Aplicações de bloco do gânglio simpático Cervical induzida pelo etanol para promover a regeneração do nervo Alveolar Inferior canino usando um nervo Artificial
Summary
Avaliamos o efeito do bloqueio do gânglio simpático cervical na reparação do nervo usando conduítes de nervo artificial. Cães beagle macho cada implantaram um nervo artificial através de uma abertura de 10 mm no nervo alveolar inferior esquerdo; gânglio simpático cervical esquerdo foi bloqueado pela injeção de etanol 99,5% através de toracotomia lateral.
Abstract
Poliglicólico tubos de colágeno ácido (PGA-C) são tubos de bio-absorvíveis nervo repleto de colágeno de estrutura multi-câmara, que consistem de películas finas de colágeno. Foram alcançados resultados clínicos favoráveis ao usar estes tubos para o tratamento do nervo alveolar inferior danificado (IAN). Um fator crítico para a regeneração do nervo sucesso utilizando tubos de PGA-C é o fornecimento de sangue para o tecido circundante. Bloqueio do gânglio simpático cervical (CSGB) cria um bloqueio simpático na região da cabeça e pescoço, aumentando assim o fluxo sanguíneo na área. Para garantir um efeito adequado, o bloqueio deve ser administrado com anestésicos locais uma a duas vezes por dia durante várias semanas consecutivas; Isso coloca um desafio ao criar modelos animais para investigar esta técnica. Para resolver essa limitação, desenvolvemos um CSGB induzida por etanol em um modelo canino de longo prazo aumento do fluxo sanguíneo na região orofacial. Nós examinamos se regeneração IAN através de implantação de tubo de PGA-C pode ser reforçada por este modelo. Catorze Beagles cada um foram implantados com um tubo de PGA-C através de uma abertura de 10 mm em IAN a esquerda. O IAN está localizado dentro do canal mandibular, cercado por osso, portanto optamos por cirurgia piezoeléctrica, consistindo de ondas ultra-sônicas, para processamento de osso, a fim de minimizar o risco de lesão do nervo e dos vasos. Com esta abordagem, obteve-se um bom resultado cirúrgico. Uma semana após a cirurgia, sete destes cães foram submetidas à esquerda CSGB por injeção de etanol. Induzida por etanol CSGB resultou na regeneração nervosa melhorada, sugerindo que o aumento do fluxo sanguíneo efetivamente promove a regeneração do nervo em defeitos do IAN. Este modelo canino pode contribuir para futuras pesquisas sobre os efeitos a longo prazo da CSGB.
Introduction
Em muitos casos, lesão traumática do nervo alveolar inferior (IAN) é iatrogênica, sendo frequentemente causada pela extração do terceiro molar ou a colocação de implantes dentários1,2,3. Lesão de IAN pode levar a déficits em térmica e toque sensações bem como parestesia, disestesia, hipoestesia e alodinia. Lesão do nervo é tratada não só pela terapia conservadora, mas também por outros métodos, incluindo a sutura e colocação de auto-enxerto. No entanto, esses métodos têm desvantagens, que muitas vezes incluem a falta de melhoria do sintoma e defeitos neurológicos no doador local4,5,6.
