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Neurosciences

人工神経を用いた犬の下歯槽神経再生を促進するためエタノールによる頸部交感神経節ブロック ・ アプリケーション

Published: November 30, 2018
doi:
10.3791/58039
, , , ,
1Department of Dental Anesthesia,Nippon Dental University Hospital at Tokyo, 2Department of Dental Anesthesiology,Nippon Dental University School of Life Dentistry at Tokyo, 3Department of Bioartificial Organs, Institute for Frontier Medical Science,Kyoto University

Summary

人工神経管を用いた神経修復に及ぼす頸部交感神経節ブロックを行った。雄性ビーグル成犬それぞれ移植された人工神経と左の下歯槽神経; で 10 mm のギャップの間で左頸部交感神経節を注入することによりブロックされた側方開胸で 99.5% エタノール。

Abstract

ポリグ リコール酸コラーゲン (PGA C) 管は、薄いコラーゲンの膜で構成される複室構造のコラーゲン生体吸収性神経管です。破損した下歯槽神経 (IAN) の治療のためのこれらの管を使用する場合は、良好な臨床結果を実現しています。PGA C チューブを使用して成功した神経の再生の重要な要因は、周囲の組織への血液供給です。頸部交感神経節ブロック (CSGB) は、エリア内の血流が増えて頭頸部領域の交感神経ブロックを作成します。十分な効果を確保するため、封鎖する必要があります、管理局所麻酔薬 1 ~ 2 回いくつかの連続した週間日この手法を調査するための動物モデルを作成する場合、問題が生じます。この制限に対処するため、長期的な口腔顔面領域の血流増加の犬モデルにおけるエタノール誘発性 CSGB を開発しました。このモデルによって PGA C 管打込みによりイアン ・再生を高めることができるかどうかを検討しました。14 ビーグル犬それぞれが左のイアンの 10 mm ギャップ間で PGA C 管と移植されました。イアンは骨に囲まれた下顎管内にある、したがって我々 は神経や血管の損傷のリスクを最小限にするために超音波骨処理から成る圧電手術を選んだ。この方法良い手術結果が得られました。手術後、1 週間これらの犬の 7 つを受けた左 CSGB エタノールの注入による。エタノール誘発 CSGB 結果改善された神経再生、血流量の増加が効果的にイアン ・欠陥で神経再生を促進することを示唆しています。この犬のモデルは、CSGB の長期効果の更なる研究に貢献できます。

Introduction

下歯槽神経 (IAN) の外傷は、多くの場合、医原性、頻繁に第 3 大臼歯の抽出または歯科インプラント1,2,3の配置によって引き起こされています。イアンの傷害は熱で赤字につながるし、感覚知覚、感覚、感覚鈍麻、アロディニアをタッチできます。神経損傷は、保存的治療のみならず他のメソッド、縫合を含む自家配置によっても扱われます。ただし、これらのメソッドには、しばしば症状の改善とドナー サイト4,5,6時神経学的欠陥の欠如が含まれての欠点があります。

人工神経-ポリグ リコール酸コラーゲン (PGA C) 管はもともと日本で開発されました。生体吸収性海綿状コラーゲン7でいっぱいの内部ルーメン チューブです。動物実験で、このチューブは腓骨神経欠陥、ビーグル犬における神経再生を高めるために使用された、自家神経移植8よりも回復の高いレベルを促進するために示されていた。C PGA チューブの臨床応用は、患者末梢神経損傷で 2002 年に始まった。さらに、三叉神経障害 (イアンおよび舌神経)9,10,11の治療に良好な臨床結果を実現しています。正常な神経再生 PGA C チューブを使用しての重要な要因は周囲組織8への血液供給です。頸部交感神経節ブロック (CSGB) 頭頸部領域の交感神経ブロックを作成し、それぞれの支配領域12; への血流が増加したがって、それは、複合性局所疼痛症候群と循環不全13,14,15の治療に使用されています。しかし、増加血液の流れ16,17CSGB の効果にのみ、いくつか実験的調査があった。適切な CSGB の効率を確保するため封鎖する必要がありますと共に適用する局所麻酔薬を一度か二度毎日数週間、この手法を調査する動物モデルを生成するとき従って挑戦を提起します。以前の研究では、この制限に対処するため長期的な口腔顔面領域18増加血流の犬モデルを開発しました。モデルは注入することにより、CSGB を実行することによって生成された 99.5% エタノール。口腔粘膜血流とレーザードップラーと 12 週間週 1 回赤外線サーモグラフィによる鼻部皮膚温度を評価しています。このモデルでは 7-10 週間の口腔顔面領域の血流が増加したことがわかった。

