Summary

알레르기 성 비염 및 / 또는 천식을 앓고있는 중국 남부의 잔디 꽃가루 알레르겐에 대한 연구를위한 성분 분석 진단법

Published: June 04, 2017
doi:

Summary

이 연구는 알레르기 성 비염 및 / 또는 천식을 앓고있는 중국 남부의 환자 집단에서 꽃가루 알레르겐에 대한 민감성을 연구하기 위해 성분 분석법을 사용하는 프로토콜에 대해 설명합니다.

Abstract

잔디 꽃가루에 과민 반응은 알레르기 성기도 질환에 대한 세계적 위험을 부과합니다. 예방은 꽃가루 알레르겐에 대한 지역 조사에 의존하지만이 주제에 관한 데이터는 중국 남부 지역에 한정되어 있습니다. 입수 가능한 모든 자료는 자체 신고 설문지, 피부 찌름 검사 및 원유 추출물을 사용한 총 IgE 또는 특이 IgE 검사에 의해 얻어졌다. 여러 가지 이유로 이러한 방법은 신뢰할 수 없습니다. 알레르기 성 비염 및 / 또는 천식을 동반 한 광저우 광역 (중국 남부 최대 도시 및 그 외곽)의 환자 집단에서 버뮤다 풀, 티모시 잔디 및 Humulus scandens 알레르겐에 대한 혈청 sIgE 반응성을 완전 자동 면역 분석기를 구성 요소로 사용하여 검사했습니다 해결 된 진단 (CRD) 도구.

처음으로 알레르기 비염 및 / 또는 천식이있는 중국 남부에서 버뮤다 풀 sIgE 양성율이 상당히 높은 것으로 나타났습니다. 이 환자들에게서 미묘한 감작의 유행후자의 두 가지가이 지역에서 공통적이지 않기 때문에 교차 반응 (cross-reactivity)으로 인해 발생할 수있는 티모시 잔디 (Timothy grass)와 흄스스런 스 (Humulus scandens) 에 주목했다. 이것은 또한 알레르겐 성분의 검출에 의해 뒷받침되었다.

완전 자동화 된 면역 분석 분석기는 시간이 지남에 따라 지역, 실험실 및 기관간에 만족할만한 일관성을 제공 할 수 있습니다. 장비의 자동성은 CRD의 출현 전에 쉽게 밝혀지지 않았을 표준화 된 탐지를 가능하게 할 수 있습니다.

이것은 중국 남부의 잔디 꽃가루 알레르겐에 대한 민감성을 조사하기 위해 CRD 접근법을 사용하는 연구입니다. 그것은 문헌의 현재 증거에 추가됩니다. 이러한 연구 결과를 검증하기 위해서는 앞으로의 연구가 필요합니다. 그러나 CRD가 유용한 도구 임에도 불구하고 완전 자동화 된 면역 분석기로 작성된 결과는 다른 검사실 조사, 임상 평가 및 의사 전문 지식을 대신해서는 안됩니다.

Introduction

잔디 꽃가루는 면역 글로불린 E (IgE) 관련 알레르기의 거의 50 %를 차지하고 공기 중의 특성 때문에 알레르기기도 질환, 특히 천식과 알레르기 성 비염 1 , 2 , 3 , 4 의 세계적 위험을 부과합니다. 지역의 풀 꽃가루 알레르기에 대한 예방은 꽃가루 알레르겐의 지역 분포에 대한 정보에 의존합니다. 불행히도, 감작 알레르기 항원의 스펙트럼은 지역마다 다르며 일반적으로 지역 특이성으로 알려져 있습니다.

광대 한 동아시아 영토 인 중국에서는 초반 꽃가루 감작의 지역 특이성이 지난 수십 년 동안이 나라 남부에서 현재 이용할 수있는 제한된 자료에 의해 더욱 복잡해졌습니다. 이러한 자료 부족으로 전체적인 꽃가루 감각을 나타내는 데 어려움을 겪었습니다이 큰 나라에서의 화법 6 . 또한 중국 남부 지역의 매우 제한된 자료는 주로자가 신고 설문지, 피부 검사 (실험실 혈청 검사보다는), 총 IgE 측정 (알레르기 항원 특이 IgE (sIgE)보다는), sIgE 검출 (알레르기 항원 알레르겐 성분 분자보다는).

