Company | Cataloge No. |
| NaCl | Fisher Scientific | BP358 |
| CaCl2 (2H2O) | Fisher Scientific | C79-500 |
| KCl | Sigma | P9333 |
| MgSO4 | Fisher Scientific | M65-500 |
| KH2PO4 | Sigma | P3786 |
| NaHCO3 | Fisher Scientific | BP328 |
| NaOH | Fisher Scientific | S318 |
| D-Glucose | Sigma | G8270 |
| EDTA | Fisher Scientific | BP121 |
| HEPES | Sigma | H3375 |
| Phenylephrine | Acros Organics | AC20724 |
| Acetylcholine | Sigma | A6625 |
| Pressure Myograph System | DMT |
References
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