O nervo artificial — polyglycolic tubo de ácido-colágeno (PGA-C) foi originalmente desenvolvido no Japão. É um tubo bio-absorvíveis com seu lúmen interno preenchido com um espongiforme colágeno7. Em experimentos com animais, este tubo foi usado para melhorar a regeneração nervosa em cães beagle com defeito do nervo fibular e foi mostrado para promover maior nível de recuperação que o transplante de nervo autólogo8. A aplicação clínica do PGA-C tubo começou em 2002, em pacientes com lesões de nervo periférico. Além disso, os resultados clínicos favoráveis foram obtidos no tratamento da neuropatia trigeminal (IAN e nervo lingual)9,10,11. Um fator crítico para a regeneração do nervo bem sucedida utilizando tubos de PGA-C é o fornecimento de sangue para o tecido circundante8. Bloqueio do gânglio simpático cervical (CSGB) cria um bloqueio simpático na região da cabeça e pescoço e aumenta o fluxo de sangue para a respectiva área inervado12; assim, ela tem sido usada no tratamento da síndrome da dor regional complexa e insuficiência circulatória13,14,15. No entanto, houve apenas algumas investigações experimentais sobre a eficácia de CSGB no sangue crescente fluxo de16,17. Para assegurar a adequada eficiência CSGB, o bloqueio deve ser aplicado em conjunto com anestésicos locais, uma vez ou duas vezes diariamente por várias semanas, posando, portanto, um desafio ao gerar modelos animais para investigar esta técnica. Para resolver essa limitação, em um estudo anterior, desenvolvemos um modelo canino de longo prazo aumento do fluxo sanguíneo na região orofacial18. O modelo foi gerado através da realização de um CSGB pela injeção de etanol 99,5%. Avaliamos o fluxo sanguíneo da mucosa oral e a temperatura da pele nasal pelo laser Doppler flowmetry e termografia infravermelha uma vez por semana durante 12 semanas. Nós achamos que o fluxo de sangue da região orofacial foi aumentado para 7-10 semanas neste modelo.
No presente estudo, foram avaliados os efeitos da CSGB induzida pelo etanol na regeneração do nervo.
O tubo de PGA-C foi implantado em cães beagle através de uma abertura de 10 mm em IAN a esquerda. Uma semana depois, CSGB foi realizada através da injeção de etanol. Três meses após a cirurgia, realizamos uma variedade de Estudos eletrofisiológicos, histológicas e morfológicas para avaliar os efeitos da CSGB na regeneração do nervo. Nós fornecemos um protocolo detalhado para reconstrução de IAN usando um tubo de PGA-C e CSGB induzida pelo etanol.
Protocol
Representative Results
Discussion
Apresentamos um método eficiente para regeneração de IAN usando um tubo de nervo bioabsorvível em combinação com CSGB induzida pelo etanol. Para este estudo foi utilizado os cães, desde outros modelos animais, como ratos, ratos e coelhos, têm uma esperança de vida curta e tamanho de corpo pequeno e portanto, não podem ser usados para executar os procedimentos cirúrgicos precisos. Como o IAN está localizado dentro do canal mandibular, cercado por osso, uma técnica cirúrgica é necessária para evitar dano do…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Este trabalho foi financiado pelo departamento de órgãos Bioartificial em Kyoto University Institute para a ciência médica de fronteira. Gostaríamos de agradecer ao pessoal veterinário do Instituto de ciência médica de fronteira.
Materials
| NMP Collagen PS | Nippon Meatpackers | 301-84621 | Atelocollagen extracted from young porcine skin by enzyme treatment |
| Surgical clippers | Roboz Surgical Instrument Company | RC-5903 | |
| Disposable scalpel (No.15) | Kai medical | 219ABBZX00073000 | |
| VarioSurg3 | Nakanishi | VS3-LED-HPSC, E1133 | Piezoelectric surgery for bone processing |
| 4-0 nylon sutures | Ethicon | 8881H | |
| 8-0 nylon sutures | Ethicon | 2775G | |
| Isepamicin sulfate | Nichi-Iko | 620005641 | |
| Disposable scalpel (No.10) | Kai medical | 219ABBZX00073000 | |
| 30-gauge needle | Nipro | 1134 | |
| 1-0 absorbable stitches | Ethicon | J347H | |
| 3-0 Nylon stitches | Ethicon | 8872H | |
| Neo Thermo | NEC Avio | TVS-700 | Infrared thermography |
| Neuropack Σ | NIHON KOHDEN | MEB-5504 | Orthodromic recorder for electrophysiological recording |
| Toluidine Blue | Sigma-Aldrich | T3260-5G | |
| Light microscope | Keyence | BZ-9000 | |
| Mouse anti-human neurofilament protein monoclonal antibody | DAKO | N1591 | |
| Polyclonal rabbit anti-S100 antibody | DAKO | Z0311 | |
| Transmission electron microscopy | Hitachi High Technologies | Hitachi H-7000 | |
| Dynamic cell count | Keyence | BZ-H1C | Software for morphological evaluation |
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