Summary
The goal of this manuscript is to describe the steps required to perform a kidney transplant in a mouse, paying particular attention to the details of the arterial anastomosis.
Abstract
The first mouse kidney transplant technique was published in 19731 by the Russell laboratory. Although it took some years for other labs to become proficient in and utilize this technique, it is now widely used by many laboratories around the world. A significant refinement to the original technique using the donor aorta to form the arterial anastomosis instead of the renal artery was developed and reported in 1993 by Kalina and Mottram 2 with a further advancement coming from the same laboratory in 1999 3. While one can become proficient in this model, a search of the literature reveals that many labs still experience a high proportion of graft loss due to arterial thrombosis. We describe here a technique that was devised in our laboratory that vastly reduces the arterial thrombus reported by others 4,5. This is achieved by forming a heel-and-toe cuff of the donor infra-renal aorta that facilitates a larger anastomosis and straighter blood flow into the kidney.
Introduction
Desde 1973, o modelo de transplante renal em ratos tem sido um valioso instrumento de pesquisa, mas problemas técnicos têm dificultado seu uso generalizado. Ao longo dos anos, vários trabalhos têm sido publicados detalhando melhorias / aperfeiçoamentos a este procedimento. Como um modelo de transplante de órgãos sólidos, principalmente vascularizado este procedimento é, provavelmente, perdendo apenas para o modelo de transplante cardíaco heterotópico, que também foi concebido pelo laboratório Russell em 1973 6. Ambos os modelos se prestam à investigação sobre respostas de rejeição alogênicos, o desenvolvimento da função retardada do enxerto e lesão por isquemia-reperfusão.
Um dos problemas mais comuns que devem ser comunicadas com transplante renal é a relativamente alta incidência de trombose arterial 4,5,7 que também experiente em nosso laboratório. Por isso nos propusemos a realizar uma revisão da literatura sobre a formação de trombos e, possivelmente, encontrar a causa deste problema técnico e também para elaborar umsolução possível. A causa mais provável de trombose é o caminho tortuoso tanto o sangue toma da aorta do receptor, para a aorta do doador renal em seguida, para a artéria renal dador. Este caminho provoca turbulência na artéria renal, o que pode conduzir à activação de plaquetas e formação de trombos. Com base nas observações recentes e uma pesquisa da literatura relevante 14/08 que surgiu com uma nova técnica que reduziu trombose para 0%.
A técnica descrita aqui varia de técnicas previamente relatados na formação de um arterial punta-taco manguito que as instalações melhora a circulação sanguínea e reduz significativamente a formação de trombos. A braçadeira é formada pela divisão da aorta infra-renal através da face do óstio da artéria renal com um ângulo inferior a 45 ° em relação ao eixo longitudinal da aorta (Figura 1A e 1B). Isto resulta numa braçadeira aproximadamente 2 mm de comprimento. Um patch Carrel venosa é formado por transecting o renal veia para a VCI aumentando assim o diâmetro da braçadeira. A infra-renal de doadores abdominal aorta punta-taco manguito é de ponta a lado anastomosada à aorta abdominal destinatário ea veia renal doador / patch IVC é de ponta a lado anastomosado ao destinatário abdominal veia cava inferior (VCI) . O ureter é então introduzida e ancorada à bexiga tal como descrito por Han et al 3.
Para este estudo transplantes não tratados apenas com tempo de isquemia quente (ie., Sem isquemia fria) são comparados. Neste caso isquemia quente refere-se ao tempo da cessação do fluxo sangüíneo através do rim de doador (passo 1.11 abaixo) e reperfusão do enxerto no receptor (passo 2.11 abaixo). Isquemia fria refere-se ao tempo que o rim não perfundido é e é mantido em armazenamento a frio, até ao início do procedimento de implante.
Protocol
Representative Results
Discussion
Dominar esta técnica de transplante é difícil, mas uma vez conseguido isso é uma ferramenta de pesquisa muito poderoso. O cirurgião paciente / pesquisador será recompensado pela atenção aos detalhes e consistência da técnica, que é a chave para dominar qualquer procedimento cirúrgico, ainda mais em pequenos modelos animais. As dificuldades técnicas de dominar o transplante de rim do rato são muitas dobras, e é altamente provável que a experiência em outros modelos pequenos transplante animal deve ser ad…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Este trabalho foi apoiado em parte por 1R03DK096151.
Materials
| Instrument | Roboz # | Fine Science Tools # | Arosurgical # |
| Straight micro-dissecting forcep #5 | RS-5015 | 11295-51 | |
| Curved micro-dissecting forcep #7 | RS-5047 | 11297-00 | |
| Curved serrated forcep | RS-5137 | 11052-10 | |
| Vannas micro-dissecting scissors, short | RS-5610 | 09.140.08 | |
| Micro-dissecting scissors, straight, sharp, long | 11.602.11 | ||
| Micro spring handle needle holder | 11.549.15 | ||
| Straight mosquito forcep | 91308-12 | ||
| Micro-dissecting scissors, straight, blunt | RS-5962 | 14078-10 | |
| Micro-dissecting scissors, curved, blunt | RS-5981 | 14079-10 | |
| Micro retractor | RS-6540 | ||
| Instrument tray, 10” x 6 ½” x ¾” | RT-1350S | ||
| Silk suture, 5/0, 22.5m spool | 18020-50 | ||
| Suture | |||
| 10/0 nylon | T4A10Q07 | ||
| 5/0 silk | E19A05N | ||
| Gloves | Drapes | ||
| Biogel from Medex Supply | Precept, #64-9012-9 | ||
| Syringes | Cotton applicators | ||
| B-D 1cc insulin, #329424 | Fisher-brand, #23-400-100 | ||
| Povidone-Iodine swabs | |||
| PDI, #B40600 | |||
| 4/0 Cotton ties | |||
| Domestic cotton autoclaved with instruments | |||
References
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