Aplicaciones en bloque del ganglio simpático Cervical inducido por etanol para promover la regeneración del nervio Alveolar Inferior canino utilizando un nervio Artificial
Summary
Se evaluó el efecto de bloque del ganglio simpático cervical en la reparación del nervio mediante conductos artificiales nerviosas. Perros beagle macho fueron cada uno implantados con un nervio artificial a través de un hueco de 10 mm en el nervio alveolar inferior izquierdo; ganglio simpático cervical izquierdo fue bloqueado inyectando etanol al 99.5% vía toracotomía lateral.
Abstract
Poliglicólico colágeno ácido (PGA-C) los tubos son bio-absorbible del nervio con colágeno de estructura multi-cámara, que consisten en películas delgadas de colágeno. Se han logrado resultados clínicos favorables al utilizar estos tubos para el tratamiento del nervio alveolar inferior dañado (IAN). Un factor crítico para la regeneración de nervio éxito usando tubos de PGA-C es el suministro de sangre a los tejidos circundantes. Bloqueo de ganglio simpático cervical (CSGB) crea un bloqueo simpático en la región de cabeza y cuello aumentando el flujo sanguíneo en la zona. Para asegurar un efecto adecuado, el bloqueo debe ser administrado con anestésicos locales una o dos veces al día durante varias semanas consecutivas; Esto plantea un desafío al crear modelos animales para la investigación de esta técnica. Para solucionar esta limitación, hemos desarrollado un CSGB etanol-inducida en un modelo canino de aumento a largo plazo en el flujo sanguíneo en la región orofacial. Se examinó si la regeneración IAN mediante implantación de tubo de PGA-C puede ser mejorada por este modelo. Cada uno de los catorce Beagles fueron implantados con un tubo de PGA-C a través de un hueco de 10 mm en el izquierdo IAN. El IAN está situado en el canal de la mandíbula rodeado de hueso, por lo tanto elegimos cirugía piezoeléctrica, que consiste en ondas de ultrasonido, para el procesamiento de hueso, con el fin de minimizar el riesgo de lesión del nervio y los vasos. Se obtuvo un buen resultado quirúrgico con este enfoque. Una semana después de la cirugía, siete de estos perros fueron sometidos a CSGB izquierdo por la inyección de etanol. CSGB inducida por etanol dio lugar a la regeneración del nervio mejora, sugiriendo que el aumento del flujo sanguíneo efectivamente promueve la regeneración del nervio en defectos de IAN. Este modelo canino puede contribuir a la investigación adicional sobre los efectos a largo plazo de CSGB.
Introduction
En muchos casos, lesión traumática del nervio alveolar inferior (IAN) es iatrogénica, siendo causada por la extracción del tercer molar o la colocación de implantes dentales1,2,3. Lesión del IAN puede conducir a déficits en térmica y táctil sensaciones como parestesia, disestesia, hipoestesia y alodinia. Lesión del nervio se trata no sólo de terapia conservadora, sino también por otros métodos, incluyendo la sutura y colocación de autoinjerto. Sin embargo, estos métodos tienen inconvenientes, que a menudo incluyen la falta de mejoría de los síntomas y defectos neurológicos en el sitio donante4,5,6.