本研究では神経再生に及ぼすエタノールによる CSGB を評価しました。
PGA C 管は左のイアンの 10 mm のギャップの間でビーグル犬に注入されました。一週間後、エタノールを注入することにより CSGB を行った。術後後 3 か月さまざまな CSGB の神経再生に及ぼす影響を評価するための電気生理学的、組織学的、形態学的研究を行った。イアン ・復興 PGA C チューブと CSGB のエタノールを使用して詳細なプロトコルを提供します。

Protocol

本研究はケアと動物の使用のための指針に従って実施され、京都大学動物研究委員会で承認 (京都, 日本; 承認番号: R-16-16)。動物の苦痛を最小限に抑えるために行われたすべての努力と、このレポートのすべてのセクションは、到着に準拠 (動物資源研究領域: in Vivo実験のレポート) のガイドライン。 1. PGA C チューブの作製 吸収性ポリグ リコール酸 (PGA) 管?…

Representative Results

左の CSGB (図 8) 後 1 週間ブロックされた側の顔の皮膚温度の上昇を見ました。 3 ヵ月後の復興再建領域で PGA C 管がおこった下歯槽神経の再生は、再建だけで観察された、復興 + CSGB グループ (図 9 a, B)18。 <p class="jove_content" fo:keep-together.within-page="…

Discussion

エタノールによる CSGB との組み合わせで吸収性神経管を用いたイアン ・再生のための効率的な方法を提案する.この研究のため、マウス、ラットおよびウサギ、寿命は短いと小さなボディサイズがあるし、それゆえ、正確な手術を実行する使用ことはできませんように他の動物モデル以来犬を使用しました。イアンは骨に囲まれた下顎管の中に位置し、手術手技は神経再建術を実行するとき?…

Divulgations

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

この作品は京都の人工臓器部によってサポートされていた大学フロンティア医科学研究所。再生医科学研究所の獣医のスタッフに感謝したいと思います。

Materials

NMP Collagen PS Nippon Meatpackers 301-84621 Atelocollagen extracted from young porcine skin by enzyme treatment
Surgical clippers Roboz Surgical Instrument Company RC-5903
Disposable scalpel (No.15) Kai medical  219ABBZX00073000
VarioSurg3 Nakanishi VS3-LED-HPSC, E1133 Piezoelectric surgery for bone processing
4-0 nylon sutures Ethicon 8881H
8-0 nylon sutures Ethicon 2775G
Isepamicin sulfate Nichi-Iko 620005641
Disposable scalpel (No.10) Kai medical  219ABBZX00073000
30-gauge needle  Nipro 1134
1-0 absorbable stitches Ethicon J347H
3-0 Nylon stitches Ethicon 8872H
Neo Thermo NEC Avio TVS-700 Infrared thermography 
Neuropack Σ  NIHON KOHDEN MEB-5504 Orthodromic recorder for electrophysiological recording
Toluidine Blue  Sigma-Aldrich  T3260-5G
Light microscope Keyence BZ-9000
Mouse anti-human neurofilament protein monoclonal antibody DAKO N1591
Polyclonal rabbit anti-S100 antibody DAKO Z0311
Transmission electron microscopy Hitachi High Technologies Hitachi H-7000
Dynamic cell count Keyence BZ-H1C Software for morphological evaluation
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References

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Shionoya, Y., Sunada, K., Tsujimoto, G., Shigeno, K., Nakamura, T. Ethanol-Induced Cervical Sympathetic Ganglion Block Applications for Promoting Canine Inferior Alveolar Nerve Regeneration Using an Artificial Nerve. J. Vis. Exp. (141), e58039, doi:10.3791/58039 (2018).
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