Permanent occlusion des vaisseaux cérébraux<em&gt; Via</em&gt; Double ligature et Transection

Résumé

Nous décrivons une méthode hautement reproductible pour l'occlusion permanente d'un important vaisseau sanguin cérébral des rongeurs. Cette technique peut être accompli avec très peu de dommages périphérique, la perte de sang minime, un taux élevé de survie à long terme, et le volume de l'infarctus cohérent en rapport avec la population clinique humaine.

Résumé

L'AVC est une des principales causes de décès, d'invalidité et de perte socio-économiques dans le monde entier. La majorité de tous les AVC causé par une interruption de la circulation sanguine (ischémie) ^1. L'artère cérébrale moyenne (MCA) offre une grande majorité de sang à la surface latérale du cortex ^2, est le site le plus fréquent de l'homme course ^3, et de l'ischémie sur son territoire peut entraîner des dysfonctionnements large ou la mort ^1,4,5. Les survivants d'un AVC ischémique souffrent souvent la perte ou la perturbation des capacités motrices, déficits sensoriels, et l'infarctus. Dans un effort pour capturer ces caractéristiques clés de la course, et ainsi développer un traitement efficace, beaucoup d'accent est mis sur des modèles animaux d'ischémie à MCA.

Nous présentons ici une méthode d'occlusion permanente d'un vaisseau sanguin de la surface corticale. Nous allons présenter cette méthode en utilisant un exemple d'une occlusion du vaisseau pertinente qui modélise le type le plus commun, l'emplacement et outcome de la course humaine, l'occlusion de l'artère cérébrale moyenne permanent (pMCAO). Dans ce modèle, nous exposons chirurgicalement MCA chez le rat adulte et obturer ensuite par un double ligature et la section transversale du navire. Cette pMCAO bloque la branche corticale proximale du MCA, provoquant une ischémie dans tous MCA territoire cortical, une grande partie du cortex. Cette méthode d'occlusion peut également être utilisé pour occlure des portions plus distales des vaisseaux corticaux pour obtenir une ischémie focale plus ciblant une région inférieure du cortex. Les principaux inconvénients de pMCAO sont que l'intervention chirurgicale est peu invasive comme une petite craniotomie est nécessaire pour accéder MCA, même si cela entraîne des lésions tissulaires minimes. Les principaux avantages de ce modèle, cependant, sont les suivants: le site de l'occlusion est bien définie, le degré de réduction du flux sanguin est cohérent, fonctionnel et neurologique dépréciation se produit rapidement, taille de l'infarctus est cohérent, et le taux élevé de survie permet de long évaluation chronique à long terme.

Introduction

Afin d'induire des conditions ischémiques qui imitent efficacement AVC ischémique humaine, plusieurs modèles de course d'animaux sont largement utilisés, avec des volumes d'infarctus résultant divers. Dans le modèle photothrombotic, le cerveau est irradiée à travers le crâne intact utilisant un éclairage laser après l'injection intraveineuse d'une substance photosensible (par exemple, de rose bengale), conduisant à la coagulation photochimique, l'obstruction des vaisseaux irradiées, et de l'ischémie dans le tissu environnant ^{6, 7.} Photothrombosis peut entraîner des très petites régions isolées de l'infarctus et est généralem....

Protocole

1. Mise en route: Obligation Instruments chirurgicaux

Voir Figure 4

1. Fraise dentaire (KaVo Dental Equipment, Modèle: UMXL-TM), 2-foret et foret 3-bit
2. Aiguilles hypodermiques Two ~ 30 gauge
3. Dentelé pincettes, courbé pointe en option (peut être utile mais pas indispensable)
4. Deux pinces à pointe fine
5. coupe-fil
6. fil de suture
7. Micro ciseaux

2. Création de la fenêtre chirurgicale

1. Anesthésie: Des procédures sont en conformité avec les directives du NIH et ont été approuvés par l'UC Irvine protection des animaux ....

Résultats

Succès occlusion d'un vaisseau peut être confirmé en utilisant granularité laser d'imagerie (LSI) parmi d'autres techniques d'imagerie du flux sanguin. La circulation du sang dans les principales branches corticales du MCA devrait tomber à environ 25% du niveau de référence ou occlusion moins suivante en fonction du niveau de bruit dans le système d'enregistrement et la sensibilité de la technique. Voir Figure 3 pour une image représentant LSI d'un segment d'.......

Discussion

Ce protocole a été développé afin d'induire une ischémie dans le cortex des rongeurs, et de le faire avec un impact minimal périphérique de sujets expérimentaux. Le double occlusion et la méthode de résection permet la confirmation visuelle que le navire a été occultée en permanence et peuvent être effectuées sans invasion excessive ou des dommages aux tissus, et avec un taux de survie élevé. Ce protocole occlusion peut être appliquée à tout navire corticale qui peut être accessible via une craniotomie pour induire .......

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
Pince Graefe extra fine - pointes de 0,5 mm légère courbe (1)	Fine Science Tools	11151-10
Pince Dumont #5 recouverte de céramique (2)	Fine Science Tools	11252-50
Ciseaux de Bonn extra fins, droits (1)	Fine Science Tools	14084-08
Rond 3/8 (16 mm) Aiguilles de suture Fine	Science Tools	12050-02
6-0 Braided Silk Suture	Fine Science Tools	NC9071061 Harvard Apparatus No. :510461
Aiguille de calibre 30, ½ ; " longueur	Outils scientifiques fins	NC9867376 n° :ZT-5-030-5-L/COL