Abstract
有在运动对改善多种疾病有神经生物学基础的积极影响的认识大幅度增加;这些措施包括改善认知功能和物理性能。作为一个结果，存在增加在动物研究中使用的运动的数目。有人认为，强迫运动的一个内在价值是研究者拥有可影响运动对行为结果的影响因素的控制，尤其是运动频率的运动养生的，持续时间和强度。然而，遵从在强制运动疗法可能是一个问题，特别是如果是采用足部电击的潜在的困惑要避免。同样重要的是要考虑到，因为大多数的认知和运动障碍罢工老年个体，确定这些障碍应该考虑使用老年啮齿类动物与合规性的最高级别的运动的影响，以保证测试的苏最小需求bjects。在这里，相关的步骤和要达到近100％符合跑步机锻炼的老年啮齿类动物模型中考虑将介绍和讨论。尽管具体的锻炼方案所采用的调查，我们的协议应该是使用到调查是在强迫运动对衰老相关的损伤，包括老龄化相关的帕金森病和帕金森氏病的潜在影响，特别感兴趣。
Introduction
非侵入性的生活方式策略，可以防止或减轻损害，以认知和运动，两者常常与衰老有关，是获得牵引力为可行的做法，保持健康和福祉1,2。例如，相比与推进3个年龄相似的中年同行中到严格的训练，每周和一致的基础上的中年男人显著提高运动能力。此外，越来越多的证据表明，这些生活方式的策略，如锻炼，可以减轻或者甚至逆转与神经变性疾病如帕金森氏病（PD）4相关联的损伤。
努力了解的老化相关的损伤的分子机制，也已经朝向确定如何非侵入性策略，如锻炼，逆转或减轻，有助于这类损伤的机制。跑步机运动就是这样的一个STRAT埃及正在越来越多地应用在帕金森病5-7和认知功能障碍1款，其中仍在确定背后的改善运动或认知功能的机制。然而，它指出，老化是帕金森病的神经生物学背景是很重要的。因此，对于人类生存条件，以实现在动物模型中的任何运动利益的任何潜在的翻译必须考虑到老龄化的神经生物学背景。例如，在帕金森病的进展延缓运动障碍的代偿机制可以通过老化8的过程中受到损害。因此，按理说，锻炼范式必须开发，不仅考虑在任一的存在或不存在疾病的病理老化的影响，但也可以发起和维持老年啮齿类动物。
因此，考虑到大鼠品系上的神经生物学背景下老化，在选择应该由调查员进行精心考虑。一些大鼠品系可用于衰老研究，特别是菲舍尔344和布朗挪威/菲舍尔344传真：1（BNF）的混合体。常用只SD大鼠（远交株）也是适合于这种用途，因为它是常用的神经变性疾病模型，如6 - 羟基多巴胺PD模型。我们的实验室在衰老和神经退行性疾病的工作，同时使用只SD和BNF株。在这份报告中，我们将介绍使用结果两个菌株突出我们的工作协议。对于那些研究者严格聚焦于年龄相关的研究中，BNF应变提供了一些重要的优点。第一，它是比较不容易受到老化相关的疾病（如肿瘤），并具有出色的寿命（典型寿命大于30个月）相比于其它菌株。他们也有各种生理和行为的结果9，少变化d为也适合于探讨与衰老过程干预方法。此外，实验中如强迫运动需要相当的处理由研究者和BNF应变的温柔性格是有利的。纹状体和中脑组织多巴胺含量与老化相关的变化，以及自发活动的变化是BNF老鼠和灵长类动物10-11相似。我们的实验室还与表征和操纵纹状体和中脑多巴胺信号和自发活动的BNF应变12-16丰富的经验。因此，由于其他的神经生物学基础疾病的风险随着年龄增加，神经变性疾病的动物模型中应考虑使用啮齿类动物品系与使用在老化研究中的广泛记录。
我们的协议在此也解决了一些关键问题的调查必须考虑在他们的结果obtaine的解释d从演习的协议。啮齿动物跑步机设备（它的使用，我们将在本报告中突出显示），通常配有触电的线圈可以停用跑步机的每条车道的后面。然而，当这些电击线圈被激活时，一个小的电击递送给受试者，因为它来自于与线圈接触。这种策略通常被用在运动的研究，以促进遵守跑步锻炼。这是一个关键点的考虑，特别是对那些参与行为研究调查是由多巴胺和去甲肾上腺素的信号的影响。电气电击是一种生理应激，其在两个神经递质系统的影响是证据充分的，与酪氨酸羟化酶17-18的活性增加。因此，无论是增加神经递质的合成可能混淆的任何锻炼效果的诠释，使得研究者负责解释是否有任何在运动后的行为观察到的变化是由于严格的锻炼方案或电击的压力。重要的是，所提出的强制运动疗法不采用使用电击的在跑步机上锻炼的任何点或运动训练时段。