특정 알레르겐이 관련되어있을 때 알레르기 증상의 자체보고는 신뢰할 수 없습니다. 피부 찌름 검사는 광범위하게 접근 할 수 있지만 비 표준화 된 알레르겐 추출물의 사용을 포함하며, 그 자체가 결과 해석을 혼동시키는 다른 민감성 요소를 포함 할 수 있습니다. 피부 단자 검사의 신뢰성은 또한 알레르기 전문의 나 전문 간호사의 숙련 된 조작, 최근의 히스타민 사용, 환자의 순응도 (때로는 어린 어린이에게는 매우 어려움)에 따라 결정됩니다. 총 IgE는 알레르기 선별에 유용하지만 th를 현명하게 결정하지는 않습니다.환자의 알레르겐을 유발합니다. 더욱이, 거의 모든 알레르겐은 수많은 알레르겐 성분 분자를 포함합니다. 주요 성분 ( 예 : 집먼지 진드기의 Der p 1과 Der p 2)에 대한 민감성은 "진정한"알레르기 (다른 알레르겐과의 교차 반응으로 인한 위양성보다는 특정 알레르겐에 대한 알레르기)를 나타내지 만 감작 ( 즉, 교차 반응성 Der p 10, 트로포 미오신)은 그렇지 않을 수 있습니다.

CRD (component-resolved diagnostics)가 도입되기 전에 이러한 실망스러운 결과로 중국에서의 알레르겐 연구가 저해되었습니다. CRD는 재조합 또는 정제 된 알레르겐 분자를 사용하여 알레르겐의 성분을 정확하게 검출함으로써 쉽게 측정 가능하고 특징화할 수있는 측정을 가능하게합니다. 지난 수십 년 동안 알레르기 연구는 필연적으로 여러 가지 무관 한 구성 요소를 포함하는 알레르겐의 조 추출물을 자주 사용했습니다. 이 공동의 많은지지자는 불활성이지만 때로는 혼란스런 긍정적 반응으로 이어질 수도 있습니다. CRD에서 재조합 또는 정제 된 알레르겐 분자를 사용하면이를 회피 할 수 있으므로 시험의 정확성이 향상됩니다. microarrays에서 가공 될 때, CRD 접근은 빨리 개인적인 주제에있는 알레르겐 분자의 수백에 과민성을 검열하거나 확인한다. 중국 남부의 잔디 꽃가루 감작에 대한 잘 설계된 CRD 연구는 현재 부족합니다. 이상적으로, 그러한 연구는 상당한 지리적 범위의 지역 인구를 포함해야하며, 중국에서 일반적으로보고 된 잔디 꽃가루를 고려해야하며 위에서 언급 한 기술적 측면을 언급해야합니다. 실용 수준의 임상 관련성을 확보하고 혈청 검체의 징집을 용이하게하기 위해 흡입 알레르기 항원 인 잔디 꽃가루에 대한 민감성에 대한 조기 조사는 일반인보다는 알레르기 성 호흡기 질환 환자에게 초점을 맞출 수 있습니다.

이 작품은CRD 접근법을 사용하여 알레르기 성 비염 및 / 또는 천식을 앓고있는 광저우 광저우 (중국 광역시 및 그 외곽 지역) 환자에서 버뮤다 풀, 티모시 잔디 및 Humulus scandens 에 대한 혈청 sIgE 반응성을 테스트하는 데 사용되었습니다. 중국 남부의 아열대 및 온대 잔디 꽃가루에 대한 감작에 대한 이러한 발견은 현재 문헌에서 중요한 증거를 추가하고있다.

