만성 신장 질환 환자에서 혈관 기능의 평가
Summary
혈관 장애 및 생리 학적 기전에 기여하는 정도는 상완 동맥 흐름 중재 팽창 대동맥 맥파 속도, 혈관 내피 세포의 단백질 발현을 측정함으로써, 만성 신장 질환을 가진 환자에서 평가 될 수있다.
Abstract
만성 신장 질환 (CKD) 환자는 크게 일반 인구에 비해 심혈관 질환 (CVD)의 위험이 증가하고,이 부분적으로 만 기존의 CVD 위험 요인에 의해 설명된다. 혈관 장애는 혈관 내피 기능 장애 (가장 일반적으로 장애인 내피 세포에 의존하는 팽창 [EDD]로 평가)과 큰 탄성 동맥의 경직을 특징으로 중요한 비 전통적인 위험 요소입니다. 다양한 기술이 EDD 큰 탄성 동맥 강성을 평가하기 위해 존재하지만 가장 일반적으로 각각 상완 동맥 흐름 중재 팽창 (FMD의 BA)와 대동맥 맥파 속도 (대동맥 맥파 속도를 통하여 간접적가) 있습니다 사용. 혈관 장애의 이러한 비 침습적 측정 모두와 신장 질환이없는 환자에서 미래의 심혈관 질환의 독립적 인 예측 인자이다. CKD 환자는 모두 장애인 FMD BA을 설명하고, 대동맥 맥파 속도를 통하여 간접적 증가했다. 반면에 의한 정확한 메커니즘 혈관 부전 deve을CKD에서의 해양 생물이 불완전하게 이해하고, 증가 된 산화 스트레스 및 산화 질소 (NO) 생체 이용률의 후속 감소는 중요한 기여자이다. 산화 스트레스의 세포 변화는 전주 정맥 혈관 내피 세포를 수집하고 면역을 사용하여 산화 스트레스의 마커 단백질 발현을 측정하여 평가 될 수있다. 우리는 FMD BA, 대동맥 맥파 속도를 통하여 간접적, 혈관 내피 세포의 단백질 발현을 측정하기 위해 여기에이 방법에 대한 설명을 제공한다.
Introduction
만성 신장 질환 (CKD)는 단독 1 미국에서 ~ 인구의 11.5 %에 영향을 미치는 전염병 비율에 도달하였습니다 주요 공중 보건 관심사입니다. CKD 환자에서 심혈관 사망 또는 심장 혈관 사건의 위험은 크게 일반 인구의 2 ~ 4에 비해 증가한다. CKD 환자는 기존의 심장 혈관 위험 요소의 높은 유병률을 나타내고 있지만, 이것은 단지 심혈관 질환의 자신의 발생률이 증가 (CVD) 5의 일부를 설명합니다. 혈관 장애는 신장 6-9의 분야에서 증가 인정 받고 중요한 비 전통적인 심혈관 질환의 위험 요인이다.
많은 변화 가능성 동맥 부전의 발전에 기여하는 반면, 큰 관심사들 사이에서 가장 일반적으로 손상된 내피 의존성 팽창 (EDD)로 평가 혈관 내피 기능 장애의 발달, 그리고 LA의 경직 아르RGE 탄성 동맥 10. 다양한 기술 및 EDD 큰 탄성 동맥 경화를 평가하기 위해 존재하지만, 가장 일반적으로 사용되는 각각 상완 동맥 흐름 중재 팽창 FMD BA 및 대동맥 맥파 속도 (대동맥 맥파 속도를 통하여 간접적)이다. EDD을 평가하기 위해 일반적으로 사용되는 또 다른 기술은 정맥 폐색 혈량 측정법 (plethysmography) (11, 12)을 사용하여 아세틸 콜린 등의 약물 에이전트에 팔 혈류 반응을 측정한다. 그러나,이 방법은 FMD BA보다 더 많은 침략과 CKD 환자에서 금기 할 수있다 상완 동맥의 도관이 필요합니다. 동맥 경화를 평가하기 위해 대체 기술이 널리 이용되거나 대동맥 맥파 속도를 통하여 간접적으로 21 임상 종점으로 확인되지 않지만, 경동맥 동맥 로컬 컴플라이언스 (강성의 역수)를 측정하는 것이다.
CKD 환자는 손상 한 FMD BA 14-16 증가 대동맥 맥파 속도 AP를 모두 보여웨스트 버지니아 13,17,18도 전에 투석을 필요로합니다. 중요한 임상 적 관점에서, 혈관 기능 장애의 이러한 비 침습적 조치 모두 CKD 19-21뿐만 아니라 다른 인구 22 ~ 26의 환자에서 모두 미래의 심혈관 사건과 사망률의 독립적 인 예측 인자이다. 이 기술은 CKD 환자 등의 CVD 위험이 다양한 인구를 공부에 적용 할 수 있습니다.