成功的运动疗法也需要遵守最高行使的考试科目。电击的，以实现符合性就业可能混淆实验结果的解释当从属措施涉及神经递质的信号是受电击的影响（如前面所讨论的）。因此，面临的挑战是让啮齿动物，尤其是鼠类岁，符合了运动处方。任何运动养生的理想目标是达到近100％达标，因为这将减少所需完成的运动养生动物的数量。具体而言，最大的合规性锻炼和运动养生的结果的解释可以直接使用作为几个运动前的程序，包括：1）反向明暗周期，使动物在其活动（唤醒）循环锻炼的结果在我们的运动处方得到E，2）确保运动性能基线是之前的隔离等控制和运动组，和3）将所述测试受试者的逐渐引入他们的锻炼方案的要求的适应期。在这里，上述实验的考虑，必须实现近100％达标措施，跑步机锻炼的老年啮齿类动物（> 18月龄）进行评估并提交。最后，与运动相关联的环境中可能是有压力的，因此，本潜在混淆，以确定特定的行使的生理效应。我们的协议还包括在驯化阶段的每一个环节的nonexercise集团控制了暴露在跑步机上的潜在压力诱导的环境（包括MODEST跑步机上运行）和在跑步机上运动训练过程中把他们在固定的跑步机。因此，该协议的目的是描述需要单独确定运动的生理造成影响。
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Protocol
下面所有的程序都是按照机构动物照顾及使用委员会在路易斯安那州立大学健康科学中心 - 什里夫波特进行的，符合卫生指引研究所。
1，运动前程序
注：所有在该强制运动养生相关手续的时间线图解如图1所示 。
图1：强制锻炼方案时间表 。这个时间表详细介绍每个星期的研究期间，这项工作方案的各个阶段的重要事件。预驯化阶段（周1-2）涉及实验者处理和基线运动活性。在适应阶段（3-4周），所有大鼠进行驯化培养3天瓦特在这里，他们坐在固定的跑步机和适应训练，跑步机，然后10天。在运动训练阶段（5-10周）是必需的最少两轮运动（1圆=连续12天），其次是2周的休息时间。行为和/或神经化学物质的测量可以在这些休息时间进行。此外，该方案可以被修改，以包括多轮的运动在这个阶段。体重是衡量整个研究过程中每周的各个阶段，在此之前（第一次会议）后（最后一届）这项工作方案的每一个阶段。跑步机运动训练成绩是1-4分配的所有锻炼和运动训练课程后，和射程，4为可能的最高得分。简单地说，对4训练成绩时，只无帮助锻炼整个训练会话分配。同样，指派3的训练成绩时，只需要最低限度的援助（定义为：协助小于25％的训练课从实验者的时间）。指定2的训练成绩时，只需要太多援助（定义为：协助培训会议的时间大于25％）的实验者在锻炼期间。最后，拨出1培训比分老鼠是不符合要求，未能完成练习会话。
- 抵达后的动物群体，独立的，单独容纳所有的科目为标准鞋盒笼。提供食物和水随意向受试者在整个研究。
- 保持反12小时明暗周期（灯从1800到0600小时），在动物群体，并让受试者以适应这一周期至少一周。被检者的活动状态（暗）的周期中执行所有行为学实验，和1-2小时之前的明暗周期变化。
- 之前的任何行为实验开始的两周内，办理所有考试科目数分茨每日熟习实验者的主体，并以降低的新颖性引起的应力不熟悉的环境中，如在运动室和跑步机。
- 测量每个受试者的体重，每周一次，并立即前（第一次会议）后（最后一届）行使范式的每个主要区间。
2，基线活动性评估：确定强制运动组分配
- 评估为60分钟/天，每个主题的自发活动，连续5天，以建立基准的运动能力。开展自主活动会在自动旷场自发活动室包括一个有机玻璃箱（45×45×20 毫升 ），用红外光束的电网安装水平和垂直方向在产品说明书中建议的。
- 在运动活性的评估，负载中的每一天的开始和设置在计算机和softwa重新计划连接到旷场运动活动室，以便每个会话期间，记录光束中断（自发活动）的数量。
- 加入约2杯松木片的床上用品，以在每次会话的运动室的地板上。
- 之前立即运出动物群体的自发活动室的主题在他们的家笼子里的自发活动的会话。加载对象到其指定的运动室下一个红灯，然后开始60分钟会话的计算机上一旦被放置到室内。
- 在完成自发活动会话完成后，从运动室取出科目，并将其在红光下回到自己的家乡笼。立即返回受试者回到动物的殖民地。