Protocol

인간 혈청 샘플 사용을 포함한 연구 프로토콜은 광저우 의과 대학의 첫 번째 부속 병원 인 윤리위원회의 승인을 받았습니다. 모든 참가자는 독립적으로 또는 부모 (자녀의 경우 )를 통해 서면 동의서를 제공했습니다. 이 프로토콜은 온라인으로 등록되었습니다 (중국 임상 시험 등록 번호 : ChiCTR-DCC-13004003, http://www.chictr.org/cn/ 참조). 1. 연구 집단의 확인 <p class="jove_conte…

Representative Results

이 연구에 사용 된 완전 자동화 된 면역 분석기는 환자의 혈청 표본에서 관심 분자 (sIgE)와 반응하는 알레르겐 또는 알레르겐 성분을 공유 결합으로 덮은 고상 구조를 가지고 있습니다. 자동 프로그램으로 분석기는 150μL의 헹굼 용액으로 모든 비 특이성 IgE를 세척하고 이것을 5 번 반복합니다. 그런 다음 효소 표지 된 항 -IgE 항체 (50 μL)를 첨가하여 복합체를 만듭니다. 효?…

Discussion

완전 자동화 된 면역 분석 분석기는 시간이 지남에 따라 지역, 실험실 및 기관간에 만족할만한 일관성을 제공 할 수 있습니다. 이러한 자동 절차는 벤치 연구 및 임상 연구를 실질적으로 지원하고, 많은 알레르겐 및 / 또는 알레르겐 성분의 표준화 된 검출을 가능하게하고, CRD의 출현 전에 쉽게 밝혀지지 않았을 가능성이있는 알레르겐 교차 반응을 확인하는 것으로 밝혀졌다. 또한 엄격한 품질 관?…

Divulgations

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

우리는 그림을 준비하는 데 도움을 준 Yueming Su에게 감사드립니다. 이 연구는 광동 과학 기술 재단 (프로젝트 번호 : 2014A020212352), 광저우 교육 국 (1201630044, 1201630393) 및 중국 국립 자연 과학 재단 (NSFC 81572063, NSFC 81601394)의 지원을 받았다.

Materials

ImmunoCAP 1000 Instrument Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 12-3800-01
Phadia Information Data Manager Software Package Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 12-3801-11
Software Package, ImmunoCAP 1000 Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 12-3801-12
g2
(Bermuda grass)
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 14-4131-01
g6
(Timothy grass)
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 14-4100-01
w22
(Japanese Hop)
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 14-4452-01
g216
(nCyn d 1)
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 14-4972-01
g205
(rPhl p 1)
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 14-5234-01
g208
(nPhl p 4)
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 14-5288-01
g215
(rPhl p 5b)
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 14-5338-01
g209
(rPhl p 6)
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 14-5289-01
g210
(rPhl p 7)
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 14-5290-01
g211
(rPhl p 11)
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 14-5291-01
g212
(rPhl p 12)
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 14-5292-01
o214
Cross-reacting carbohydrate determinants (CCDs)
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 14-5339-01
Specific IgE Conjugate 400 Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 10-9310-08
Specific IgE Calibrator Strip Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 10-9459-08
Specific IgE Curve Control Strip Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 10-9312-08
Specific IgE Anti-IgE ImmunoCAP Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 14-4417-01
ImmunoCAP Specific IgE Negative Control Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 10-9445-01
ImmunoCAP Specific IgE Control L Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 10-9528-01
ImmunoCAP Specific IgE Control M Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 10-9529-01
ImmunoCAP Specific IgE Control H Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 10-9530-01
Development Solution Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 10-9439-08
Stop Solution Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 34-2271-58
Washing Solution Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 10-9202-08
FluoroC Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 10-9264-01
Maintenance Solution Kit Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 10-9476-01

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Citer Cet Article
Luo, W., Pan, G., Huang, H., Zheng, P., Wei, N., Zhang, Y., Zeng, G., Sun, B. A Component-resolved Diagnostic Approach for a Study on Grass Pollen Allergens in Chinese Southerners with Allergic Rhinitis and/or Asthma. J. Vis. Exp. (124), e55723, doi:10.3791/55723 (2017).

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