מחקר זה מדווח על שיטה מוצלחת של תא סטרומה נגזרת רקמת שומן endoscopical (ADSC) -תווים השתלה למניעת היצרות ושט לאחר דיסקציה submucosal אנדוסקופית מורחבת (ESD) במודל של חזירים.
בשנים האחרונות, מבנה התא גליון דרבן עניין רחב ברפואה רגנרטיבית, במיוחד עבור ניתוחים שיקומיים. פיתוח הטכנולוגיות מגוונות שילוב תאי סטרומה רקמת נגזרות שומן (ADSCs) עם חומרים ביולוגיים שונים הוביל לבניית סוגים רבים של תחליפי רקמות מהונדסות, כגון עצם, סחוס, ורקמות שומן מן המכרסם, חזירי, או ADSCs אדם. דיסקציה submucosal אנדוסקופית של הוושט המורחבת (ESD) אחראי להיווצרות היצרות הוושט. מניעת היצרות נותרת מאתגרת, ללא טיפולים יעילים זמינים. מחקרים קודמים דיווחו על האפקטיביות של השתלת תאי גיליון רירית במודל כלבים ובני אדם. ADSCs מיוחסת תכונות אנטי דלקתיות, אפקטי אפנון חיסון מקומיים, נאווסקולריזציה אינדוקציה, ויכול בידול לתוך mesenchymal שושלות הלא mesenchymal. במחקר המקורי זה מתאר את tra אנדוסקופיתnsplantation של מבנה רקמות מהונדסות ADSC למנוע היצרות הוושט במודל החזירים. בונת ADSC הורכבה משתי יריעות ADSC אלוגנאית שכבתיות על אחד את השני על קרום תומך נייר. ADSCs תויג עם fluorophore PKH67 לאפשר endomicroscopy ליזר confocal מבוסס בדיקת ניטור (pCLE). ביום ההשתלה, ESD 5 סנטימטר היקפי-חמה ידועה לגרום היצרות ושט בוצע. בעלי חיים מיד הושתלו אנדוסקופית עם 4 מבנים ADSC. ההידבקות המוחלטת של מבני ADSC הושגה לאחר 10 דקות של יישום עדין. בעלי חיים הוקרבו ביום 28. כל בעלי החיים הושתלו בהצלחה. השתלה אושרה ביום 3 עם הערכת pCLE חיובית. בהשוואה לבעלי חיים מושתלים, חיות ביקורת פתחו חומרות חמורות, עם התפתחות רקמה גדולה fibrotic, צרות עיכול תכופות יותר, ועלייה במשקל מופחת. במודל שלנו, יושתל allogeniג ADSCs, מאורגן בסדיני תא כפולים, לאחר ESD המורחבת היה מוצלח קשר חזק עם שיעור היצרות ושט תחתון.
הנהלת גידולים בושט שטחי השתנתה עם התפתחות טכניקות אנדוסקופית חדשה. כיום, כריתה אנדוסקופית הוא טיפול הקו הראשון. ואכן, היא מזוהה עם שיעורי תחלואה ותמותה נמוכים יותר מאשר ניתוח עם תוצאות אונקולוגי שווות 1, 2, 3. כריתה הרירית אנדוסקופי (EMR) ו כריתה submucosal אנדוסקופית (ESD) הן טכניקות ביותר בשימוש נרחב. במקרה של גידול שטחי מורחב, ESD היא מועדפת. לעומת EMR, ESD מאפשר כמקשה resectioning, ללא קשר לגודל הנגע ולעצב 4, 5, 6. הסיבוך העיקרי של עיכוב ESD הוא היווצרות היצרות הוושט, אשר מתרחשת בדרך כלל בין שבוע לשבועיים לאחר כריתה. מחקרים שפורסמו לאחרונה הראו היווצרות צרות מתואמת אלגודל של הכריתה. אגודת אנדוסקופי היפנית ממליצה הימנעות ESD מגודלו ¾ של היקף הוושט כי הם קשורים עם התפתחות היצרות בלמעלה מ -90% ממקרים ואחראים הצרות אכילה חמורות והידרדרות מרכזית באיכות החיים.