- 从室中取出被褥和每次会议后清洗室的墙壁和地板用50％的乙醇。
- 每增加一个运动课程重复步骤2.3-2.6每天根据需要，直到所有的科目进行了检验。进行所有的运动活动会话在黑暗中，在动物的活性周期，和1-2小时之前的明暗周期变化。
- 考虑到习惯化到活动室的可能性，旋转中的可用的腔室，使得自发活动是由前一日测量在不同的腔室的每个主题。
- 如果多个会话需要在一天内进行，变更测试，使得主题以不同的顺序，比前一交易日进行测试的顺序。
- 从由用于测量运动活动，确定与以下5个运动参数每只动物的基线运动活性的软件生成的数据：总行驶距离（厘米），水平活动（光束中断的次数），移动号码（开始动作的次数） ，花的时间移动（秒），并且移动速度（厘米/秒）。
- 为了分配练习的研究e和nonexercise组，计算出在所有5次的平均值为每上述步骤2.9中列出的5运动参数。
- 从这5个参数，确定锻炼和nonexercise（对照）组，使得同等范围内自发活动是代表在这两个群体。以这种方式，基于类似的运动功能配对大鼠在一起，并分配一个鼠至运动组和一个鼠的nonexercise基。因此，例如，配对的两只大鼠表现出最高平均所有5个运动参数的合计，并分配一个鼠至运动组和其他的nonexercise组（组分配是随机选择的）。其余的科目重复此过程。
- 保持配对整个强迫运动养生和对所有数据进行分析。
- 如果实验者有兴趣的运动对自发活动的影响，测量运动后的自发活动ü唱在步骤2.1-2.8.1上次跑步运动后开始一天中所述的相同步骤。注意：如果研究者有兴趣和/或自动自发活动的软件许可证，检验焦虑有关的措施（ 即在时间与外围活动室的中心略去）评估对象在自发活动的评估相对的焦虑。
3，锻炼的跑步机
- 进行在电动啮齿动物跑步机的所有平板运动有关的程序与由透明的有机玻璃墙中动物的活性周期分隔车道，以及1-2小时之前的明暗周期变化。
- 代替位于每个车道的背面的电击线圈，用有机玻璃逆止专门设计，以适应在跑步机上，使得受试者可以连续运动而不与电休克线圈接触。为了防止逆止在培训班滑动，保持逆止到位，在C形夹1.5。
- 由于实验者处理所需的跑步机运动训练，进行的灯还亮着所有的跑步机上锻炼会话。
- 在他们的家笼子里的跑步机运输科前夕，跑步机运动训练。当跑步机是静止的，只加载到跑步机在其指定的车道通过向上滑动逆止刚好够，受试者可以逆止器下操纵。回向下滑动逆止到静止位置，一旦受到坐落在跑步机带。不要启动会话，直到所有的科目都被放置在其指定的车道为特定的会话。
- 在驯化的第一阶段，将每只大鼠的四车道的固定踏车的（如在步骤3.4中所述）为5-10分钟/天，连续3天中的一个。增加每个会话的时间每次连续ðAY（ 例如，5分钟，第1天，7分钟的第2天，并在第3天10分钟）作为大鼠熟悉跑步机装置，并减少对新颖性应力的潜力，在跑步机装置。重要提示：不要将老鼠在跑步机上（ 例如，停用的电击线圈），除了固定的皮带在这个阶段的任何地方。
- 在适应训练的第二阶段，将每只大鼠在固定跑步机的一个车道，在逆止门前。当所有的科目都到位，把跑步机上以缓慢的步行速度（ 例如，6米/分钟）。无论实验分组，培养所有大鼠在这个阶段上行走，跑步机，以确保从所述强制锻炼方案观察到的任何潜在的影响从运动训练导致，而不是简单地从锻炼的能力。
- 由于跑步机的皮带开始滚动，确保所有的老鼠都走在了前进方向。协助大鼠为NEcessary由定向或轻轻捅了捅他们，直到他们正在向前推进。在适应训练期间，训练大鼠行走在跑步机上，使得它们不断地走在跑步机上未经实验者的援助。
- 通过逐渐增加速度过一段5-10分钟/天，连续10天适应各组大鼠的跑步机。以进一步促进遵守踏车运动，在所述第一5驯化会话训练大鼠在低速（6-8米/分钟）5-10分钟，并增加至适中的速度（9-10米/分钟）5在过去的5驯化会话-10分钟。
- 确保所有的大鼠可被驯化训练期间的最后一届维持9-10米/分钟的速度进行10分钟。
- 在跑步机上锻炼会话完成时，如在步骤3.4中所述删除中用于加载对象的相同方式，跑步机主体。立即返回主题，以他们的家笼运回来的动物群体。
- 擦拭每个单独的车道包括每个单独的踏车运动训练后的壁和跑步机带，用50％的乙醇。
