분리 및 설치류 대동맥 절제; 심혈관 질환의 연구에 다목적 기술
Summary
Pathology of the aorta can lead to severe morbidity and mortality, therefore research of disease progression and potential therapies is warranted. Here, we present a protocol to isolate and excise the murine aorta to aid researchers in their investigation of cardiovascular disease.
Abstract
Cardiovascular disease is a broad term describing disease of the heart and/or blood vessels. The main blood vessel supplying the body with oxygenated blood is the aorta. The aorta may become affected in diseases such as atherosclerosis and aneurysm. Researchers investigating these diseases would benefit from direct observation of the aorta to characterize disease progression as well as to evaluate efficacy of potential therapeutics. The goal of this protocol is to describe proper isolation and excision of the aorta to aid investigators researching cardiovascular disease. Isolation and excision of the aorta allows investigators to look at gross morphometric changes as wells as allowing them to preserve and stain the tissue to look at histologic changes if desired. The aorta may be used for molecular studies to evaluate protein and gene expression to discover targets of interest and mechanisms of action. This technique is superior to imaging modalities as they have inherent limitations in technology and cost. Additionally, primary isolated cells from a freshly isolated and excised aorta can allowing researchers to perform further in situ and in vitro assays. The isolation and excision of the aorta has the limitation of having to sacrifice the animal however, in this case the benefits outweigh the harm as it is the most versatile technique in the study of aortic disease.
Introduction
대동맥 산소화 된 혈액과 신체의 다른 부분들과 유사한 몸체 공급 심혈관 기능의 중추적 인 역할을하는 질병에 민감하다. 일반 대동맥 질환 다이어트, 흡연, 앉아있는 생활 습관 하나를 포함하여 유전 적, 환경 적 요인의 결과이다 죽상 동맥 경화증과 동맥류를 포함한다. 죽상 경화증은 전형적 만성 고지혈증이있는 환자에서 발견 대동맥 벽 칼슘 및 지질 계 플라크의 침착이다. 궁극적 세 동맥류 파열로 이어질 수 대직 다음 대동맥과 용기 벽의 박막화의 구성 부품의 분해에 의해 특징 지어진다.
동물 모델은 질병과 잠재적 치료 효과의 메커니즘을 연구하는 데 중요한 도구입니다. 심혈관 연구에 사용 된 일반적인 동물 모델은, 구체적으로는 혈관 및 대사 장애를 조사 조회예컨대 아포지 단백질 E 유전자 녹아웃 및 저밀도 지단백질 수용체 유전자 녹아웃 마우스 (4)와 같은 지질 수준을 변경할 수있는 유전자 변형 마우스를 포함한다. 질병 및 치료의 효능을 평가하는 메커니즘 방법 중 대부분은 대동맥의 분리 및 절제를 포함한다.
대동맥 지역화 및 격리되면, 형태 계측 학적 분석은 동맥류의 존재하에, 일반적으로 직경 5 이상, 50 % 증가로 정의 된 바와 같이 결정될 수있다. 계내 분석 필요가 완료된 후, 대동맥을 적출 추가 분석 할 수있다. 절개 된 대동맥 단백질 및 / 또는 유전자 발현 분석법 또는 분자 연구를 수행 할 수있는 냉동 플래시 4 % 파라 포름 알데히드를 사용하여 고정 이상, 매립 단면 조직 학적 분석을 위해 염색. 대동맥의 조직 학적 분석은 구조 저하, 플라크 형성하고, 백혈구의 침투와 같은 대동맥 질환의 공통적 인 특징을 보여줄 수있는 <SUP> 6,7. 또한 대동맥 절개이어서 관내 연구 (7)의 다양한 사용될 수 내피 및 평활근 세포를 포함한 일차 세포주를 분리 할 수있다.
현재, 대동맥 질환이 심도있는 특성을 제공 할뿐만 아니라 추가로 심혈관 질환을 연구하는 도구와 연구자를 제공 할 다른 방법이 없습니다. 자기 공명 영상, 컴퓨터 단층 촬영과 같은 초음파 이미징을 그러나 이것은 작은 동물 어렵고 적절한 기술 취득 장치 8 비싸 형태학 대동맥을 평가하는 가장 가까운 방법이다. 불멸화 세포주는하지만이 세포의 인공 자연 세포 생존 구간 및 아폽토시스 9 효과를 연구에 제한되는 질병의 치료 효능의 잠재적 기전을 조사하기 위해 구입할 수있다.
의 전반적인 목표이 원고는 심혈관 질환의 조사에 쥐의 대동맥의 무균 분리 및 절단을 입증하는 것입니다.
Protocol
Representative Results
Discussion
Aortic disease can lead to significant systemic pathology and possibly death in severe cases. Treatment options are currently limited therefore continued research in the field is necessary10. Murine models are ideal to further study disease progression and potentially therapeutic options4. Therefore, the successful completion of the method described in this manuscript will provide investigators with the tools to measure disease progression and drug efficacy.
This techniq…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
저자는 어떤 승인이 없습니다.
Materials
| Name of Reagent/ Equipment | Company | Catalog Number | Comments/Description |
| Isoflurane | Med-Vet International | #RXISO-250 | |
| 70% Ethanol | Fisher | 07-678-001 | |
| Phosphate buffered saline | Sigma Aldrich | P5368-10PAK | |
| Surgical Tape | 3M | 1527-1 | |
| Sterile Gauze | Dukal Corporations | 1312 | |
| 25 Gauge Needle | BD | 305122 | |
| 10ml Syringe | BD | 309604 |
References
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