מניעת היצרות ושט נותרת מאתגרת. מנגנוני המעורבים היווצרות צרות הם רק מוכרים חלקית. צרות תצורות נראית לנבוע התאחדות שני מנגנונים שונים: (1) גיוס הסלולר פרו-דלקתי (2) פיתוח סיסטיק מוגזם 7. טיפולים מונעים מספר הוצעו. עם זאת, התוצאות היו לא מספקות, עם יתרון קטן ותופעות לוואי חמורות 8, 9. לאחרונה, צוות יפני, Ohki et al. , הציע להשתיל גיליון תא בודד-שכבה של תאים ברירית הפה עצמיים לתוך esophצלקת ageal. השתלה בוצעה מייד לאחר ESD 10, 11. הם הדגימו את היעילות של גישה חדשנית זו, תחילה מודל כלבי ואחר כך בחולים.
רקמת הנגזרות השומן בתאי סטרומה (ADSCs) מבטיחים ברפואה רגנרטיבית. בקשתי בכמה תחומים הוכיח תוצאות מעניינות, במיוחד בתהליך ריפוי הפצע. טיפול ADSC מציע מספר יתרונות, כי התאים הם מבודדים בקלות ומזוהות עם תכונות אנטי-דלקתיות, תופעות מערכת חיסוניות מקומיות, נאווסקולריזציה אינדוקציה, ויכול בידול לתוך mesenchymal שושלות הלא mesenchymal 12, 13, 14.
במחקר קודם, צוות שלנו הוכיח את היעילות של השתלת אנדוסקופית כפולה ADSC גיליונות קודם היצרות ושטention לאחר ESD ממושכת מודל החזירים 15. במאמר זה, דיווחים על בניית ADSC גיליון וטכניקת השתלת endoscopical מוצגים.
במודל חזיר זה, השתלת ADSC הגיליון הייתה מוצלחת מבחינה טכנית, ואת הערכת pCLE ובחי מותרת לניטור engraftment התא. הערכות קליניות, endoscopical, רדיולוגי, היסטולוגית הוכיחו את היעילות של גיליון ADSC אנדוסקופית למניעת היצרות ושט לאחר ESD המורחבת.
הש…
The authors have nothing to disclose.
This study was supported and funded by the Avenir Foundation (Fondation de l’Avenir, 255 rue de Vaugirard, 75719 Paris cedex 15, Paris, France). This study would never have been conducted without the precious help of the veterinary team of the Laboratory of Biosurgical Research from the Alain Carpentier Foundation.
Transparent endoscopic cap Q180 compatible | Olympus Optical Co | ||
GIF-Q180 gastroscope | Olympus Optical Co | ||
Videoscope System Exera II | Olympus Optical Co | ||
Injection needle 18 G | Olympus Optical Co | ||
Electrosurgery unit ERBE ICC 350 | ERBE Technology | ||
Indigo carmin 1% | Life | ||
Endoscopic hybrid knife | Life | ||
Minisonde Z pCLE green probe | Mauna Kea Technology | You must learn how tu use the probe. The manipulation could be difficult | |
Fetal bovine serum | Sigma Aldrich | 12105C | |
Trypsin | Sigma Aldrich | T146 | |
Alpha minimum essential medium | Thermo Fisher | 22561-021 | |
Phosphate-Buffered Salines | Thermo Fisher | 10010-023 | |
PKH67 dye kit | Sigma Aldrich | Mini67-KT | |
12-well temperature responsive cell culture dish | Upcell Thermo Scientific | 174900 | Feel the weel with 4 mL standard medium culture 30 minutes before seeding cells |
Esomeprazole 40 mg | Biogaran | ||
Moprhine sulfate 50 mg/ mL | Lavoisier | ||
Amoxicilline 1 g | Biogaran | ||
Ketamine 250 mg/5 mL | Panpharma | ||
Propofol 10 mg/ mL | Fresenius | ||
Hydrophobic paper | Carrefour |