- 通过指定一个跑步锻炼的分数在每天的会议结束确定整个运动期间各组大鼠的运动能力。指定的4训练成绩时，只无帮助锻炼整个训练课。同样，指派3的训练成绩时，只需要最低限度的援助（定义为：协助培训会议的时间不超过25％）的实验者。指定2的训练成绩时，只需要太多援助（定义为：协助培训会议的时间大于25％）的实验者在锻炼期间。最后，拨出1培训比分老鼠是不符合要求，未能完成练习会话。
注：本活动计分制适用在某种程度上，其它研究19。- 排除老鼠是无法完成驯化阶段，由于违规和/或防止主体行使（ 例如，这包括获得1跑步机运动训练成绩驯化训练的多个连续两天只）受伤。
- 平均在每个训练期间（ 如驯化培养和锻炼培训）在跑步机上的分数来确定每个主题的运动能力。确保所有的老鼠都能够赚到4跑步机上锻炼得分的适应期的最后一堂训练课中。
- 如果有的老鼠是不符合被他人在整个训练保持着顶级的运动速度，调整速度，这些老鼠，让他们能够继续行使的相同的时间量，但在整个培训课程以较慢的速度。在这种情况下，训练大鼠在组合模式慢吃了会议，并提高速度为主体适应较慢的速度。
- 为了避免对在跑步机上运动训练的跑步机车道偏移的可能性，旋转跑步机，让他们在训练中不同的车道，以后每次练习会话的可用通道中各组大鼠。
4，跑步机运动训练
- 这一天开始运动训练课程继去年驯化训练，并继续行使大鼠连续12天。在动物的活性周期进行这些会话和1-2小时之前的明暗周期变化。
- 按照相同的设置程序，在驯化训练中使用的每个跑步机运动训练，如步骤3.2和3.4描述。
- 在每届会议开始时，打开跑步机，以较低的，热身的速度（8米/分），比训练速度（9-11米/分钟），将维持throug豪特的演习训练的剩余部分。继续进行这场热身速度在会议开始时5-10分钟。调整速度9-11米/分钟的培训课程的其余部分。培训科目平均30分钟每一届整个12天运动训练。
- 每次运动训练后，分配一个跑步机上锻炼的比分都使用在步骤3.9中描述的同样的运动评分系统只在运动组。不分配在跑步机上运动训练期间nonexercise鼠训练成绩。
- 进行这项活动，分别nonexercise会议。将nonexercise大鼠在固定跑步机，他们的锻炼人群每届会议期间受过训练的时间相同。
- 如步骤3.11所述，旋转每只大鼠的跑步机，让他们在训练中不同的车道，以后每次练习会话的可用通道之中。
- 在完成一个循环完成运动，休息科目为14天。注意：根据从图2A和图2B中描述的试验性研究的结果是选择了该休息期。
- 如果需要，进行各种行为和/或神经化学物质的评估，在12天的培训期结束。反之，则继续运动训练之后14天的休息时间随后的几轮。
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Representative Results
在所有三个阶段都被迫锻炼方案的事件的时间线的示意图示于图1中 ，除了反转的光-暗循环，每天处理之前，任何实验测试，并驯化培养，其中受试者坐的第1阶段在固定的跑步机5-10分钟/天，连续3天，实施了以提高符合强制锻炼方案。这些程序被添加到协议中，以尽量减少与新颖的环境相关的应力，并且使受试者会更倾向于上行走的运动跑步机，如果他们已经熟悉的固定装置。这些程序在图1列出了采用下面的BNF大鼠中，50％的受试者是不符合先前的SD大鼠进行的强迫运动疗法进行了试验研究。在这种强迫锻炼方案，18个月大的SD大鼠的受试者将经历运动30分钟，连续12天，速度高 达15米/分钟（ 图2）。这些初步结果表明，一个循环运动（连续12天）可能增加运动活性（ 图2A），与运动对运动活性的持久出一周运动后该效果的持续时间。此外，增加的运动活性，相对于原始基线的反弹作用时，观察到下列的闲置一个月内（ 图2B）后同一12天锻炼方案。因此，在此协议中详述的改性迫使锻炼方案，一个回合被迫运动由运动的连续12天，然后在两周的休息时间。结果在图2表明，所提出的强迫运动疗法可能增加自发活动的影响，运动相对于它们各自的基线活动。
