Um método para avaliar as propriedades de reforço de etanol em ratos sem água Privação, Sacarina desvanecimento ou treinamento de Acesso Ampliado
Summary
Este protocolo descreve um método novo e eficiente para iniciar rapidamente operante de responder por etanol em ratos, que, contrariamente aos métodos convencionais, não necessitam de privação de água ou sacarina / sacarose desvanecimento para iniciar a responder.
Abstract
métodos de auto-administração oral operantes são comumente usados para estudar as propriedades de reforço de etanol em animais. No entanto, os métodos convencionais exigem a sacarina / desvanecimento sacarose, privação de água e / ou formação estendida para iniciar responder operante em ratos. Este artigo descreve um método novo e eficiente para iniciar rapidamente responder operante para o etanol que seja conveniente para experimentadores e não necessita de privação de água ou sacarina / desvanecimento sacarose, eliminando assim a confundem potencial do uso de adoçantes em etanol estudos de auto-administração operante. Com este método, ratos Wistar tipicamente adquirir e manter a auto-administração de uma solução de etanol a 20% em menos de duas semanas de formação. Além disso, as concentrações de etanol no sangue e recompensas são correlacionados positivamente para uma sessão de auto-administração 30 min. Além disso, a naltrexona, um medicamento aprovado pela FDA para a dependência do álcool que tem sido mostrado para suprimir a auto-administração de etanolem roedores, dependente da dose, diminui o consumo de álcool e a motivação para consumir álcool em ratos auto-administração de 20% de etanol, validando assim a utilização deste novo método para estudar as propriedades de reforço de álcool em ratos.
Introduction
O desenvolvimento de modelos animais para estudar os efeitos reforçadores da droga provou uma ferramenta importante para estudar a toxicodependência humano. Mais especificamente, a auto-administração operante é um modelo comportamental amplamente utilizado que é um dos meios mais eficazes para a avaliação dos efeitos de reforço positivo de uma solução de etanol consumida por via oral. Um problema inicial com o desenvolvimento de um modelo desse tipo era o gosto aversivo primário de altas concentrações de etanol para a maioria dos roedores, um fenómeno que também é compartilhada em seres humanos com pouca ou nenhuma experiência com o álcool 1. Um protocolo padrão para superar essa barreira exige a privação de água e / ou a sacarina ou sacarose desbotamento durante a aquisição e manutenção de auto-administração. No entanto, estas duas abordagens não são vantajosas. Eles exigem longos períodos de treinamento para iniciar simplesmente respondendo para o etanol e obter uma taxa de sucesso relativo de aquisição. A utilização de adoçantes também introduz uma polarização potencial ema interpretação dos dados auto-administração. Essas limitações não se aplicam com o protocolo seguinte.
Resumidamente, Sansão e colegas 2 mostraram que a dissolução de etanol em uma solução doce de 20% de sacarose e, em seguida, desaparecendo a doçura ao longo de 4 semanas de treinamento é necessário para iniciar a responder por 10% de etanol em água. Além disso, a ingestão de etanol fiável é geralmente conseguido em 6 a 8 semanas 1-3. Esta abordagem é altamente problemática. Primeiro, exige longos períodos de treinamento antes de os investigadores podem começar a medir o etanol auto-administração. Em contraste, intravenosa auto-administração de cocaína ou heroína requer 0 – 1 dias de treinamento pré-droga em uma alavanca de entrega de alimentos em animais de produção restrita, e estável de responder por droga é muitas vezes conseguida em 10 – 12 dias 4,5. Uma outra limitação deste método é o facto de a sacarina e sacarose são altamente compensador para ratos e induzir padrões de activação cerebral similar para drogas de abuso, introduzindo assim o potencial para confunde em etanol auto-administração estuda 6-9. Finalmente, os ratos adquirem auto-administração de uma solução de etanol usando este método mostra variabilidade na aquisição e resposta taxa de 1,10, com uma proporção substancial de ratos consistentemente excluídas experimentos devido a aquisição bem sucedida e / ou taxa de resposta insuficiente.
Por outro lado, com este protocolo, apresentamos um método simples mas eficaz para a aquisição e manutenção de auto-administração oral de uma de etanol a 20% em solução de água que não necessitam de privação de água, sacarose / desvanecimento sacarina ou formação de acesso estendida. Um estudo recente constatou que a auto-administração por via oral de etanol exibe uma curva de resposta à dose em forma de U invertido com maior ingestão de etanol durante a auto-administração, a uma concentração de etanol a 20%, proporcionando assim uma base lógica para a selecção de uma solução de etanol 20% no nosso experimenprojeto ental 11.
Protocol
Representative Results
Discussion
Com este protocolo, estamos apresentando um novo método para adquirir e manter a auto-administração oral estável de 20% de etanol em ratos que, contrariamente aos modelos clássicos de etanol auto-administração, não requerem o uso de privação de água, formação de acesso estendida, ou sacarina / sacarose 12 desvanecimento. Além disso, a naltrexona, um medicamento atualmente aprovado pelo FDA para dependência de álcool, diminui com sucesso álcool auto-administração e a motivação para consumi…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Este trabalho foi financiado pelo Conselho de Pesquisa sueco.
Materials
| Extra Tall MDF Sound Attenuating Cubicle, Interior: 22"W x 22"H x 16"D | Med Associates Inc. | ENV-018MD | |
| Extra Tall Modular Test Chamber with modified Top, Waste Pan and Photobeam | Med Associates Inc. | ENV-007CT-PH | |
| Stainless Steel Grid Floor for Rat or Small Primate | Med Associates Inc. | ENV-005 | |
| Retractable Lever | Med Associates Inc. | ENV-112CM | 2 by SA chambers |
| Stimulus Light, 1" White Lens, Mounted on Modular Panel | Med Associates Inc. | ENV-221M | 2 by SA chambers |
| Dual Cup Liquid Receptacle with 18ga Stainless Steel Pipes | Med Associates Inc. | ENV-200R3AM | |
| Single Speed Syringe Pump, 3.33RPM | Med Associates Inc. | PHM-100 | |
| Liquid Delivery Kit | Med Associates Inc. | PHM-122-18 | |
| SmartCtrl 8 Input, / 16 Output Package | Med Associates Inc. | DIG-716P2 | |
| MED-PC software | Med Associates Inc. | SOF-735 | |
| http://www.mednr.com/ | Med Associates Inc. | A website that is open-source and has been created to offer researchers a place to exchange MEDState Notation code | |
| Kendall Monoject 20cc Syringes, Regular Luer Tip | VWR International | MJ8881-520657 | |
| Ethanol, Pure, 190 Proof (95%), USP, KOPTEC | Decon Labs | 2801 | |
| 0.9% Sodium Chloride Injection, USP | Hospira | 0409-4888-50 | |
| Naltrexone hydrochloride | Sigma Aldrich | N3136-1G | |
| 23 G BD PrecisionGlide Needles | BD | 305145 | |
| Minivette POCT 50 µl, K3 EDTA | Sarstedt | 17.2113.150 | For capillary blood collection |
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