El nervio artificial — tubo de poliglicólico (PGA-C) ácido del colágeno fue desarrollado originalmente en Japón. Es un bio-absorbible tubo con su luz interior llenado de un colágeno espongiforme del7. En experimentos con animales, este tubo se utilizó para realzar la regeneración del nervio en perros beagle con defecto del nervio peroneo y fue demostrado para promover mayor nivel de recuperación que nervio autólogo trasplante8. La aplicación clínica de la PGA-C tubo comenzó en 2002 en pacientes con lesiones de nervio periférico. Por otra parte, se han logrado resultados clínicos favorables en el tratamiento de la neuropatía del trigeminal (IAN y nervio lingual)9,10,11. Un factor crítico para la regeneración de nervio éxito usando tubos de PGA-C es el suministro de sangre a los tejidos circundantes8. Bloqueo de ganglio simpático cervical (CSGB) crea un bloqueo simpático en la región de cabeza y cuello y aumenta el flujo sanguíneo a la zona inervada respectivos12; así, se ha utilizado en el tratamiento del síndrome de dolor regional complejo e insuficiencia circulatoria13,14,15. Sin embargo, han sido sólo algunas investigaciones experimentales sobre la eficacia de CSGB en cada vez mayor flujo de sangre16,17. Para asegurar la adecuada eficiencia CSGB, el bloqueo debe aplicarse junto con anestésicos locales una vez o dos veces al día durante varias semanas, así planteando un desafío al generar modelos animales para investigar esta técnica. Para hacer frente a esta limitación, en un estudio anterior, se desarrolló un modelo canino de flujo de sangre creciente a largo plazo en la región orofacial del18. Se generó el modelo realizando una CSGB inyectando etanol al 99.5%. Se evaluaron el flujo sanguíneo mucosa oral y la temperatura de la piel nasal por flujometría Doppler láser y termografía infrarroja una vez por semana durante 12 semanas. Se encontró que el flujo sanguíneo de la región orofacial se aumentó de 7 a 10 semanas en este modelo.
En el presente estudio, evaluaron los efectos de CSGB inducida por etanol en la regeneración del nervio.
El tubo de PGA-C fue implantado en perros beagle a través de un hueco de 10 mm en el izquierdo IAN. Una semana más tarde, CSGB fue realizada mediante la inyección de etanol. Tres meses después de la cirugía, realizamos una variedad de estudios electrofisiológicas, histológicas y morfológicas para evaluar los efectos de CSGB en la regeneración del nervio. Proporcionamos un protocolo detallado para reconstrucción de IAN usando un tubo de PGA-C y CSGB inducida por etanol.
Protocol
Representative Results
Discussion
Presentamos un método eficiente para la regeneración de IAN utilizando un tubo de bioabsorbable del nervio en combinación con CSGB inducida por etanol. Para este estudio se utilizaron perros, desde otros modelos animales, como ratones, ratas y conejos, tienen una corta esperanza de vida y tamaño de cuerpo pequeño y por lo tanto no se puede utilizar para realizar los procedimientos quirúrgicos precisos. Como el IAN se encuentra dentro del canal mandibular rodeado de hueso, una técnica quirúrgica es necesaria para …
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Este trabajo fue financiado por el Departamento de órganos bioartificiales en Kyoto Instituto Universitario de ciencias médicas de la frontera. Nos gustaría agradecer al personal veterinario del Instituto de ciencias médicas de la frontera.
Materials
| NMP Collagen PS | Nippon Meatpackers | 301-84621 | Atelocollagen extracted from young porcine skin by enzyme treatment |
| Surgical clippers | Roboz Surgical Instrument Company | RC-5903 | |
| Disposable scalpel (No.15) | Kai medical | 219ABBZX00073000 | |
| VarioSurg3 | Nakanishi | VS3-LED-HPSC, E1133 | Piezoelectric surgery for bone processing |
| 4-0 nylon sutures | Ethicon | 8881H | |
| 8-0 nylon sutures | Ethicon | 2775G | |
| Isepamicin sulfate | Nichi-Iko | 620005641 | |
| Disposable scalpel (No.10) | Kai medical | 219ABBZX00073000 | |
| 30-gauge needle | Nipro | 1134 | |
| 1-0 absorbable stitches | Ethicon | J347H | |
| 3-0 Nylon stitches | Ethicon | 8872H | |
| Neo Thermo | NEC Avio | TVS-700 | Infrared thermography |
| Neuropack Σ | NIHON KOHDEN | MEB-5504 | Orthodromic recorder for electrophysiological recording |
| Toluidine Blue | Sigma-Aldrich | T3260-5G | |
| Light microscope | Keyence | BZ-9000 | |
| Mouse anti-human neurofilament protein monoclonal antibody | DAKO | N1591 | |
| Polyclonal rabbit anti-S100 antibody | DAKO | Z0311 | |
| Transmission electron microscopy | Hitachi High Technologies | Hitachi H-7000 | |
| Dynamic cell count | Keyence | BZ-H1C | Software for morphological evaluation |
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