Murine experimentellen Modell der ursprünglichen Tumor-Entwicklung und Peritoneal Metastasierung<em> über</em> Orthotopische Inokulation mit Ovarialkarzinomzellen
Summary
Um den mehrstufiger Prozess der Peritonealdialyse Verbreitung von Ovarialkarzinomen klären, die aktuelle Studie stellt eine murine experimentellen Modell der ursprünglichen Tumorentstehung und Metastasierung Peritonealdialyse über orthotoper Impfung mit diesen Tumorzellen.
Abstract
Epithelial Ovarialkarzinom (EOC) mit einer schlechten Prognose verbunden, weil es Peritonealdialyse Verbreitung zeigt. Um die Vorhersage zu verbessern, ist es wichtig, peritoneal Verbreitung zu steuern. Es ist jedoch noch unklar, wie Tumorzellen von primären Läsionen lösen und an die Mesothel befestigen. Die Einrichtung eines geeigneten Tiermodell wird benötigt , um ein Verständnis des Mechanismus der Peritonealdialyse Verbreitung in vivo zu gewinnen. In der vorliegenden Studie, führen wir den Prozess von der lokalen Injektion von EOC Zellen in die murine ovarian Oberfläche zur Entwicklung von Metastasen, einschließlich des Peritoneums und der entfernten Organen. Weibliche Nacktmäuse (Balb / c nu / nu) bei 8 Wochen alt verwendet wurden. Unter einem mikroskopischen Gesichtsfeld, EOC – Zellen (1 × 10 5 Zellen / ul Medium-extrazellulären Matrix (ECM) -basierte Hydrogel / einseitige Ovar / Maus) in murine Ovarien durch eine retroperitoneale Ansatz von der dorsalen Flanke injiziert. Dieses vorgeschlagene Verfahren ist ein less-invasive Verfahren für die Maus und minimiert Schäden an den Ovarien. Hier beschreiben wir die methodischen Schritte in der Entwicklung des ursprünglichen und des metastasierenden Tumorbildung von EOC.
Introduction
Epithelial Ovarialkarzinom (EOC) ist für die höchste Rate der durch Krebs verursachten Todesfälle bei gynäkologischen Malignomen 1. EOC ist mit einer schlechten Prognose verbunden, in erster Linie wegen seiner späten Symptomatologie und wird oft mit mehreren intraperitoneale Disseminationen und Fernmetastasen 2-4 verbunden. Peritoneal Verbreitung ist ein mehrstufiger Prozess. Erstens lösen Tumorzellen von den primären Läsionen und in die Bauchhöhle wandern. Wenn die Tumorzellen in die Bauch Mesothelium befestigen, beginnen sie Gewebe durch die Mesothel 5,6 einzudringen. Um die Tumorbiologie (zB Tumorprogression und therapeutische Reaktion), Maus – Modelle bieten eine Fülle von Informationen besser zu verstehen. A Xenotransplantat mit menschlichen Krebszellen ist für Mausmodelle, bei denen menschliche Krebszellen werden subkutan, intraperitoneal, intravenös und orthotop weit verbreitet. Ein Tiermodell mit einem orthotop grafted Tumor kann effizienter und die Ergebnisse genau zu erzeugen, das die Tumorumgebung beim Menschen im Vergleich zu einem Tiermodell mit einem heterotop gepfropft Tumor widerspiegeln. Daher ist für viele menschliche Tumore haben orthotoper Transplantationsmodellen wurden 7-11 etabliert.
Hier beschreiben wir die orthotoper Inokulation von menschlichen EOC Zellen durch einen retroperitonealen Zugang von der dorsalen Flanke, die Invasivität im Vergleich zu ventralen Impfung begrenzt ist. Diese Technik kann eine Vielzahl von nützlichen Informationen über EOC bereitzustellen, insbesondere der Mechanismus der intraperitoneale Verbreitung.
Protocol
Representative Results
Discussion
Tiermodelle sind wichtig, die Mechanismen der Tumorentstehung, Progression, Metastasierung und Wirksamkeit von Medikamenten gegen Krebszellen zu analysieren. Mäuse menschlichen Zellen Eierstockkrebs haben Lager auch als Tiermodell verwendet. Hier beschreiben wir ein weniger invasives Verfahren zur Verabreichung von Eierstocktumorzellen in einem orthotopischen Ort. Unter Verwendung dieses Verfahrens Inokulation in den Ovarien durch einen retroperitonealen Zugang von der dorsalen Flanke bietet erhebliche Vorteile gegenü…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Die Autoren danken den Mitgliedern der Abteilung für Geburtshilfe und Gynäkologie und Krebsbiologie für ihre hilfreichen Diskussionen und technische Hilfe. Diese Studie wurde von einer japanischen Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaft (JSPS) Zuschuss-in-Aid for Scientific Research unterstützt (15K15604; H. Kajiyama).
Materials
| Matrigel matrix | BD | 354234 | ECM-based hydrogel |
| Insulin syringe | TERUMO | SS-05M2913 | 1/2cc, 29Gx1/2" |
| Suturing needle with suture | 11mm, 3/8, Nylon6-0 | ||
| Reflex 7mm Wound Clip Applier | CellPoint Scientific | 204-1000 | |
| Reflex 7mm wound clips | CellPoint Scientific | 203-1000 |
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