如先前所讨论的，〜100％遵守该强制锻炼方案可通过加入几个运动前和跑步锻炼程序获得。重要的是，要做到遵守该方案所采取的步骤增加检测与就业这迫使运动处方的锻炼效果的敏感性。衡量运动效果的一种方法是通过体重的测量。在这个范例中，体重是每周测量，在此之前（第一次会议）后（最后一届）的运动养生的每个阶段。这表现在表1中 ，锻炼大鼠具有的平均重量损失为4.43±0.32％，相比之下，其运动前体重。 COMPAratively，nonexercise有老鼠的平均体重下降0.05±0.55％相比，其运动前体重。因此，正如预期的那样，在整个运动和nonexercise鼠之间的强制锻炼养生的总重量损失和体重百分比变化显著差异（N = 7元组，P <0.01，配对双尾t检验）。类似地，在第1轮中观察到体重减轻和百分数降低体重显著差异（每组n =，P <0.01如图7所示，成对的双尾t检验）和第2轮被迫运动组（n = 7每组， P <0.05）。值得注意的是，有在基准或驯化阶段的任一参数中没有显著的差异，这表明只有强迫运动训练周期影响体重。这一结果表明，该运动疗法对大鼠运动组，其可以是独立的研究者正在测量的其他变量的可核查的生理效应。鉴于该机构的权重这些学科范围从整个研究378-572克，下降的体重的4％不被视为有损于整体福祉的课题，也是我们在以前的试验研究范围内强行与SD大鼠，其中运动处方的降低体重的6％观察到在相同的时间段。最后，我们注意到，体重至自发活动没有显著相关性已经在个体体重对在图3中列出的各个运动行为参数的基线评估观察到的。
跑步机上锻炼的分数分配每个驯化和跑步机运动后，使实验者，以确定整个方案的每一个主题的运动能力。例如，4跑步机上锻炼的分数是最高指示符合该方案的特定会话，而1个跑步机运动成绩表明noncomp的liance的方案为特定的会话。因此，当符合条件受聘于该方案，跑步机运动成绩应该反映这证明通过指定的3或4的分数在适应训练演习符合，既锻炼和nonexercise老鼠被训练来锻炼跑步机和跑步机运动成绩期间仅这个阶段分配成两组。相反，平板运动成绩只分配每一轮被迫行使期间行使的影响。来自驯化和跑步机运动训练跑步机上锻炼的分数结果显示在图4。在适应训练，没有在运动和nonexercise群体之间的平均跑步机上锻炼的分数没有显著差异（每组n = 7，P = 0.656，配对的双尾t检验）， 如图4A所示 。这表明，既能锻炼和nonexercise大鼠均兼容，并能适应于TREadmill运动类似。 图4B显示，运动组大鼠兼容通过两轮跑步机运动训练对跑步机上锻炼，为平均跑步机上锻炼的分数并没有这两轮之间显著不同（N = 7，P = 0.2336，配对双尾t检验）。因此，一旦他们适应运动训练，运动只保持兼容，通过两轮强迫锻炼。最后，需要注意的是考虑到较高的平均两个驯化训练的跑步机运动成绩（综合平均运动成绩= 3.09）和运动训练（综合平均运动成绩= 3.80），研究者参与，协助测试对象而言是很重要的，在个人培训课程是适应训练的第一阶段后，微乎其微。
图1：强制锻炼方案时间表 。这个时间表详细介绍每个星期的研究期间，这项工作方案的各个阶段的重要事件。预驯化阶段（周1-2）涉及实验者处理和基线运动活性。在适应阶段（3-4周），所有大鼠进行驯化培养3天，他们坐在固定的跑步机上，然后10天驯化训练的跑步机。在运动训练阶段（5-10周）是必需的最少两轮运动（1圆=连续12天），其次是两个星期的休息时间。行为和/或神经化学物质的测量可以在这些休息时间进行。此外，该方案可以被修改，以包括多轮的运动在这个阶段。体重是衡量整个研究过程中每周的各个阶段，在此之前（第一次会议）后（最后一届）这项工作方案的每一个阶段。跑步机LL运动训练成绩是1-4分配的所有锻炼和运动训练课程后，和射程，4为可能的最高得分。简单地说，对4训练成绩时，只无帮助锻炼整个训练会话分配。同样，指派3的训练成绩时，只需要最低限度的援助（定义为：协助培训会议的时间不超过25％）的实验者。指定2的训练成绩时，只需要太多援助（定义为：协助培训会议的时间大于25％）的实验者在锻炼期间。最后，拨出1培训比分老鼠是不符合要求，未能完成练习会话。
