Le modèle de coeur inversé pour la collecte de transudat interstitielle à partir du coeur de rat isolé

Kezhe Tan; Zhaoping Ding; Bodo Steckel; Sonja Hartwig; Stefan Lehr; Xiaoming Deng; Jürgen Schrader

doi:10.3791/55849

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Article de méthode

Le modèle de coeur inversé pour la collecte de transudat interstitielle à partir du coeur de rat isolé

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DOI :

10.3791/55849

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20 juin 2017

Kezhe Tan^*¹^,² , Zhaoping Ding^*¹^,² , Bodo Steckel² , Sonja Hartwig³ , Stefan Lehr³ , Xiaoming Deng¹ , Jürgen Schrader²

¹Department of Anesthesiology, Changhai Hospital, Second Military Medical University, ²Department of Molecular Cardiology, Heinrich Heine University, ³Department of Clinical Biochemistry and Pathobiochemistry, German Diabetes Center, Heinrich Heine University

^* These authors contributed equally

Dans cet article

Résumé

Ce protocole décrit une méthode pour collecter le liquide interstitiel cardiaque à partir du coeur de rat isolé et perfusé. Pour séparer physiquement le transudat interstitiel du perfusat d'effluent veineux coronaire, le coeur perfusé de Langendorff est inversé et le transudat (fluide interstitiel) formé sur la surface cardiaque est recueilli à l'aide d'un cap de latex doux.

Résumé

Le présent protocole décrit une approche unique qui permet la collecte du transudat cardiaque (CT) à partir du coeur isolé et isolé par le sérum physiologique. Après l'isolement et la perfusion rétrograde du cœur selon la technique de Langendorff, le coeur est inversé dans une position à l'envers et est mécaniquement stabilisé par un cathéter à ballonnet inséré dans le ventricule gauche. Ensuite, un mince capuchon en latex - préalablement coulé pour correspondre à la taille moyenne du cœur du rat - est placé sur la surface épicardique. La sortie du capuchon latex est reliée au tube de silicium, avec l'ouverture distale 10 cm au-dessous du niveau de base du coeur, créant une légère aspiration. La CT produite en continu sur la surface épicardique est collectée dans des flacons refroidis par de la glace pour une analyse plus approfondie. Le taux de formation de CT variait de 17 à 147 μL / min (n = 14) dans le contrôle et les cœurs infarctus, ce qui représente 0,1-1% du perfusat effluent veineux coronaire. Analyse protéomique et perfo élevéLa Chromatographie liquide rmance (HPLC) a révélé que le TC recueilli contient un large spectre de protéines et de métabolites purinergiques.

Introduction

L'insuffisance cardiaque (HF) est la principale cause de décès chez les humains dans le monde ¹ . L'insuffisance cardiaque survient souvent en raison de la myocardite, des insultes ischémiques au myocarde et du remodelage ventriculaire gauche, entraînant une détérioration progressive de la fonction contractile cardiaque et de la qualité de vie des patients. Bien que les progrès de la cardiologie et de la chirurgie cardiaque ont considérablement diminué la mortalité des HF, ils servent simplement de «retardateurs» transitoires d'un processus de maladie inévitablement progressif qui entraîne une morbidité significative. Par conséquen....