동맥 부전 CKD에서 개발하는 정확한 메커니즘은 불완전하게 이해된다; 그러나, 감소 된 산화 질소 (NO) 생체 이용률은 중요한 기여를 27-30과 장애인 EDD 모두의 일반적인 메커니즘 증가 동맥 경화 10,31입니다. CKD에서, 산화 스트레스가 증가하고, NO 생체 이용률 32-34의 감소에 기여한다. 산화 스트레스는 항산화 방어에 상대적인 반응성 산소 종 (ROS)의 과다 생물학적으로 정의된다. 생리적 인 자극, INC염증 신호를 건의 Luding, 산화 효소 시스템을 촉진 슈퍼 옥사이드 음이온 (O 2 ● -)를 포함하여, ROS를 생산하는 (예를 들면, 산화 효소 NADPH 산화 효소.) 35. 슈퍼 옥사이드의 생산은 궁극적으로 산화 질소 (NO)의 생체 이용률을 감소로 연결됩니다.
내피 기능 장애는 사건의 CKD (36)의 독립적 인 예측대로 손상 NO 생체 이용률은 차례로, CKD의 발전에 기여할 수 없다. 이 동물 데이터 eNOS의 억제는 고혈압 (전신 및 사구체)를 유도하는 것을 나타내는과 일치, 사구체 국소 빈혈, 사구체 경화증 및 tubulo 간질 부상 37. 실제로, NO 생체 이용률이 인간의 CKD (38, 39)의 내피 기능 장애에 대한 중요한 역할을 제안, 인간의 질병을 모방 실험 신장 질환의 개발과 진행에 필요한 나타납니다 감소.
혈관 산화 스트레스의 마커는 V에서 평가 될 수있다원래 콜롬보 등. (40)에 의해 개발 및 씰 등 41-43 수정 기술을 사용하여, 인간의 연구 대상에서 수집 내피 세포를 ascular. 2 멸균 J-선을 사용하여, 세포가 전주 정맥에서 수집, 복구 고정하고, 나중에 긍정적으로 내피 세포로 확인하고 면역을 사용하여 관심의 단백질의 발현을 분석 하였다.
우리는 여기에) 측정 FMD의 BA에 사용할 수있는이 방법에 대한 설명을 제공한다; b)는 대동맥 맥파 속도를 통하여 간접적 측정; C) 산화 스트레스의 마커의 혈관 내피 세포의 단백질 발현을 측정합니다. 초점은 만성 투석을 필요로하지 않는, CKD 환자에 있습니다.
Protocol
Representative Results
Discussion
FMD BA 및 대동맥 맥파 속도를 통하여 간접적에 대한 정확한 결과를 얻기 각각 높은 품질의 초음파 영상 및 압력 파형을 획득해야합니다. 이 핵심은 운영자 (44)에 의해 각 기술의 적절하고 지속적인 교육 및 사용하는 것입니다. 또, 테스트 세션 (예를 들면, 이전 12 시간 단식, 온도 조절 실 등) (44,45)를 표준화하여 가능한 결과에 영향을 미칠 수만큼 외부 변수에 …
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
저자는 그녀의 기술 지원을 니나 프레스톤 감사합니다. 이 작품은 미국 심장 협회 (12POST11920023)와 NIH (K23DK088833, K23DK087859)에 의해 지원되었다.
Materials
| Name of Material/ Equipment | Company | Catalog Number | Comments/Description |
| J-wire | St. Jude | 404584 | 2 per collection |
| Disposable shorts (MediShorts) | Quick Medical | 4507 | |
| Non-invasive hemodynamic workstation (NIHem) | Cardiovascualr Engineering | N/A | Includes custom ruler. An alternate system is the Sphygmocor |
| Ultrasound | G.E. | Model: Vivid7 Dimension | We use a G.E., but there are many companies and models |
| Vascular software (Vascular Imager) | Medical Imaging Applications | N/A | |
| R-wave trigger box | Medical Imaging Applications | N/A | custom made |
| Rapid Cuff Inflation System | Hokanson | Model: Hokanson E20 | |
| Forearm blood pressure cuff | Hokanson | N/A | custom cuff with 6.5 x 34 cm bladder |
| HUVECs | Invitrogren | C-015-5C | |
| Donkey serum | Jackson | 017-000-121 | |
| Pap pen | Research Products International | 195505 | |
| VE Cadherin | Abcam | ab33168 | |
| AF568 | Life Technologies | A11011 | depends on specifications of microscpe |
| AF488 | Life Technologies | A11034 | depends on specifications of microscpe |
| Nitrotyrosine antibody | Abcam | ab7048 | |
| NADPH oxidase antibody | Upstate | 07-001 | |
| DAPI | Vector | H-1200 | |
| Delicate task wipe (Kimwipe) | Fisher Scientific | 06-666-A | |
| Plastic paraffin film (parafilm) | Fisher Scientific | 13-374-10 | |
| Confocal microscope | Olympus | Model: FV1000 FCS/RICS | many options exist |
References
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