图2：试点12天的影响研究CED运动对运动活性为一周，并且在同一治疗方案时1个月静止状态后启动的影响。十八个月大的雄性SD大鼠期间在一个开放的场运动室在全额定环境照明的非活动周期（nonwake期）进行基线运动评估。 5，平均每天60分钟的会话被实现为每个鼠，大鼠和人然后分开到nonexercise组（NE）或运动组（E）。在nonexercise组（NE-B）或运动组（EB）的大鼠基线机芯编号（二）不显著不同。以下被迫运动（30分钟/天，12〜15米/分）的连续12天，自发活动期间的活动状态（唤醒）周期（与黯淡的光）进行评估。在他们的积极循环试验受试者提供了一个天然的刺激诱导的运动能够对基线的措施比较，其中自主活动是可预见的少评估时，在编的睡眠周期和环境照明。在行使（E-1轮），连续12天只展出自发活动相对较大的41％到原来的单个基准（N = 5元组，P <0.01，T = 8.25，配对双尾t检验），而老鼠在nonexercise组（NE-1轮）展出自发活动趋向于增加，但不显著不同基线组（n = 5元组，P = 0.11，T = 2.05，配对双尾t检验）。 1个月活动后，同样只进行一个相同的第二次演练方案和大鼠的运动组（E-2轮）表现出增加的自发活动61％，较其各自的原有个人基本活动量（N = 4元组，P <0.05，T = 5.34，配对双尾t检验），以对增加的nonexercise组（NE-2轮不显着的趋势相比）（N = 4元组，P = 0.13，T = 2.08成对双尾t检验）。
图中锻炼和nonexercise组基线自发活动参数3比较 。建立基线自发活动，5运动试验（60分钟/天5天）在跑步机锻炼前培训18个月大的雄性大鼠的BNF进行了的。被确定的五个运动试验的平均值为测定所有五个运动参数。的运动参数的装置被用来分配锻炼和nonexercise（控制），例如，有一个等于范围两组表示运动活性的基团。基于类似的平均值为所有的运动参数，受试者配对。一旦对和组被分配用于每个5参数进行配对的双尾t检验，以确保有在升无显著差异两组间ocomotor能力。总之，配对双尾t检验显示，（ 一）无显著差异总行驶距离（厘米），（每组n =，P = 0.7142 8，T = 0.3815），（B）水平活动（排名第梁断裂），（每组n =，P = 0.7767 8，T = 0.2948），（三）机芯号，（＃发起的运动），（每组n =，P = 0.6186 8，T = 0.5207），（ D）的时间花在运动（秒），（每组n =，P = 0.9307 8，T = 0.9011），和（E）移动速度（厘米/秒）（每组n =，P = 0.655 8，T = 0.4569 ）。这些结果保证了平等的各种运动能力，在这两个群体为代表，而这两种能力和应对演习不基于自发活动，以适应训练前两组之间的差异。
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驯化（A）和跑步机运动训练（二）在图4平板运动成绩。平板运动成绩被分配每一个锻炼和跑步机运动训练一段时间后，并作为合规每届会议期间的一个指标。得分范围为1-4，其中4是最高的。 4分科目时，如果没有援助，锻炼整个会话分配。当受试者锻炼与实验者最小的或最大的帮助，3个和2个分数分配分别。最后，1分被分配到科目不做完练习会话。既锻炼和nonexercise大鼠进行驯化培养，并且因此，两组大鼠的驯化过程中被分配跑步锻炼的分数。如图（A），有在运动和nonexercise鼠之间的平均跑步机上锻炼的分数没有显著差异。这表明，两组大鼠均能够ACCLimate到跑步机上锻炼类似，而且，这两个组均符合驯化训练（每组n = 7，P = 0.656，T = 2.270，配对双尾t检验）。在跑步机上运动训练，不仅锻炼大鼠被分配跑步机上锻炼的分数，因为nonexercise老鼠不会行使这个阶段（B）表明，大鼠的运动能够通过两轮运动训练，以保持3-4跑步机上锻炼的分数。同样地，平均跑步机上锻炼的分数并不两轮运动的显著不同组（n = 7，P = 0.2336，T = 1.234，配对双尾t检验），并通过标准的两轮强迫锻炼。
| Nonexercise（N = 8） | 练习（N = 7） | ||||||
| 体重测量 | p值 | ||||||
| 开始体重（g） | 457.10±20.16 | 476.00±26.85 | |||||
| 结束机身重量（g） | 450.80±21.63 | 454.90±25.55 | |||||
| 基线 | |||||||
| 减肥（G） | 5.69±1.46 | 5.21±2.35 | P = 0.982 | ||||
| 在体重变化百分比（％） | 1.35±0.36 | 1.10±0.51 | P = 0.811 | ||||
| 驯化阶段1 | |||||||
| 减肥（G） | 3.88±0.56 | 3.93±0.74 | P = 0.850 | ||||
| 在体重变化百分比（％） | 0.87±0.16 | 0.83±0.16 | P = 0.680 | ||||
| 驯化阶段2 | |||||||
| 减肥（G） | 5.81±1.27 | 8.07±2.39 | P = 0.486 | ||||
| 在体重变化百分比（％） | 1.29±0.26 | 1.61±0.47 | P = 0.744 | ||||
| 练习轮 | |||||||
| 减肥（G） | 6.31±1.00 ** | 13.50±1.78 ** | P <0.01 | ||||
| 在体重变化百分比（％） | 1.45±0.24 ** | 3.03±0.47 ** | P <0.01 | ||||
| 练习第2轮 | |||||||
| 减肥（G） | 0.5±1.254 * | 11.29±3.05 * | P <0.05 | ||||
| 在体重变化百分比（％） | 0.07±0.30 * | 2.38±0.63 * | P <0.05 | ||||
| 整体减肥 | </ TD> | ||||||
| 减肥（G） | 1.88±2.63 ** | 21.14±1.93 *** | P <0.01 | ||||
| 在体重变化百分比（％） | 0.05±0.55 ** | 4.43±0.32 ** | P <0.01 |
强迫运动疗法时表1体重测量 。在这个范例中，体重是每周之前（第一届）测量后（最后一届）的运动养生的每个阶段提供这种强迫锻炼养生的生理效应的措施。值表示为平均值±SEM，并且配对的双尾t-检验用于ANAlyze该方案的每一个阶段之后的运动和nonexercise组之间的差异。总体而言，运动大鼠进行了平均体重下降了21.14±1.93 g和a的体重降低4.43±0.32％。相比之下，nonexercise大鼠有平均体重下降了1.88±2.63％，并减少体重0.05±0.55％。因此，存在于总重量损失显著差（每组n =，p值= 0.0016 7，T = 5.417，配对双尾t检验）和在体重下降百分比（每组n =，P 7 = 0.0021 ，T = 5.158，成对整个运动和nonexercise鼠之间的这种强迫锻炼养生双尾t检验）。在减肥显著差异（每组n =，p值= 0.0036 7，T = 4.633，配对双尾t检验）和在体重下降百分比（每组n =，p值= 0.0037 7，T = 4.603，配对双尾t检验）中圆期间被迫行使在该轮2中类似的结果进行观察，观察有在重量损失为显著差（每组n = 7，p值= 0.0163，T = 3.305，配对双尾t检验）及体重下降百分比（N = 7元组，P = 0.0174，T = 3.255，配对双尾t检验）运动和nonexercise组之间。然而，没有显著差异在基线或驯化期间，观察在任一参数，表明只有被迫运动训练时段施加于大鼠的运动组中的生理作用。
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Discussion
有证据表明，生活方式的策略，如运动，可减少对慢性年龄有关的疾病和其主要症状，包括神经变性疾病如阿尔茨海默氏病和帕金森病20的风险。强制运动在跑步机上的好处，而不是自愿运动在跑轮，是研究者能够确定的频率，速度，和/或运动的强度和持续时间的练习会话。因此，具体的运动后的效果，如增加运动或认知能力，可以预测或预期下给定的方案的工作。此外，强迫跑步机锻炼人的条件结果的翻译是非常可能的。事实上，在PD患者最近的研究表明，当患者符合锻炼养生提出了一个双人自行车教练，这些病人表现出comparis提高运动成绩到PD患者谁只是锻炼自己的步调4。
神经变性疾病的发病率显著随老化而增加。因此，年龄在设计研究，其目的是把任何可能的结果对人类生存条件时的重要考虑因素。例如，利用青春期或成年动物模型来研究神经退行性疾病的研究没有考虑到老龄化是此类疾病的神经生物学背景。这可能混淆的任何可观察到的效果的临床由于年龄的生理因素尚未完全在这些研究中考虑的翻译。因此，研究探讨运动对任何运动或认知功能的影响，应考虑使用年龄的动物模型以来的认知和运动功能障碍也与中枢神经系统10,12,16中与年龄相关的缺陷在神经化学指数相关联。这将允许一个更为恰当理解的运动对运动和认知功能的神经生物学作用与在任一存在或不存在疾病的病理老化。
最后，为了确定单独行使对认知或运动表现的运动后的措施的影响，三实践是必不可少的，以获得接近100％的符合，以锻炼方案。首先，为了保持整个被迫锻炼方案的各个阶段的反向光 - 暗周期是很重要的。这确保了考试科目都在他们的积极（唤醒）循环训练。第二，它是非常重要的考试科目也慢慢适应了这两种跑步机环境，用于确定其运动和认知能力的设备。在这里，调查应遵循建议的时间表，在图1中概述的程序。最后，电动电击设备不应该在这个强制运动处方中的任何阶段使用。相反，在协议中强调，有机玻璃逆止器可用来鼓励学科继续在跑步机上运动会议期间行使。此时，所描述的运动疗法应被视为一个起点，任何实验室，与期望的运动养生的频率和持续时间可以根据研究者的范式变化。这些限制对这一长寿强迫运动疗法肯定还没有实现，但人们可以假设，除非受伤，符合大鼠应能保持坚持锻炼养生的月数。然而，应该指出的是，在哪个速度测试对象可以在给定的时间帧（在本方案30分钟）内执行跑步锻炼可能需要调整，和最大速度都没有超过15米/分钟的前述的研究。最好遵从可能的速度不超过2米/分钟，来实现。事实上，如果我们要跨晚锻炼的调查结果，以中年和人口老龄化，我们所期望的最有代表性的动物的协议是一个专注于长寿和遵守，而不是速度。
总之，这种强迫的运动方案是一个可以用在几乎所有的实验室，特别是对于那些侧重于神经退行性疾病和衰老。本报告中所使用的测试对象为所有18个月的年龄，在研究的开始。此外，还讨论了需要获得几乎100％达标，在考试科目的基本步骤。显然，收购100％达标是显著利益的调查，主要是因为人们只需要使用时所需的功率来测试一个给定的假设所需的科目数量。此外，该方案实现100％达标，不需要电电击的就业。事实上，消除电电击势在必行，以interpr等运动对那些依靠儿茶酚胺，尤其是多巴胺的行为措施的影响，因为像footshook应激源对儿茶酚胺生物合成17-18已久的知名影响。
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Acknowledgments
通过授予MF萨尔瓦多来自国家衰老研究所（AG040261）研究补助金的一部分提供资金用于这项工作。作者还要感谢维多利亚字段她的协助与工作相关的行为实验提出和Mackenzie果园，他协助建设逆止器的跑步机。
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Exer-4 Treadmill for Rats | Columbus Instruments | 96157-2 | Columbus has a variety of treadmills for animals with varying numbers of lanes and other options such as metabolic measurements |
| Animal Activity Meter: Opto-Varimex 4-Auto Track | Columbus Instruments | 0170-R4 | Columbus has several options for activity chambers with varying arena sizes, beam spacing, and sensors |
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